180723. lajstromszámú szabadalom • Eljárás fáldalomcsillapító hatású pentapeptid-származékok előállítására
19 180723 20 amelynek NMR-spektruma összhangban van a várt szerkezettel. Az NMR-spektrnm jellemző sávjai: 8 = 2,93, N—CH3phe; 8=2,73, N-CH3Met; 8 = 2,10, S—CH3; S--1,37, C(CHj)3. C) N*-Tercíer-butoxi-karboni]-L-tirozil-D-alanil-glicil-N,-metil-U-fenil-alanil-N:‘-meti!-L-metionil-amid 5 ml jégecet, I ml anizol és I ml trietil-szilán elegyéhez hozzáadunk 1,4 g (0,0033 mól), a B) pontban leírt módon nyert terméket. Félórán át egy gázelosztócsövön keresztül vízmentes sósavgázt vezetünk az elegybe, majd dietil-éterrel hígítjuk. Kiszűrjük a kivált csapadékot, majd megszárítjuk (1.1 g). 40 ml dimetil-formamidban feloldjuk a megszárított anyagot, 0 C' hőmérsékletre hütjük az oldatot, hozzáadunk 1,27 g (0,0031 mól), az 1. példa Ei pontjában leírt módon nyert terméket, majd utána 0,420 g (0,0031 mól) 1-hidroxi-benzotriazoit, és végül 0,640 g (0,0031 mól) N,N'-diciklohexil-karbodiimidet. 10 perc múlva az elegyhez hozzáadunk 0,43 ml (0,0031 mól) trietii-amint, majd 2 órán át 0 C hőmérsékleten és utána 48 órán át 4 C hőmérsékleten keverjük az elegyet. Ezután kiszűrjük a kivált csapadékot, és a szűrletröl csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. Etil-acetátban feloldjuk a szirupszerű maradékot, és egymás után kimossuk az oldatot I normál nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, hideg, 0,75 normál citromsav-oldattal, és végül megint vízzel. Vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk az etil-acetátos oldatot, majd csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. Ily módon 2,0 g nyersterméket nyerünk. Kloroformban feloldjuk és felvisszük egy szilikagéllel (60— 200 mesh) töltött, 3 x 50 cm méretű oszlopra, majd először kloroformmal, utána kloroform és metanol 9: I arányú elegyével mossuk az oszlopot. Vékonyrétegkromatográfiával vizsgáljuk az oszlopról lejövő frakciókat, és a megfelelő frakciókról egyesítve, csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószereket. Ily módon 1,1 g (47%) nem kristályos terméket nyerünk. Analízis a C35H30N6O8S képlet alapján (714,88): számított : C 58,80% ; H 7,05% ; Nil ,76%, ; talált: C 59.01%: H 6,78%; N 11,58%. D) L-Tirozil-D-alanil-glicil-N’-metil-L-fenil-alanil-N’-metil-U-metionil-amid-hidroklorid-trihidrát 10 ml jégecet és 0,5 ml anizol elegyéhez hozzáadunk 0,70 g (0,001 mól), a C) pontban leírt módon nyert terméket. 20 percen át egy gázelosztócsövön keresztül vízmentes sósavgázt vezetünk az elegybe. Utána megfagyasztjuk az elegyet, és fagyasztva szárítjuk. Ily módon 0,678 g-nyi mennyiségben nyerjük a nedvszívó terméket. Analízis C30H43N6O5SCI.3H20-ra (705,23): számított: C 51,08° j; H 7,0%; N 11,91%; talált: C 51,13%; H 6,97%; N 11,72%. Az aminosav-analízis talált értékei: tirozin: 1,03: alanin: 1,01 ; glicin: 0,96. L-Tirozil-D-alanil-L-alanil-L-fenil-alanil-N’-metil-L-metionil-amid-l,25-hidroklorid-monoacetát A) N’-Tercier-butoxi-karbonil-O-benzil-L-tirozil-D-alanil-L-alanin-benzil-észter 3,19 g (0,010 mól) alanin-benzil-észter-p-toluol-szulfonát 30 ml vízmentes dimetil-formamiddal készült oldatához hozzáadunk 4,43 g (0,010 mól) az 1. példa B) pontjában leírt módon nyert terméket. 0 C° hőmérsékletre hűtjiik az elegyet, és hozzáadunk !, 12 g (0,010 mól) diaza-biciklo-oktánt, majd 10 perc múlva 1,135 g (0,010 mól) l-hidroxi-benzotriazolt és 2,06 g (0,010 mól) N,N’-diciklohexil-karbodiimidei. 2 órán át 0 C~ hőmérsékleten, majd 48 órán át szobahőmérsékleten keverjük az elegyet. Utána kiszűrjük a kivált csapadékot, és a szűrletröl csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. Etil-acetátban feloldjuk a maradékként nyert szirupszerű anyagot, és egymás után l normál nátrium-hídrogén-karbonát-oldattal, vízzel, hideg, 0,75 normál sósav-oldattal és végül megint vízzel mossuk az etil-acetátos oldatot. Vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, majd csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószert. A maradék dietil-éterből és etanolból nem kristályosítható. A termék dietil-éteres oldatából petroléteres hígítás útján egy gélszerű anyagot nyerünk, amelyet kiszűrünk, és csökkentett nyomáson megszárítunk. Egy szilikagéllel (60—200 mesh) töltött, 3x50 cm méretű oszlopra visszük fel a szennyezett, amorf szilárd anyagot (4.0 g), és először kloroformmal, majd kloroform és metanol 9,75 : 0,25 arányú elegyével mossuk az oszlopot. Vékonyrétegkromatográfiával vizsgáljuk az oszlopról lejövő frakciókat, és a megfelelő frakciókról egyesítve, csökkentett nyomáson ledesztilláljuk az oldószereket. Dietil-éterben feloldjuk az ily módon nyert, szirupszerű anyagot, és petroléterrel kicsapjuk a terméket. Ily módon 3,0 g-nyi (50%) mennyiségben nyerjük a kívánt vegyületet, amorf szilárd anyag formájában, op.: 100—104 C°. Analízis a C34EI4,N307 képlet alapján (603,72): számított : C 67,64% ;' H 6,85% ; N 6,96% ; talált: C 67,56%: H6,60%: N 7,16%. 5. példa BI N'-Tercier-butoxi-karbonii-L-tirozíl-D-alanil-L-alanín 5 ml vízmentes dimetil-formamidhoz hozzáadunk 2,9 g (0,0048 mól), az A) pontban leírt módon nyert terméket. Utána hozzáadunk 1,0 g 5%a-os csontszenes palládiumot, majd 50 ml etanolt. Ezután 6 órán át, atmoszferikus nyomáson és szobahőmérsékleten egy gázelosztó csövön keresztül hidrogéngázt vezetünk az elegybe. Utána hidrogénnel kiöblítjük a reakcióedényt, kiszűrjük a katalizátort, és a szűrletröl csökkentett nyomáson Icdesztilláljuk az oldószert, ily módon 1,5 g-nyi (74° „) mennyiségben nyerjük a kívánt terméket, amorf, szilárd anyag formájában, [y.]p = =25,9 (c=0,5, kloroform). Analízis a C-0H29N3O- képlet alapján (423,47): számított: C 56,73%; H 6.907ó: N 9,92%; talált: C 56,80%; H6,95%; N 9,81%. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
