180926. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a központi idegrendszerre ható, új TRH-analóg tripeptid-amidok előállítására
15 180926 16 kapunk, olvadáspont: 198—200 °C, R® =0,40, [a]25 =-(-10,2° (c=l, metanolban). 4. lépés terc-Butiloxikarbonil-L-glutaminü-L-norvalü-L-meüonin-amid 2,84 g (10 mmól) H-Nva-Met-NH2. HCl-ot 40 ml DMFA-ban szuszpendálunk és a szuszpenzióhoz, keverés közben 1,4 ml (10 mmól) trietilamint és 4,53 g (11 mmól) BOC-Gln-OPFP-t adunk. A reakcióelegyhez 5 perc után újabb 1,4 ml (10 mmól) trietilamint adunk, majd további 10 perc keverés után a sűrű szuszpenziót vákuumban bepároljuk és a szilárd maradékot etanollal eldörzsöljük. A 4,82 g nyers terméket 50 ml etanollal felforraljuk, s a szuszpenziót néhány óra hosszat hűtőszekrényben tartjuk, majd szűrjük. így 4,08 g (86%) BOC-Gln-Nva- Met-NH2-ot kapunk, olvadáspont: 237—238 °C R* =043, [a] Q =—37,1° (c=l, ecetsavban). 5. lépés L-Piroglutamil-L-norvalil-L-metionin-amid 3,8 g (8 mmól) BOC-Gln-Nva-Met-NH2-ot feloldunk 100 ml 98%-os hangyasavban, az oldatot 2 óra hosszat szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk. A maradék olajat feloldjuk 50 ml ecetsavban és az oldatot 2 perc forralás után vákuumban újra bepároljúk. A géles maradékot éterrel eldörzsöljük. Így 2,8 g (98%) Glp-Nva-Met-NH2-ot kapunk olvadáspont: 249—250 °C (bomlik), R'> =0,58, [a]2D5 = —48,4° (c=l, ecetsavban). 8. példa N-/L-Piroglutamil-L-leucil/pirrolidin 1 1. lépés N-/L-Leucíl/-pirrolidin-hidroklorid 3,46 g (15 mmól) BOC-Leu-OH-t feloldunk 50 ml etilacetátban, az oldathoz 2,1 ml (15 mmól) trietilamint adunk, majd lehűtjük —15 °C-ra. Ezután keverés közben 1,97 ml (16 mmól) pivaloilkloridot csepegtetünk hozzá —10 °C alatti hőmérsékleten és a keletkezett szuszpenzióhoz, 10 perc keverés után 1,37 ml (16,5 mmól) pirrolidint csepegtetünk ugyanezen a hőmérsékleten. Becsepegtetés után a reakcióelegyet még fél óra hosszat —10 °C-on keverjük, majd 3 órát 5 °C- on állni hagyjuk és háromszor 10 ml n sósavval, háromszor 10 ml n nátrium-hidrogén-karbonátoldattal és egyszer 10 ml vízzel kirázzuk. Az etilacetásos oldatot vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradék olajat feloldjuk 5 ml etilacetátban és az oldathoz 10 ml 5 n sósavas etilacetátot öntünk. 1 óra állás után az éterrel hígított oldatot vízzel kirázzuk, a vizes oldatot éteres mosás után kálium-karbonáttal meglúgosítva kloroformmal kirázzuk. A kloroformos oldatot vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk, bepároljuk, az olajos maradékot feloldjuk 10 ml éterben és az oldat pH-ját tömény sósavas etilacetáttal 3-ra állítjuk. A kivált kristályokat kiszűrjük, s így 2,41 g (73%) H-Leu-pirrolidin. HCl-ot kapunk, olvadáspont: 170—174 °C (bomlik), R5 =0,37. 2. lépés N-jBenzüoxikarbonil-L-piroglutamü-L-leucilf-pirrolidin 1,7 g (7,7 mmól) H-Leu-pirrolidin. HCl-ot 3,0 g (7 mmól) Z-Glp-OPFP-t és 1,08 ml (7,7 mmól) trietilamint feloldunk 20 ml kloroformban és az oldathoz 5 perc után még 0,98 ml (7 mmól) trietilamint adunk. További 5 perc állás után az oldatot 30 ml kloroformmal hígítva kirázzuk kétszer 10 ml n sósavval, háromszor 10 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és egyszer 10 ml vízzel, vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk, és bepároljuk. Az olajos maradékot n-hexánnal kristályosítjuk és a 2,85 g nyers terméket etanol-éter elegyből átkristályosítjuk. Így 2,14 g (71%) Z-Glp-Leu-pirrolídint kapunk, olvadáspont: 109—110 °C, Rí =0,55, [a]n=—53,3° (c=l, ecetsavban). Elemzési eredmények a C^iHiiOrjN.i összegképlet (molekulasúly: 429,52) alapján: számított C 64,32%, H 7,27%, N 9,78%; talált: C 64,31%, H 7,47%, N 9,78%. 3. lépés N-/L-Piroglutamil-L-leucil/-pirrolidin 2,0 g (4,66 mmól) Z-Glp-Leu-pirrolidint feloldunk 40 ml metanolban, az oldathoz 0,4 g 10%-os csontszenes palládium-katalizátort adunk és 1 órán keresztül hidrogéngázt buborékoltatunk át rajta. A katalizátor kiszűrése után a szűr letet bepároljuk, a maradék olajat éterben feloldva éjszaka hidegen állni hagyjuk, majd a kivált kristályokat kiszűrjük. így 1,25 g (91%) Glp-Leu-pirroIidint kapunk, olvadáspont: 103— 104 °C, Rj =0,65,[a] D =—31,6° (c=l, ecetsavban), aminosavanalizis: Glu 1,00 (1,0); Leu 1,00 (1,0). 9. példa N-/L-Piroglutamil-L-leucil/-piperidin 1. lépés N-/L-Leucil/-piperidin-hidroklorid 3,46 g (15 mmól) BOC-Leu-OH-t feloldunk 50 ml etilacetátban, az oldathoz 2,1 ml (15 mmól) trietilamint adunk és lehűtjük —15 °C-ra. Ezen a hőmérsékleten, keverés közben először 1,97 ml (16 mmól) pivaloil-kloridot, majd 10 perc után 1,65 ml (16,5 mmól) piperidint csepegtetünk bele. Becsepegtetés után a reakcióelegyet még fél óra hosszat keverjük —10 °C-on, majd éjszaka hűtőszekrényben állni hagyjuk. Ezután a csapadékot kiszűrjük és a szűrletet háromszor 10 ml n sósavval, háromszor 10 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és egyszer 10 ml vízzel kirázzuk, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk és bepároljuk. A maradék olajat feloldjuk 15 ml 4 n sósa vas etilacetátban, az oldatot 1 óra hosszat állni hagyjuk, majd éterrel hígítva éjszaka hűtőszekrénybe tesszük. Másnap a csapadékot kiszűrjük. Így 2,0 g (BOC-Leu-OH-ra szá-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
