180925. lajstromszámú szabadalom • Eljárás központi idegrendszerre ható TRH-analóg tripeptid-amidok előállítására
9 180 925 10 2. példa L-piroglutamil-L-norleucil-L-prolin-amid 1. lépés L-Norleucil-L-prolin-amid-hidroklorid 2,28 g (20 mmól) H-Pro-NHo-ot és 3,97 g (10 mmól) BOC-Nle-OPFP-t [Kisfaludy L. és munkatársai, Hoppe—Sayler’s Z. Physiol- Chemie 359, 887 (1978)] 40 ml DMFA-ban feloldunk, és az oldatot 5 perc állás után vákuumban bepároljuk. A maradék olajat 50 ml kloroformban feloldjuk, és az oldatot háromszor 10 ml n sósav-oldattal, háromszor 10 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és egyszer 10 ml vízzel kirázzuk, majd vízmentes nátrium-hidrogén-karbonáttal szárítjuk. A kloroformos oldatot bepároljuk, a maradékot 5 ml etilacetátban feloldjuk és 10 ml 5 n sósavas etilacetátot öntünk hozzá. 30 perc elteltével a reakcióelegyet éterrel hígítjuk, és a csapadékot kiszűrjük, vákuumban vízmentes nátrium-hidroxid felett szárítjuk. így 2,48 g (BOC-Nle-OPFP-re számítva 94%) H-Nle- Pro-NH2 • HCl-ot kapunk, R« = 0,20. 2. lépés Benziloxikarbonil-L-piroglutamil-L-norleucil-L-prolin-amid lb.5 g (4 mmól) H-Nle-Pro-NHo • HCl-ot 10 ml DTÜFA-ban feloldunk, és az oldathoz, jeges hűtés és keverés közben, 0,56 ml (4 mmól) trietilamint és 1,89 g (4,4 mmól) Z-Glp-OPFP-t adunk. 5 perc keverés után a reakcióelegyhez újabb 0,56 ml (4 mmól) trietilamint adunk, majd további 20 perc keverés után vákuumban szárazra pároljuk. A bepárlási maradékot 40 ml kloroformban feloldjuk, és az oldatot kétszer 10 ml n sósav-oldattal, háromszor 10 ml n nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és egyszer 10 ml vízzel kirázzuk. A kirázott kloroformos oldatot elkülönítjük, vízmentes nátrium-szulfáttal szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradék olajat éter alatt kristályosítva 1,52 g nyers terméket kapunk, amelyet 8 ml etilacetátból átkristályosítunk. Így 1,36 g (72%) Z-Glp-Nle- Pro-NH2-t kapunk, olvadáspont: 146—148 °C, R3 = 0,32, [a]g = —79,8° (c = 1, ecetsavban). Elemzési eredmények a C^H^Oi-N/-, összegképlet (molekulasúly: 472,55) alapján: számított: C 61,00%, H 6,83%, N 11,86%; talált: C 60,90%, H 7,04%, N 11,87%. 3. lépés L-Piroglutamil-L-norleucil-L-prolinamid 1,16 g (2,46 mmól) Z-Glp-Nle-Pro-NH2-ot feloldunk 25 ml metanolban. Az oldathoz 0,2 g 10%-os csontszenes palládium-katalizátort adunk, és 30 percig hidrogéngázt buborékol tatunk át rajta. A katalizátor kiszűrése után a szürletet bepároljuk és a visszamaradó, szilárd, amorf anyagot éterrel eldörzsölve kiszűrjük. A 0,72 g nyersterméket vízben oldva megderítjük, és a víztiszta oldatot liofilizáljuk. Így 0,66 g (79,5%) Glp-Nle-Pro-NH2-ot kapunk, R,4 = 0,43, [a] = •—77,1° (c = 1, ecetsavban), aminosavanalízis: Glu 0,96 (1,0); Nie 1,00 (1,0); Pro 1,00 (1,0)-3. példa L-Piroglutamil-L-norvalil-L-prolin-amid 1. lépés L-Norvalil-L-prolin-amid-hidroklorid 2,28 g (20 mmól) H-Pro-NH2-ot és 3,83 g (10 mmól) BOC-Nva-OPFP-t ([Kisfaludy L. és munkatársai, Hoppe—Seyler’s Z. Physiol. Chemie 359, 887 (1978)] 40 ml DMFA-ban feloldunk és az oldatot 5 perc állás után vákuumban bepároljuk. A maradék olajat 50 ml kloroformban feloldjuk, és az oldatot háromszor 10 ml n sósavoldattal, háromszor 10 ml n NaHCO.s-oldattal és egyszer 10 ml vízzel kirázzuk, majd vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk. A száraz, kloroformos oldatot bepároljuk, a maradékot 5 ml etilacetátban feloldjuk, és 10 ml 5 n sósavas etilacetátot öntünk hozzá. 30 perc elteltével a reakcióelegyet éterrel hígítjuk, a csapadékot kiszűrjük, és vákuumban, vízmentes nátrium-hidroxid felett szárítjuk. Így 1,83 g (BOC-Nva- OPFP-re számítva 73%) H-Nva-Pro-NHi- HCl-ot kapunk, R£ = 0,10. 2. lépés Benziloxikarbonil-L-piroglutamil-L-norvalil-L-prolin-amid 1,25 g (5 mmól) H-Nva-Pro-NH2 • HCl-ot 15 ml DMFA-ban szuszpendálunk, és a szuszpenzióhoz, jeges hűtés és keverés közben, 0,7 ml (5 mmól) trietilamint és 2,15 g (5 mmól) Z-Glp-OPFP-t adunk. 5 perc múlva a reakcióelegyhez újabb 0,7 ml (5 mmól) trietilamint adunk, majd további 20 perc keverés után vákuumban bepároljuk. A bepárlási maradékot 50 ml kloroformban feloldjuk, és az oldatot háromszor 10 ml n sósavoldattal, háromszor 10 ml n nátrium-hidrogénkarbonát-oldattal és egyszer 10 ml vízzel kirázzuk. A kloroformos oldatot vízmentes nátriumszulfáttal szárítjuk és bepároljuk. A maradék olajat éter alatt kristályosítjuk, és az így nyert 1,80 g nyers terméket etanol-éter elegyből átkristályosítjuk, Így 1,66 g (72%) Z-Glp-Nva- Pro-NH2-ot kapunk, olvadáspont: 166—167 °C, RJ = 0,29, [a]g = —87,5° (c = 1, ecetsavban). Elemzési eredmények a C23H30O6N4 összegképlet (molekulasúly: 458,52) alapján: számított: C 60,25%, H 6,59%, N 12,22%; talált: C 60,08%, H 6,70%, N 12,15%. 3. lépés L-Piroglutamil-L-norvalil-L-prolin-amid 1,42 g (3,1 mmól) Z-Glp-Nva-Pro-NH2-ot feloldunk 30 ml metanolban. Az oldathoz 0,2 g 10%-os csontszenes palládium-katalizátort adunk, és 30 percig hidrogéngázt buborékoltatunk át rajta- A katalizátor kiszűrése után a szürletet bepároljuk és az amorf, szilárd maradékot éterrel eldörzsöljük. A nyersterméket vízben feloldva megderítjük és a víztiszta oldatot liofilizáljuk. Így 0,95 g (94%) Glp-Nva-Pro-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
