180376. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (209)-3a-[(amino-acetil)-amino[-5a.pregnán-20-ol és e vegyület sóinak előállítására
180.376 állni hagyjuk. A kelői kéző szilárd anyagot elkülönítjük, etanollal mossuk, szárítjuk. Ily módon 4,43 g terméket knpunk. A ssürletet 0,5 ml 5j5 n etanoloa sósav-oldattal keverjük össze, majd az oldatot betöményttjük. Ily módon további 0,35 g termékhez jutunk. 80 /5-os etanolból végzett át kristály dsitás után olvadáspont: 271 °C. /'V20 _ +1cjO,- + 1° /i;i, 10 % vizet tartalmazó piridin/. L G lépés Bázis előállítása A B lépésben kapott nyers sósavas sót forró vízben feloldjuk. Felesleges mennyiségű 2 r. nátrium-hldzoxid-oldat hozzáadása után csapadék válik le. A levált anyagot elkülönítjük, vízzel mossuk, szárítjuk, majd metanolból átkristályositjuk. Az ily módon kapott tiszta termék olvadáspontja 269°C. /Vp^ = +25° ± ^ /lm, 10 Vá vizet tartalmazó piridin/. 2. példa ^Az 1. példa szerint előállított termék farmakológiai vizsgálata /A felhasznált sósavas sót A-val jelöljük, az összehasonlításhoz LEVAI.ÍIGOLE-t alkalmazunk/. A LLVAUI.G OLE jól ismert termék /lásd: Merck Index 9* kiadás , 8949./ A vegyúlet immunológiai szabályozóként ismeretes /lásd Cancer Research 35 927 /1975/ vagy Lew England Journal of Medicine 28^ /21/ 1148 /1973//. A. Az IgS termelés fokozása 28-30 g-os nőstény egereket szubkután immunizálunk; a művelethez ovalbumin és aluminiuraoxid elegyét alkalmazzuk. Az immunizációt az első és a 14. napon végezzük. Az állatok szérumát a 21. napon vesszük le. Vizsgáljuk a képződött antitesteket; Az antigént /ovalbuain/ és az adjuváns /aluminium-oxid/ mennyiségét oly módon választjuk meg, hogy az antitestek képződése minimális legyen. A vizsgált vegyiileteket 3 órával az első immunizáció előtt, szubkután adjuk be. Az"MEglTmeghatározástrpasszív bőr anafilaxiás vizsgálat^ tál végezzük. A vizsgálat során az antigén intravénás beadása után a bőrfelületen antigén-antitest reakció lép fel, abban a* esetben, ha előzőleg azonos antigénnel egy másik állatban előállított antitestet adunk az állatnak. A reakció láthatóvá tehető, ha az antigénnel együtt egy festéket fecskendezünk be; az antitest beadásának helyén egy szines folt jelenik meg annak bizonyságául, hogy az érzékennyé tett sejtek felszakadnak, és a kapilláris perme-abilitása megnövekszik. JL a z érum le gn agy óbb hígításával JL1-I3_mm átmérőjű foltot kapunk a vizsgálati állatoknál. Ä szérumot egyenlő módon hígítva intrakután 0,1 ml mennyiséget adunk be 250 g átlagsulyu him patkányoknak, az állatok hátsó felébe. 48 óra eltelte után az állatok vénájába 0,5 ml oldatot adunk; az oldat 0,5 % ovalbumint és 1 %-os Evans-kéket tartalmaz; nátrium-klóriddal az oldatot izotoniássá tesszük. 30 perccel a beadást követően az állatokat elpusztítjuk, a vért ' levesszük, a kék folt átmérőjét a visszafordított bőrön mérjük. 4
