180053. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biológiai minták tejsav-tartalmának meghatározására fotometriás úton

.............. •< ií> ■ .

MAGYAR

ííépköztarsasag

.J' • -SZABADAD

LEÍRÁS

SZOLGALATI TALÄLMÄNY

;A

A bejelentés napja: 1979. XII. 17. (

országos

találmányi

HIVATAL

A közzététel napja: 1982. V. 28. Megjelent: 1983. VII. 31.

Feltaláló:

Dr. VELÖSY György

orvos, Vécsés

(RE—664)

180053

Nemzetközi . _ osztályjelzet:

(Jói N 33/50

Szabadalmas:

REANAL Finomvegyszergyár, Budapest

Eljárás biológiai minták tejsav-tartalmának meghatározására

fotometriás úton

A találmány tárgya új eljárás biológiai minták, például vér, liquor, nyiroknedv, sejt- és szövetpreparátumok stb. tejsav-tartalmának méghatározására fotometriás úton.

A tejsav a testnedvek állandó, normális öszszetevői közé tartozik. Számos kóros állapot kísérő jelensége a testnedvek tej sav-szintjének emelkedése, ezért a testnedvek tejsav-tartalmának meghatározása diagnosztikai és/vagy prognosztikai jelentőségű lehet. Ismert az is, hogy a tejsav a munkát végző harántcsíkolt (és szív-) izomzat egyik legklasszikusabb metabolitja, ezért a tejsav-szint vizsgálata a sport- és munkaegészségügyi vizsgálatokban sem nélkülözhető.

Eddig már igen sokféle módszert dolgoztak ki biológiai minták tejsav-tartalmának meghatározására. Az ismert eljárások közé tartoznak a jodometriás módszerek (Fuchs, H. J.: Heppe- Seiler’s Ztschr. physiol. Chem. 1933 (cit. Brugsch J-: Lehrbuch der kiin. Chemie, G. Thieme Verlag, Leipzig, 1970, II. kötet); Kubewitz, F.: Ztschr. inn. Med. 7, 865 (1952) és a gazometriás vizsgálat (Engel, W., Goldscheider, J.: Biochem. Ztschr. 164, 163 (1925), amelyek körülményességük és nem kielégítő pontosságuk miatt ma már alig használatosak. Az újabban kidolgozott enzimes eljárás (Bergmeyer, H. U.: Methoden der enzymat. Analyse, Akad. Verlag Berlin, 1970, 1425. oldal) ugyan rendkívül pontos és specifikus meghatározást tesz lehetővé, költsé-180053

gessége és munkaigényessége miatt azonban rutin-sorozatvizsgálatok elvégzésére kevéssé alkalmas.

A tejsav meghatározására alkalmas módsze- 5 rek speciális csoportját képezik a fotometriás eljárások. A fotometriás eljárások alapja az, hogy a tejsavat acetaldehiddé oxidálják, majd az acetaldehidet élénk színű terméket szolgáltató, specifikus reagenssel reagáltatják, a kapott 10 minta extinkcióját meghatározzák, és a mért értékből standard érték vagy kalibrációs görbe segítségével kiszámítják a vizsgált minta tejsavkoncentrációját. Specifikus reagensként többek között 1,2-dimetoxi-benzolt (Avery, B. F., Has- 15 tings, A. B.: J. Biol. Chem. 94, 273 (1931), hidrokinont (Dische, Z., László, D.: Biochem. Ztschr. 100, 485 (1933), p-oxi-fenolt (Barker, S. B., Summerson, W. H. : J. Bioi. Chem. 138, 535 (1941), acetil-acetont (Kageyama, N. : Clin. Chim. Acta 20 31, 421 (1971), 3-metil-2-benzotiazolinon-hidrazon-hidroHnont (Hauser, T. H., Bradley, D. W. : Anal. Chem. 39, 1184 (1967), illetve 4-amino-3- hidrazino-1, 2, 4,-triazol-5-tiolt (Dickinson, R. G., Jacobson, W. W.: Chem Commun. 1970, 1717) 25 használtak fel. A fotometriás eljárások előnye, hogy viszonylag gyors és pontos módszert szolgáltatnak tejsav meghatározására, így jól alkalmazhatók rutin sorozatvizsgálatokban.

Az ismert fotometriás eljárások azonban bio- 30 lógiai mirták tejsav-tartalmának meghatározá-