180664. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a spektinomicin új analógjainak előállítására
13 180664 14 roszkópiás (továbbiakban: PMR)elemzésének tanúsága szerint ilyen módon a dimetil-formamid nagy részét sikerült eltávolítani. 1,25 kg szilikagélen végzett kromatográfiás tisztítás (metanol és kloroform kombinációjával gradiens-eluálást végezve) eredményeképpen először egyrészt a cím szerinti vegyület tiszta a-anomerjéből 1,33 g-ot (1,89 millimól, 7,6%), másrészt ezután a cím szerinti vegyület tiszta (3-anomerjéből 2,86 g-ot, illetve további 3,17 g olyan ß-anomert kapunk, amely közel 90%-os tisztaságú. Az a-anomer azonosítási adatai : -IR-spektrum (CHC13): 3550, 3400, 3070, 2980, 1745, 1686, 1675 (váll), 1484, 1449, 1364, 1333, 1235, 1167, 1026és669cm_1. PMR (CDClj): S 7,40 (s, 10, aromás), 6,07 (s, 1, H,), 5,95 (d, J=3 Hz, 1, H3), 5,20 (m, 7), 3,3—4,6 (m, 10), 3,12 és 3,08 (s's, 6, NCH3), 2,12 és 2,03 (s', 6, CH3). Tömegspektrum (tetra-TMS-származékra): 991 (M+), 689 és 673. CMR (D6-aceton): 8 170,1, 169,8, 157,8, 156,5, 150,1, 138,1, 129,1, 128,8, 128,4, 91,7, 86,9, 79,1, 74,4, 69,1, 68,6, 68,3, 67,8, 67,3, 60,3, 57,7, 31,5, 31,4, 20,8 és 20,5. Olvadáspont: 130—140 °C (bomlik). Nagy feloldóképességű tömegspektrográffal a tetra-TMS-származékon mért molekulasúly a C45H „N3014Si4 képletre : számított: 991,4169, talált: 991,4190. A ß-anomer azonosítási adatai: IR-spektrum (CHC13): 3500, 3100, 2970, 1748, 1686, 1672 (váll), 1486, 1449, 1370, 1337, 1235, 1167, 1107, 1024 és 700 cm-1. PMR (CDC13): 8 7,40 (s, 10, aromás), 6,40 (s, 1, H„), 6,05 (d, J=3 Hz, 1, H3,), 5,0—5,5 (m, 6), 3,4—3,8 (m, 11), 3,07 és 3,04 (s's, 6, NCH3), 2,08, 2,05 (s',s 6, CH3). Tömegspektrum (a tetra-TMS-származékra): 991 (M+), 990,976,975,689 és 673. CMR (D6-aceton): 8 170,7, 169,9, 157,7, 157,1, 149,1, 137,9, 129,1, 128,7, 128,3, 92,3, 85,3, 74,7, 70,8, 69,4, 67,3,62,0,60,2,31,4,20,8 és 20,5. Olvadáspont: 140—155 °C (bomlik). Nagy feloldóképességű tömegspektrográffal a tetra-TMS-származékon mért molekulasúly a C45H73N3014Si4 képletre : számított: 991,4169, talált: 991,4229. 3. referenciapélda 5-0-(4',6'-do-0-Acetil-3'-0-metil-2'-dezoxi-2'-oxiimino-ß-D-glükopiranozil)-N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamin előállítása (G reakcióvázlat) 60,8 g (196 millimól) 4,6-di-0-acetil-3-0-metil-2- -nitrozó-a-D-glükopiranozil-klorid 1,1 liter dimetil-formamiddal készült oldatához 97,7 g (201 millimól) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamint adunk, majd az így kapott reakcióelegyet nitrogénatmoszférában szobahőmérsékleten 45 órán át keverjük és ezután 30 °C-on nagyvákuumban sűrű sziruppá betöményítjük. Ezt azután kis adagokban intenzív keverés közben 3 liter, jéggel hűtött vízhez adjuk. A kivált fehér csapadékot kiszűrjük, 2 liter kloroformban újraoldjuk, a kloroformos fázist a visszamaradt víztől elválasztjuk és vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, végül pedig bepároljuk. így 143 g mennyiségben nyúlós fehér habot kapunk, amely magmágneses rezonanciaspektroszkópiai vizsgálatának (továbbiakban: NMR) tanúsága szerint közel 7% dimetil-formamidot tartalmaz. 3,5 kg szilikagélen metanollal és kloroformmalvégzett gradiens-eluálással a termékek durván elválaszthatók egymástól. A ß-anomert tartalmazó frakciót acetonból kristályosítva 4,4 g mennyiségben a tiszta ß-anomert kapjuk. Az anyalúg kromatografálásával további 1,5 g ß-anomer különíthető el. IR-spektrum: 3500, 3310, 2920, 1750, 1690, 1459, 1240,1175,1105,1403,735 és 711 cm" '. PMR (CDC13): 8 7,32 (s), 5,41 (s), 5,11 (s), 3,5—4,5 (m), 3,33 (s), 3,04 (s) és 2,02 (s). CMR (CDC13): 8 170,6, 169,6, 157,7, 156,5, 150,1, 136,5, 128,5, 127,8, 95,7, 92,7, 77,1, 73,2, 70,1, 67,54, 64,0.56,8, 29,7, 20,8 és 20,5 ppm. Tömegspektrum a tetra-TMS-származékra: 1035 (M+). Olvadáspont: 214—216 °C. 3a referenciapélda 5-0-(3',4',6'-tri-0-acetil-2'-oxiimino-2'-dezoxi-a-L-glükopiranozil)-N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-akti-namin előállítása (H reakcióvázlat) 7,09 g (21 millimól) 3,4,6-tri-0-acetiI-2-nitrozó-2- -dezoxi-a-L-glükopiranozil-klorid (2) 150 ml dimetil-formamiddal készült oldatához 14,22 g (30 millimól) N,N'-bisz-(benziloxi-karbonil)-aktinamint (1) adunk, majd az így kapott reakcióelegyet 19 órán át keverjük. Ekkor a 2 piranozil-klorid már nem mutatható ki a reakcióelegyben. Az így kapott oldatot ezután 45 °C-on bepároljuk, majd a maradékot 1,5% metanolt tartalmazó kloroformban oldjuk. Az oldatot ezután felvisszük 3 kg nedves szilikagéllel töltött oszlopra, majd az említett oldószerrel eluálást végzünk. Miután mintegy 10 liter eluálószert használtunk, a folyamatosan végzett vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat (amelyhez futtatószerként 5% metanolt tartalmazó kloroformot használunk) szerint megkezdődik a 3 fő termék eluálódása. A tiszta 3 terméket tartalmazó frakciókat összeöntjük, majd bepároljuk, 7,86 g (48%) mennyiségben a cím szerinti vegyületet kapva. CD (CH3OH) ((-))9T6xm[x= + 18 900 ± 1300. Fajlagos forgatóképesség (a)|5= — 53° (C=0,9%, aceton). PMR (CDCI3): 8 2,02 (s, 9H), 3,03 (s, 6H), 5,04 (s, 4H), 6,20 (s, 1H) és 7,32 (s, 10H). CMR (D0-aceton): 8 170,8, 170,0, 169,8, 157,7, 157,0, 149,5, 137,9, 129,1, 128,7, 128,3, 92,0, 85,8, 74,4, 70,4, 69,8, 69,4, 68,6, 67,3, 62,5, 60,6, 60,2, 31,4, 31,1 és 20,6 ppm. ; Tömegspektrum (tetra-TMS-származék, [m/ej: 1063 (M+), 1048,793,792,689,674 és 645. Bár az ezután ismertetésre kerülő dezoximálási és védőcsoport-lehasítási műveletek végrehajthatók a-anomereken vagy anomerelegyeken is, a fentiekben ismertetett kapcsolási reakciók mindegyikének eredményeképpen képződő termékkeverékből a ß-anomert elkülönítjük és a következőkben ezeket használjuk fel. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
