181402. lajstromszámú szabadalom • Eljárás neuroleptikus aktivitású új peptidek előállítására
13 181402 14 (8) H-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-MeLeu-OtBu Rf = 0,30 (Si02) (9) H-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leucinol Rf=0,16 (Si02) (10) H-Ser-GIn-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-Phe-D-Lys(Boc)-OtBu Rf = 0,48 A (7), (8), (9) és (10) példa szerinti termékeket az F(6) példában megadott módon állítjuk elő. Az Rf érték meghatározásánál futtatószerként CHC13 : CH3OH : Wa (70: 30: 5) elegyet alkalmazunk. I. példa H-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-OH előállítása 1,28 Boc-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-OH-t és 308 mg HOBt 10 ml DMF-ben oldunk és az oldatot — 22C°-ra hütjük. A hűtött oldathoz 1,05 H-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-OtBu 5 ml dimetilformamiddal készített oldatát és 1 mólekvivalens NEM-t adunk. Az elegy pH-ját NEM-vel 6,5-ös értékre állítjuk, majd 247 mg DCGI-t adunk hozzá. A reakcióelegyet nitrogénatmoszférában 15 percig — 22C°-on, 8 órán át szobahőmérsékleten, majd 12 órán át 35 C°-on keverjük, a kivált DCHU-t szűrjük, a szűrletet mossuk, majd szárítjuk. A szűrletből kivált csapadékot mossuk és szárítjuk. Kitermelés: 77%, 212—214 C°-on a termék bomlik. Rf=0,79 (Si02). Futtatószer: CHC13 : CH3OH : Wa (70: 30: 5). A kapott védett termék 1,65 g-ját 30 ml 90%-os TFA-hoz adjuk, majd a reakcióelegybe néhány csepp tere— butil-szulfidot csepegtetünk. A reakcióelegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd éterre öntjük. A kivált szilárd anyagot szűrjük, majd szárítjuk. Az anyagot 30 ml 1 : 1 arányú terc-butanol—víz elegyben oldjuk, majd acetát formában levő ioncserélő gyantát (LEWATIT) adunk az oldathoz és a reakcióelegyet 30 percig keverjük. Az ioncserélő gyantát szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet szárazra pároljuk. Kitermelés: 1,2 g. Rf = 0,26 (Si02) Futtatószer: Bu : Py : Ac : Wa (2: 0,75 : 0,25 :1) Az anyagot 4:1:5 arányú Bu : Ac : Wa oldószerrendszerben való ellenáramú eloszlatással tisztítjuk. Kitermelés: 680 mg. II. példa H-Gly-Gly-Phe-Met(0)-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr- Pro-Leu-Val-Thr-Leu-OH előállítása 200 mg I. példa szerint előállított pepiidet 20 ml jégecetben oldunk, majd 0,08 ml 30%-os hidrogénperoxidot adunk hozzá. A reakcióelegyet 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a reakcióelegyhez 300 mg platinaszivacsot adunk jégecetes közegben és az elegyet további 15 percig keverjük. A szilárd anyagot szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet szárazra pároljuk. Termelés: 190 mg. A kapott peptidet 4:1:5 arányú Bu : Ac : Wa oldószerrendszerben való ellenáramú eloszlatással kromatografálva tisztítjuk. Termelés: 150 mg (acetát formájában). Rf=0,20 (Si02). Futtatószer: Bu:Py:Ac:Wa (2 : 0,75 : 0,25 :1) III. példa H-Gly-Gly-Phe-Met(02)-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-OH előállítása 200 mg I. példa szerint előállított peptidet 5 ml vízhez adjuk, majd hozzáadunk 0,025 ml 0,5 mól ammóniummolibdátot, 0,0125 ml hidrogén-perklorátot és 0,075 ml 30%-os hidrogén-peroxidot. A reakcióelegyet 4 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd 5 ml 1:1 arányú terc.butanol—víz elegyet és acetát formában levő ioncserélő gyantát adunk hozzá. 30 perces keverés után az ioncserélő gyantát szűréssel eltávolítjuk és a szűrletet szárazra pároljuk. Termelés: 180 g peptid (acetát formában) Rf=0,23 (Si02). Futtatószer: Bu : Py : Ac : Wa (2 : 0,75 : 0,25 : 1) IV. példa Az I. példában megadott módon az alábbi peptideket állítjuk elő: 1. H-Ala-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-V al-Thr-Leu-OH [Kiindulási anyagok: az E(3) és F(l) példa termékei] Rf = 0,28 2. H-Gly-Ala-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-OH [Kiindulási anyagok: az E(4) és F(l) példa termékei] Rf=0,27 3. H-Leu-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-GIn-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-OH [Kiindulási anyagok: az E(5) és F(l) példa termékei] Rf = 0,30 4. H-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-D-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-OH [Kiindulási anyagok: az E(6) és F(l) példa termékei] Rf = 0,27 5. H-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Gln-Lys-Ser-Glu-Thr-Pro-Leu-V al-Thr-Leu-OH [Kiindulási anyagok: az E(7) és F(2) példa termékei] Rf=0,29 6. H-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-D-Leu-OH [Kiindulási anyagok: az E(2) és F(3) példa termékei] Rf=0,33 7. H-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-NHCH3 [Kiindulási anyagok: az E(2) és F(4) példa termékei] Rf=0,31 8. H-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-OCH3 [Kiindulási anyagok: az E(2) és F(5) példa termékei] Rf = 0,37 9. H-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-Phe-Lys-OH [Kiindulási anyagok: az E(2) és F(6) példa termékei] Rf = 0,24 10. H-Gly-Gly-Phe-Met-Thr-Ser-Glu-Lys-Ser-Gln-Thr-Pro-Leu-Val-Thr-Leu-Phe-OH [Kiindulási anyagok: az E(2) és F(7) példa termékei] Rf = 0,30 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60. 65 7
