181413. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fruktóztartalmú szacharid készítmény előállítására

9

181413

10

1. táblázat

Redukáló cukor meghatározás1

Hőfok

•c

Enzimmennyiség2

Redukáló

cukor

mg/ml

pH

Reduki ló cukor mg/ml

pH

Redukáló

cukor

mg/ml

24 óra

43 óra

66 óra

20

219

5,lf

288

4,90

346

30

282

5,20

360

4,95

420

1 A fruktozil-transzferáz egység meghatározásánál leírt módszer. * Egység enzim/gramm szacharóz.

2. táblázat

Szénhidrát-összetétel meghatározása nagy nyomású folyadékkromatográfiával Reakcióhőmérséklet 55 °C

Enzimadag

egység/gramm

szacharóz

Reakcióidő

óra

Dextróz

%

Levulóz

%

dp3

%

DP,

%

24

31,7

2,3

10,0

25,0

31,0

10

43

34,5

3,2

9,4

17,0

35,0

66

36,7

3,9

8,6

15,0

35,8

24

33,9

2,8

8,8

19,7

34,8

20

43

37,4

4,2

7,9

12,1

38,4

66

40,5

4,9

7,4

10,8

36,4

24

37,4

4,0

7,1

12,5

39,0

30

43

41,8

5,9

6,8

11,4

34,1

66

46,1

7,5

7,0

11,5

27,9

Reakcióhőmérséklet 60 °C

24

32,2

2,8

6,1

24,3

30,6

10

43

35,0

4,0

9,8

18,2

33,0

66

36,7

5,4

9,4

16,0

32,5

24

35,5

3,8

8,4

17,1

35,2

20

43

38,4

5,0

8,0

12,3

36,3

66

41,3

6,6

7,9

11,1

33,1

24

39,0

5,5

7,1

12,1

36,3

30

43

43,7

7,1

7,3

11,0

30,9

66

47,8

9,2

7,4

11,1

24,9

A rövidítések jelentése az alábbi:

DP2: 2 szacharid egységből álló poliszacharid DP3: 3 szacharid egységből álló poliszacharid DP4+ : 4-nél több szacharid egységből álló poliszacharid

A 3. példa bemutatja az enzim hőstabilitását a szubsztrát jelenlétében 55 °C-on és 60 °C-on, 66 órán keresztül, pH

5,5-ön, így szemléltetve az enzim gyakorlati használhatóságát. A találmány szerinti új fruktozil-transzferáz készítménnyel szacharóz enzimatikus átalakítása útján termelt szekunder szubsztrát a szénhidrát-analízis tanúsága szerint magas fruktóztartalmú szirupok szacharózból történő előállítására alkalmas, potenciálisan értékes termék, mivel a túlsúlyban lévő alkotórészek dextróznak és olyan polimereknek bizonyultak, amelyek ezt követő hidrolízis után fruktózt szolgáltatnak túlsúlyban lévő monoszacharidként. A példa még azt is bizonyítja, hogy a találmány szerinti új enzim még

60% szacharózkoncentrációnál is hatásos. Ezenkívül bizonyítja az enzim működőképességét nagy glükózkoncentráció jelenlétében is.

4. példa

A hőmérséklet hatása az enzimaktivitásra.

A hőmérséklet hatását a fruktozil-transzferáz enzim reakciósebességére a „Technicon Autoanalyzer II” segítségével a következőképpen állapítottuk meg:

A reakcióelegy 7,5 ml 80%-os szacharóz oldatból, 2,3 ml

55

60

65

5