180431. lajstromszámú szabadalom • Diagnosztikum proteolitikus enzimek kimutatására

13

180431

14

Reakció

Az 1. oldatot a 2. oldathoz öntjük, majd oxigén és víz kizárásával körülbelül 5 órán át —15°C-on keverjük, amíg vékonyréteg-kromatográfiásan indoxil már nem mutatható ki.

A reakcióelegyet vákuumban maximálisan 40— 50’C-os hőmérsékleten bepároljuk. A maradékot 100 ml etil-acetátban felvesszük, és kétszer 30—30 ml 1 n citromsavval, 20 ml vízzel, 50 ml 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és 25 ml vízzel mossuk. Az etil-aeetátos fázist nátrium-szulfátfölött szárítjuk, majd vákuumban bepároljuk. Az így kapott nyers terméket oszlop-kromatográiiásan kovasav-gélen toluol-dioxán (9:1) arányú elegyével tisztítjuk. Az oldószert az összegyűjtött frakciókból vákuumban ledesztillálva, majd a maradékot éterrel összekeverve 1,45 g (18,4%) 3-[X(toluol-4'-szulfonil)-L-alaniloxi]-indolt kapunk, színtelen kristályok alakjában; op.-ja 103°C;

[<x]d : —56,6° (c=l%, metanolban).

A fent említett oszlop-kromatográfiás elválasztás egyéb frakcióiból melléktermékként 0,89 g (11,3%) 1 - [N-( toluol-4'-szulf onil ) -L-alaniloxi ]-3-hidroxi-indolt = l-[X-(toluol-4'-szulfonil)-L-alaniloxi]-3-oxo-indolint kapunk etil-acetátból átkristályosítva színtelen kristályok alakjában, op. 187—188 °C, [a]" :—41,7° (c = l%, dimetil-formamidban).

Ennek analógiájára állíthatjuk elő a megfelelően szubsztituált indoxil-származékóknak a megfelelő aminosavakkal való reagáltatásával a következő szubsztrátumokat, minden esetben (a 7.23.-7.27. kivételével) melléktermékként a fent megadott 1-szubsztituált 3-hidroxi-indolok keletkeznek :

7.1. 3- [N-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-oxi]-indol, színtelen kristályok, op. : 123 °C.

[ajn°: —49,0°, c =1% (metanolban);

7.2. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-oxi]-4- -metil-indol, színtelen kristályok, op. : 113

°C,

[a]“; —-44,6°, c = 1% (metanolban);

7.3. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-oxi]-5- -metil-indol, színtelen kristályok, op. : 143— 144°C,

[a]i° : —48,2°, c = 1% (metanolban) ;

7.4. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-oxi]-6- -metil-indol, színtelen kristályok, op. : 148°C, [a]‘° : —49,0°, c= 1% (metanolban).

7.5. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-oxi]-7- -metil-indol,

színtelen kristályok, op, : 146°C,

[a]j,° : —51,2°, c = 1% (metanolban) ;

7.6. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-oxi]-4,7- -dimetil-indol,

színtelen kristályok, op. : 212 °C,

[a]),0: —46,3°, c = 1% (metanolban);

7.7. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-oxi]-4- -klór-indol, színtelen kristályok op. : 142— 143 °C,

[a]n : —61,4°, c =1% (metanolban);

7.8. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-oxi]-5- -bróm-indol, színtelen kristályok, op. : 138°C, [«£•: —28,0°, e= 1% (metonalban) ;

7.9. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-alanil-oxi]-6- -klór-indol,

színtelen kristályok, op. : 170°C,

[a]),0: —41,3°, c = 1% (metanolban);

7.10. [N-(toluol-4'-szulfonií)-L-alanil-oxi]-4-klór-5-bróm-indol,

színtelen kristályok, op. : 150—152 °C,

[a]n : —31,0°, c = 1% (metanolban) ;

7.11. 3-[N-(toIuol-4'-szulfonil)-L-alanil-oxi]-4- -klór-5-bróm-7-metil-indol,

halvány homokszínű kristályok, op. : 143—- 145 °C, vékonyréteg-kromatográfia: kovasavgél lemezen (futtatószer; toluol-dioxán 2:1 arányú elegye; értékelés: ultraibolya, HN3 (gáz) R,-értéke : 0,56) ;

7.12. l-metil-3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-aIanil-oxi]-indol, színtelen kristályok, op. : 92 °C, [a]“: —49,5 °C, c = 1% (metanolban);

7.13. l-benzil-3-[N-(toluol-4'-szulfonil)-L-alanil-oxij-indol,

színtelen kristályok, op. : 149—152 °C,

[a]” : —54,9 °C, c = 1% (dimetil-formamidban) ;

7.14. l-benzoil-3-[N-(toluol-4]-szulfonil)-L-alanil-oxi]-indol,

színtelen kristályok op. : 155—156 °C,

[a]“ : —54,7° c = 1% (dimetil-formamidban) ;

7.15. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-gliciloxi]-indol, színtelen kristályok, op. : 122—124 °C;

7.16. 3-[N-(toluol-4'-szulfonil)-gliciloxi]-indoI, színtelen kristályok, op.: 103—105 °C;

7.17. 3-[N-(toluol-2'-szulfonil)-L-alanil-oxi]-indol, színtelen amorf por, [a];,° : —62,5°, e =

= 1% (metanolban), vékonyréteg-kromatográfia : kovasavgél lemezen (futtatószer: toluol-dioxán 9:1 arányú elegye ;

értékelés: UV, NH3 (gáz), R,-értéke: 0,20);

7.18. 3-[N-(toluol-3'-szulfonil)-L-alanil-oxi]-indol, színtelen kristályok, op. : 94°C, fa]“ : —

—54,9°, c= 1% (metanolban);

7.19. 3-[X-(toluol-4'-szulfonil)-D-alanil-oxi]-indol, színtelen kristályok, op. : 98 °C,

[a]^: +53,1°, c= 1% (metanolban);

7.20. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-D,L-aIanil-oxi]-indol,

színtelen kristályok op. : 110—111 °C;

7.21. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-valil-oxi]-indol, színtelen kristályok, op. : 64—65 °C,

[a]Ő°: = —41,1°, c = 1% (metanolban);

7.22. 3[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-leucil-oxi]-indol, színtelen kristályok, op. : 73—75 °C,

[«]?: —42,4°, c = 1% (metanolban);

7.23. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-izoleucil-oxi]-indol, színtelen, amorf por,

fa]" : —30,6°, c = 1% (metanolban), vékonyréteg-kromatográfia : kovasavgél-lemezen (futtatószer: toluol-dioxán 2:1 arányú elegye, értékelés: UV, NH3 (gáz), R,-értéke : 0,57) ;

7.24. 3-[N-(benzil-oxi-karbonil)-L-fenil-alanil-oxij-indol, sárgás kristályok, op.: 125 °C, vékonyréteg-kromatográfia : kovasavgél lemezen (futtatószer: toluol-dioxán 9:1

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65