181013. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új enkefalin analógok előállítására
13 181013 14 rinti teiméket kapunk. Op.: 255-257 °C; [a]20 =+24,5° (c=l, In nátrium-hidroxidban); R| 0,30—0,40. 4. példa L-Tirozil-D-alanil-glicil-L- fenil alanil-L-alfa-amino-pentán-szulfonsav előállítása 1. lépés: terc-butiloxikarbonil-L-tirozil-D-alanil-glicin-pentakló rfenilészter 6,15 g (15 mmól) terc-butiloxikarbonil-L-tirozü-D-alanil-glicint [Pless és munkatársai: Helv. Chim. Acta, 62, 398 (1979)] A 2. példa 5. lépésében leírt módon aktív észterré alakítunk. 7,6 g (76,6%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 222 °C; R‘2 0,1-0,2. 2. lépés: terc-butiloxikarbonil-L-tirozil-D-alanil-glicil-L-fenilalanil-L-alfa-amino-pentán-szulfonsav-trietilamin-só 0,95 g (3 mmól) dipeptidet (2. példa, 4. lépés) és 2,1 g (3,15 mmól) védett tripeptid aktív észtert (4. példa, 1. lépés) a 2. példa 6. lépésében leírt módon kondenzálunk, azzal az eltéréssel, hogy tercier bázisként 0,4, illetve 0,45 ml trietilamint használunk. 1,99 g (82,2%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 125 °C; R* 0,35-0,45; [a]2s = —25,1° (c = 1, dimetilformamidban). 3. lépés: L-tirozil-D-alanil-glicil-L-fenilalanil-L-alfa-amino-pentánszulfonsav 1,4 g (1,75 mmól) védett pentapeptid-sót (2. lépés) a 2. példa, 7. lépésében leírt módon alakítunk tovább, azzal az eltéréssel, hogy a csapadékot 10 ml vízzel is mossuk. 0,75 g (70,4%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 235—240 °C; R* 0,35-0,45; R2 0,1-0,2; [opD° = +5,9° (c = 1, 80%-os ecetsavban). 5. példa L-Tirozil-D-metionil-glicil-L-fenilalanil-L-alfa-aminopentán-foszfonsav előállítása I. lépés: terc-butiloxikarbonil-D-metionil-glicil-benzil-észter 12,9 g (30 mmól) terc-butiloxikarbonil-D-metionin-diciklohexilamin-sót és 0,35 ml (3 mmól) N-metil-morfolint 120 ml dimetilformamidban oldunk, majd az oldatot -10 °C-ra hűtjük. Ezen a hőmérsékleten keverés közben hozzáadunk 3,95 ml (30 mmól) klórhangyasav-izobutilésztert. 10 perc eltelte után -20°C-ra hűtjük a reakcióelegyet, majd II, 15 g (33 mmól) glicin-benzilészter-p-toluolszulfonát és 3,7 ml (33 mmól) N-metil-morfolin 50 ml dimetilformamidban készített és -20 °C-ra hűtött oldatát adjuk hozzá. A reakcióelegy keverését 10 percig -10 °C-on, 1 órán át 0 °C-on és éjszakán át szobahőmérsékleten folytatjuk. Ezt követően a reakcióelegyet csökkentett nyomáson betöményítjük, 200 ml etilacetátban és 100 ml 0,01 n kénsavban oldjuk, majd az etilacetátos fázist kétszer 30 ml 0,01 n kénsavval és kétszer 30 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szántjuk, csontszénnel derítjük, és csökkentett nyomáson bepároljuk. A párlási maradékot petroléterrel eldörzsöljük, szűrjük, petroléterrel mossuk és vákuum-exszikkátorban szárítjuk. 11,3 g (94,8%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 67-68 °C; R* 0,8-0,9; Rf14 0,35-0,45; [a]20 - +10,4° (c = 1, dimetilformamidban). 2. lépés: terc-butiloxikarbonil-L-tirozil--D-metionil-glicin 9,9 g (25 mmól) védett dipeptid-észtert (1. lépés) 50 ml 11-15% sósavat tartalmazó etilacetátban oldunk, és 30 perc után csökkentett nyomáson bepároljuk. A maradékot vákuum-exszikkátorban kálium-hidroxid mellett szárítjuk. Az így kapott terméket (R2 0,15-0,25) 50 ml dimetilformamidban oldjuk, hozzáadunk 2,8 ml (25 mmól) N-metil-morfolint és 14,55 g (27,5 mmól) terc-butiloxikarbonil-L-tirozin-. -pentaklórfenilésztert. A reakcióelegyet éjszakán át keverjük. Az első két órában hozzáadunk 3,05 ml (27,5 mmól) N-metil-morfolint 5 részletben. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson bepároljuk, a maradékot 150 ml etilacetátban és 50 ml vízben oldjuk. Az etilacetátos fázist háromszor 30 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonáttal, háromszor 30 ml vízzel, háromszor 30 ml — jeges vízzel hűtött — 0,1 n sósavval és háromszor 30 ml vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, csontszénnel derítjük, maid csökkentett nyomáson bepároljuk. A párlási maradékot (R^2 0,1—0,2) 100 ml metanolban oldjuk, majd 30 ml vizet és 54 ml In nátrium-hidroxidot adunk hozzá. A reakcióelegyet egy napig szobahőmérsékleten állni hagyjuk. Ezt követően a metanolt csökkentett nyomáson kidesztilláljuk, a vizes oldatot háromszor 20 ml etilacetáttal kirázzuk, majd szilárd citromsavval pH = 3-ra savanyítjuk. A kivált anyagot kiszűijük, vízzel mossuk és vákuum-exszikkátorban szárítjuk. 7,6 g (64,7%) cím szerinti terméket kapunk. Op.: 194 °C; R2 0,24-0,34; [a]20 =4-11.44° (c = 1, dimetilformamidban). 3. lépés: L-Tirozil-D-metionil-glicil-L-fenilalanü-L-alfa-amino-pentán-foszfonsav 1,13 g (2,4 mmól) terc-butiloxikarbonil-L-tirozü-D-metionil-glicinből (2. lépés) és 0,63 g (2 mmól) L-fenil-alanil-L-alfa-amino-pentán-foszfonsavból (1. példa, 4. lépés) kiindulva és az 1. példa 7. lépésében leírt módon eljárva 0,9 g (70%) cím szerinti terméket kapunk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
