180215. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikroorganizmus eredetű inszekticid hatóanyag előállítására
180215 A Bacillus thuringiensis baktériumok spóráit és kristályos endotoxinjáb tartalmazó hatóanyag rovarölő hatásosságát két utón adhatjuk meg: a/ a hatóanyag 1 grammjában lévő Bacillus thuringiensis baktérium-spórák száma alapján b/ nemzetközi egységekben /NE/. A találmány szerinti készítmények részét képező hatóanyagé a következő aktivitást mutatja: 1010 spóra/gramm hatóanyag 6000 és 15000 NE/mg hatóanyag. Az 1000 NE/mg érték inszekticid aktivitása azonos az E-6I standard mintáéval /Ephestia Kühniella rovaron tesztelt Bacillus thuringiensis baktériumok spóráinak és endoboxin-krist ályainak keveréke/. A találmány jobb megértése céljából közöljük a következő ismertető példákat. 1. példa Bacillus thuringiensis var. Berliner kultúrából kiindulva a tenyésztést folyékony” levegőztetett I, táptalajon /lásd fent/ végezzük, a fent leirt módszer.szerint. A tenyésztés folyamán az inkubációs hőmérséklet körülbelül 28°0. A kultúrát percenkénti 150 fordulattal keverjük és a tenyésztés 12-14. órájában a levegőztetést 3-6 órára abbahagyjuk. A levegőztetés megszakításának idejét oxigén-analizátorral határozzuk meg| a levegőztetést akkor szakítjuk meg, amikor az oxigén oldódási százaléka és fogyasztása kevesebb lesz és a pH körülbelül 5,8- ig csökken. 3-6 óra múlva a levegőztetést ismét folytatjuk a korábbi 0,5 liter per liter per perc ütemben. A korai sejtszét>esés nélküli tenyésztés anaerob bioszíntézisen kívül úgy is megvalósítható, hogy a táptalaj pH-ját 6,3-6,5 között tartjuk'.' A tenyésztést addig folytatjuk, amig a spórák és a kristályos endotoxin kiszabadul a tápközegbe /átlagosan 35-40 óra/. Ezután a táptalajt tartályokba visszük át, ahol megtisztítjuk a vizoldható exotoxintól. A tisztítást dializis utján hajtjuk végre. Ehhez a mellékelt rajzen látható berendezést használhatjuk. A dializálandó folyadékot a készülék e keverővei ellátott A tartályába töltjük, amelynek a alsó részét féligáteresztő hártya alkotja. Az A tartály részlegesen belemerül a B fürdőbe, amelyen b dializáló vizet vezetünk át. Az A tartály a dializáló hártyája kolloid-tipusu vagy bármilyen más szokásosan használt hártyaféleség. A dializis gyorsabban megy végbe, ha a B tartályba ionmentes b vizet vezetünk -be. A vizoldható exotoxin jelenlétét vagy hTányát a fentebb leirt biológiai próbával határozzuk meg. Elporitott töltőanyagot adunk a spórák és a kristályos endotoxin keverékéhez, a keveréket száritó kályhában lemezeken megszáritjuk. A kapott terméket Alpina-tipusu aprítóberendezésben megőröljük és átszitáljuk. 2. példa Az 1. példában leirt eljárást követjük, de a fermentorbaú 1 fentebb leirt II. táptalajon végezzük a tenyésztést. 3. példa Az 1. példában leirt eljárást hajtjuk végre, de a baktériumok tenyésztése és a dialízis után kapott exotoxintól meg<* 6
