180668. lajstromszámú szabadalom • Hatóanyagként fenoxi-piridinil (pirimidinil) -alkanol -származékokat tartalmazó fungicid készítmények és eljárás a hatóanyag előállítására
9 180668 10 D) példa Micella növekedési vizsgálat Alkalmazott táptalaj : 20 súlyrész agar-agar 200 súlyrész burgonyafőzet 5 súlyrész maláta 15 súlyrész dextróz 5 súlyrész pepton 2 súlyrész dínátrium-hidrogén-foszfát 0,3 súlyrész kalcium-nitrát Az oldószerelegy táptalajhoz viszonyított aránya: 2 súlyrész oldószerelegy 100 súlyrész agar-táptalaj Az oldószerelegy összetétele: 0,19 súlyrész dimetil-formamid vagy aceton 0,01 súlyrész alkil-aril-poli(glikol-éter) emulgeátor 1,80 súlyrész víz 2,00 súlyrész oldószerelegy A táptalaj kívánt hatóanyag-koncentrációjához szükséges hatóanyag-mennyiséget elkeverjük az adott menynyiségű oldószereleggyel. A koncentrátumot ezután az adott arányban alaposan összekeverjük a folyékony, 5 42 °C-ra lehűtött táptalajjal és a kapott elegyet 9 cm átmérőjű Petri-csészékbe töltjük. Azonos módon, de a preparátum hozzákeverése nélkül további Petri-csészéket töltünk meg összehasonlítás céljából. Amikor a táptalaj lehűlt és megszilárdult, a kapott 10 lapokat beoltjuk a vizsgálni kívánt gombákkal és a tenyészetet 21 °C körüli hőmérsékleten inkubáljuk. A kísérletek kiértékelését a gomba növekedési sebességétől függően 4—6 nappal a beoltás után végeztük. A kiértékelésnél a kezelt táptalajon tapasztalt radiális 15 micéliumnövekedést hasonlítottuk a kontroll táptalajon mért radiális növekedéshez. A kiértékelést a következő táblázat alapján végeztük: 1 nincs növekedés 3-ig a növekedés igen erős gátlása 5-ig közepesen erős növekedésgátlás 7-ig gyenge növekedésgátlás 9 a növekedés a kezeletlen kontroliéval azonos mértékű 20 IV. táblázat Micella növekedési vizsgálat Hatóanyag <5 ‘5 •CS c o Ü c o ÖO :* s 8-O Q, cd û a [ Fusarium eulmorum Sclerotinia sclerotiorum Fusarium nivale : Rhizoctonia solani Pythium ultimum Cocliliobolus 1 miyabeanus Verticil lium alboatrum Phialophora cinerescens Helminthosporium gramineum Mycosphaerella musicola Pellikularia sasakii (A) képletű vegyület (ismert) 10 9 9 9 9 9 9 9 9 5 5 9 a 3. példa szerinti vegyület 5 5 5 5 5 3 5 î 5 1 1 a 4. példa szerinti vegyület 1 1 3 1 1 1 3 î 1 1 1 a 9. példa szerinti vegyület 3 3 3 2 3 1 3 î 2 1 1 a 27. példa szerinti vegyület 3 3 3 1 1 1 3 î 2 1 1 Azt találtuk, hogy különösen a 3., 4., 9. és 27. példák szerint előállított hatóanyagokat tartalmazó készítmények mutatnak jó hatást a technika állása szerint ismert hatóanyagokat tartalmazó készítményekkel összehasonlítva (IV. táblázat). Eí példa Pyricularia- és Pellicularia-próba Oldószer: 11,75 súlyrész aceton. Diszpergálószer: 0,75 súlyrész alkil-aril-poli(glikol-éter). Víz: 987,50 súlyrész. A permedé kívánt hatóanyag-koncentrációjának eléréséhez szükséges hatóanyag-mennyiségeket elkeverjük az adott mennyiségű oldószerrel és diszpergálószerrel és a koncentrátumot az adott mennyiségű vízzel felhígítjuk. A kapott permetlével csuromvizesre permetezünk körülbelül 2—4 hetes rizs növényeket. A növényeket száradásig 22—24 °C hőmérsékletű, körülbelül 70%-os relatív páratartalmú melegházban tartjuk. 50 Ezután a növények egy részét 100 000—200 000 spóra/ml mennyiségben Pyricularia oryzae spóráival inokuláljuk, majd 24—26 °C-on, 100% relatív páratartalmú helyiségben tartjuk. A növények másik csoportját maláta agaron tenyésztett Pellicularia sasakii tenyészet- 55 tel oltjuk be, és 28—30 °C-on, 100% relatív páratartalmú helyiségben tartjuk. 5—8 nappal a beoltás után megvizsgáljuk a Pyricularia oryzae-val végzett beoltás idején már meglevő levelek fertőzöttségét, a fertőzöttség értékét a kezelet- 60 len, de ugyanúgy beoltott kontroll növényeknél kapott érték %-ában adva meg. A Pellicularia sasakii-val fertőzött növényeknél a fertőzöttség mértékét ugyanígy határozzuk meg. A kiértékelést 1-től 9-ig terjedő skálán végeztük, ahol l = 100%-os hatás, 3-ig=jó hatás, 65 5-ig=mérsékelt hatás és 9=nincs hatás. 5