180925. lajstromszámú szabadalom • Eljárás központi idegrendszerre ható TRH-analóg tripeptid-amidok előállítására
15 180 925 16 3. lépés Benziloxikarbonil-L-piroglutamil-L-aminobutiril-L-prolin-amid 2,13 g (9 mmól) H-Abu-Pro-NH2 ■ HCl-ot 30 ml DMFA-ban szuszpendálunk, s a szuszpenzióhoz, jeges hűtés és keverés közben 1,26 ml (9 mmól) trietilamint és 3,95 g (9,2 mmól) Z-Glp-OPFP-t adunk. 5 perc után a reakcióelegyhez újabb 1,26 ml (9 mmól) trietilamint adunk, majd további 20 perc keverés után vákuumban bepároljuk. A kristályos maradékot 20 ml etanollal eldörzsöljük, éjszaka hidegen állni hagyjuk, majd szűrjük. Így 3,30 g (82%) Z-Glp-Abu-Pro-NH2-ot kapunk, olvadáspont: 175—176 °C, Rf = 0,28 [a]= —99,6° (c = 1, ecetsavban). 4. lépés L-Piroglutamil-L-a-amino-butiril-L-prolinamid 2,67 g (6 mmól) Z-Glp-Abu-Pro-NHo-ot (7. példa, 3. lépés) 100 ml ecetsavban feloldunk. Az oldathoz 0,5 g 10%-os csontszenes palládium-katalizátort adunk, és 1 óra hosszat hidrogéngázt buborékoltatunk át rajta. A katalizátor kiszűrése után a szürletet bepároljuk, és a maradékot éterrel eldörzsöljük. Az 1,82 g amorf nyers terméket vízben oldva derítjük, és a víztiszta oldatot liofilizáljuk. Így 1,70 g (91%) Glp-Abu- Pro-NH2-ot kapunk, R* = 0,24, [a] p = —102,5° (c = 1, ecetsavban). 8. példa L-Piroglutamil-L-a-amino-dekanoil-L-prolinamid 1. lépés L-a-Amino-dekanoil-L-proIin-amid-hidroklorid 1,37 g (12 mmól) H-Pro-NH2-ot és 2,72 g (6 mmól) BOC-Ada-OPFP-t feloldunk 20 ml DMFA-ban, és az oldatot 5 perc állás után vákuumban bepároljuk. A maradék olajat 50 ml kloroformban feloldjuk, és az oldatot kirázzuk háromszor 10 ml n sósav-oldattal, háromszor 20 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és kétszer 10 ml vízzel, majd vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk. A kloroformos oldatot bepároljuk, a maradék olajat 3 ml etilacetátban feloldjuk, és 5 ml 6 n sósavas etilacetátot öntünk hozzá. 1 órai állás után a reakcióelegyet éterrel hígítjuk, a csapadékot kiszűrjük, és vákuumban, vízmentes nátrium-hidroxid felett szárítjuk. így 1,75 g (BOC-Ada-OPFP-re számítva 91%) H-Ada-Pro-NH2. HCL-ot kapunk, R3 = 0,11. 2. lépés Benziloxikarbonil-L-pirogIutamil-L-2-aminodekanoil-L-prolin-amid 1,75 g (5,5 mmól) H-Ada-Pro-NH2 • HCl-ot és 2,58 g (6 mmól) Z-Glp-OPFP-t 30 ml DMFA- ban feloldunk, és az oldathoz 0,77 ml (5,5 mmól) trietilamint adunk. 5 perc múlva a reakcióelegyhez újabb 0,77 ml (5,5 mmól) trietilamint adunk, majd további 20 perc keverés után vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot feloldjuk 50 ml kloroformban, és az oldatot háromszor 20 ml n sósav-oldattal, háromszor 20 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és kétszer 20 ml vízzel kirázzuk, majd vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. A kloroformos oldatot bepároljuk és a maradék felhabzó olajat éterrel eldörzsöljük. A géles szuszpenziót 1—2 óra hosszat hűtőszekrényben állni hagyjuk, majd a csapadékot kiszűrjük. A 2,61 g nyers terméket 20 ml etilacetátból átkristályosítjuk. így 2,45 g (84%) Z-Glp- Ada-Pro-NH2-ot kapunk, olvadáspont: 103— 105 °C, Rj = 0,19, [a]ü = —63,7° (c = 1, ecetsavban). Elemzési eredmények a C2sH/,oOf,N/, összegképlet (molekulasúly: 528,65) alapján: számított: C 63,62%, H 7,63%, N 10,60%; talált: C 63,24%, H 7,81%, N 10,57%. 3. lépés L-Piroglutamil-L-a-amino-dekanoil-L-prolinamid 1,9 g (3,6 mmól) Z-Glp-Ada-Pro-NH2-ot feloldunk 40 ml ecetsavban és az oldaton, 0,2 g 10%-os csontszenes palládium-katalizátor hozzáadásával másfél órán keresztül hidrogéngázt buborékoltatunk át. A katalizátor kiszűrése után a szürletet bepároljuk, a bepárlási maradékot vízben feloldva derítjük, majd a vizes oldatot bepároljuk. A maradék olajat feloldjuk 30 ml kloroformban, és vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. A kloroformos oldatot bepároljuk, és a felhabzó, amorf, szilárd maradékot éterrel eldörzsöljük. Így 1,20 g (85%) Glp-Ada-Pro-NH2- ot kapunk, Rf = 0,55, [o]d = —66,2° (c = 1, ecetsavban). 9. példa L-Piroglutamil-L-ciklohexilalanil-L-prolinamid 1. lépés terc.-Butiloxikarbonil-L-ciklohexilalaninpentafluorfenilészter 9,04 g (20 mmól) BOC-Cha-OH.DCHA-t 80 ml éterben szuszpendálunk, és a szuszpenziót 20 ml 2 n kénsavval oldódásig rázzuk. Elválasztás után az éteres oldatot 20 ml 2 n kénsavval és 20 ml vízzel mossuk, és szárítás után bepároljuk. A kapott 5,7 g olajat és 3,7 g (20 mmól) PFPOH-t 30 ml etilacetátban feloldjuk, az oldatot 5 °C alá hűtjük, és 4,12 g (20 mM) DCC-t adunk hozzá. A reakcióelegyet 1 óra hosszat hidegen keverjük, majd a DCU-t kiszűrjük, és a szürletet bepároljuk. A maradék olajat feloldjuk 30 ml n-hexánban, 1 óra hosszat hűtőszekrényben állni hagyjuk, majd a kivált DCU-t kiszűrjük, és a szürletet 70 ml n-hexánnal hígítjuk. A hexános oldatot ötször 40 ml N nátriumhidrogén-karbonát-oldattal és kétszer 40 ml vízzel kirázzuk, és vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk. A megszárított oldatot bepároljuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
