180926. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a központi idegrendszerre ható, új TRH-analóg tripeptid-amidok előállítására
5 180926 6 40 mg/kg i. p. pargilin (N-etil~N-benzil-2-propargil-amin) után és 100 mg/kg i. p. L-dopa előtt kezeltük az állatokat intraperitoneálisan 20 mg/kg TRH-val, ill. analógjaival. Az állatok lokomotoros aktivitást a f.enti időpontokban a 5 TRH-ra vonatkozó %-ban adjuk meg. Kísérleteinkhez anyagonként tizenöt 18—22 g-os CFLP (LATI) hím egeret használtunk. 3. Rezerpin hipotermia-megfordító hatás egéren [B. M. Askew: Life Sei. 2, 725—730 (1963.)] 10 5 mg/kg i, p. rezerpin után 16 órával kezeltük az állatokat TRH, illetve analógjai 20 mg/kg-os i. p. dózisával. Az állatok rektális hőmérsékletét rezerpinkezelés előtt (norm), rezerpin kezelés után 16 15 órával (réz) és az anyagok adása után 2 órán át (kezelés után) óránként mértük Ellab hőmérővel. A táblázaton az állatok átlagos hőmérsékletét tüntettük fel. Csoportonként tíz—tíz 18—22 g-os 20 CFLP (LATI) hím egeret használtunk. 4. Hexobarbital-alvásidő 60 mg/kg hexobarbital-Na (EvipanR Bayer) intravénás beadása után 10 perccel kezeltük az állatokat intraperitoneálisan TRH és analógjai 25 20 mg/kg dózisával. Az alvásidő-változást a hexobarbital-alvásidő %-ában tüntettük fel. Anyagonként 10—10 hím egeret használtunk. 5 Etanol-narkózis [J. M. Cott etc.: J. Pharmacol. Exp. Ther. 196, 594 (1976.)]. 4,5 g i. p. etilalkohol után 10 perccel kezeltük az állatokat a vizsgálati anyagok 20 mg/kg-os intraperitoneális dózisaival. Anyagonként húsz vegyesivarú 18—22 g-os CFLP (LATI) egeret használtunk. 6. Hormon-aktivitás mérése (TSH-hatás) patkányokon. A TRH-ra és az analógokra adott TSH-választ az anyagok i. v. adása után 15 perccel határoztuk meg plazmából radioimmun vizsgálattal. A relatív hatáserősség?!» 4 pontos módszerrel, TPA 101 számítógéppel számítottuk, a TRH hatását 100%-nak véve. Vizsgálatainkhoz 200 g-os Wistar eredetű (RG) hím patkányokat használtunk (dózisonként 7—8 állatot). Az (I) általános képletű tripeptidek fontosabb képviselőinek biológiai hatására vonatkozó adatait az alábbi táblázatban foglaltuk össze. Haloperidol- L-DOPA lokomotoros X-Y-Z-NHS katalepszla aktivitás pót. %. gátlás X Y Z ED50 Idő 30’ G0’ 90’ (mg/kg) /perc Kezerpip.es hípotermla megfordítása rekt. hőm. °C norm. réz. ke zeíés után lh 2h in c? H c Kpc Leu Pro 23,5 60 319 80 127 Kpc Nva Pro 10,6 30 36 45 65 Glp Leu Tea 31,4 120 171 142 52 Glp Leu Pip 38,5 120 201 89 112 Glp Nva Tea 56 30 195 147 79 Kpc Nva Tea 60,3 30 103 38 70 Kpc Nva HPro 35,3 15 63 30 108 D-Glp Leu Pro 70 15 54 58 115 Kic Leu Pro 80 30 118 70 98 TRH 80 15 100 100 100 (kontroll) 36,3 24,5 32,0 33,9 37 79 2,7 36,3 23,9 33,1 32,5 51 46 0 36,2 24,9 33,1 32,2 39 58 0 36,4 24,6 30,7 31,0 38 60 7,2 36,5 23,8 31,4 30,7 69 51 0 36.4 23,6 30,4 29,0 61 48 — 36,3 20,7 26,5 32,2 76 35 — 36,5 27,4 25,8 25,6 97 54 0 35,5 24,1 27,7 28,8 59 69 0 36,2 25,9 35,5 30,2 56 35 100 Hexobarbital-alvásidő (X±SE) 38,4 + 1,36 perc Etanolos alvásidő (X±SE) 46,9 ±2,17 perc A táblázat adataiból látható, hogy a TRH molekula két, vagy három aminosavának mási aminosavval való helyettesítésével nyert tripeptidszármazékok jelentős központi idegrendszeri hatással bírnak. Ebből a szempontból különösen előnyösek azok a származékok, ahol a 2-es helyzetű His aminosav helyén valamely egyenes, vagy elágazó láncú alifás aminosav áll. Ugyancsak előnyös e hatás szempontjából a Glp helyettesítése 6-keto-pipekolinsavval. Ezeknél a származékoknál a TRH molekula, hormonhatása vagy teljesen megszűnik, vagy minimálisra 60 csökken, ugyanakkor a központi idegrendszeri hatás egyes esetekben nyolcszorosára is megnövekszik. A találmány szerinti eljárással előállítható tripeptideket, valamint ezek komplexeit a szokásos gyógyszerkészítmények alakjában hasz- 50 nálhatjuk fel a gyógyászatban. Az ilyen gyógyszerkészítmények a találmány szerinti vegyületeket enterális, vagy parenterális beadásra alalkalmas szervetlen, vagy szerves vivőanyag kíséretében tartalmazzák. így a gyógyszerké- 55 szítmények lehetnek tabletták, injekciók, szuszpenziók, liofilizátumok stb., ezek elkészítése a gyógyszerészeiben szokásos módszerekkel történhet. A találmány szerinti eljárás foganatosítása módjait közelebbről az alábbi példákkal szemléltetjük. A példában alkalmazott rövidítések a kémiai irodalomban használt rövidítéseknek felelnek meg [J. Biol. Chem. 247, 977 (1972.)]. 65 További rövidítések : 3
