179970. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 6-n-propil-8-metoxi-metil vagy -metil-merkapto-metil-ergolin származékok és rokonszerkezetű vegyületek előállítására
27 179970 28 A II általános képletű vegyületeknek ezenkívül prolaktin-gátló hatása is van, és így használhatjuk őket nem megfelelő tejelválasztás esetében, például a szülés után vagy tejcsurgás esetében. Fentieken kívül e vegyületeket a Parkinson-szindróma 5 kezelésére is használhatjuk. E vegyületeket tehát használhatjuk olyan betegségek kezelésére, amelyekben kívánatos, hogy csökkentsük a prolaktin-szintet. Ennek bizonyítására a következőképpen mutattuk ki, hogy a találmány szerinti vegyüle- 10 tek gátolják a prolaktint. Körülbelül 200 g testsülyú felnőtt hím, Sprague- Dawley törzsbeli patkányokat légkondicionált helyiségben tartottunk, amelyben a megvilágítást szabályoztuk (a lámpák reggel 8 órától este 8 óráig égtek). Az állatok 15 laboratóriumi tápot és vizet ad libitum (tetszés szerinti ■ mennyiségben) kaptak. Az ergolin-származék beadása előtt 18 órával 2,0 mg reszerpin vizes szuszpenzióját adtuk az állatoknak intraperitoneális injekció formájában. Ennek az volt a célja, hogy a prolaktin-szintet 20 ugyanolyan mértékben magasan tartsuk minden állatban. A vizsgált vegyületeket 10 mikrogramm/ml töménységben 10%-os etanolban oldottuk, és 50 mikrogramm/kg-os dózisban intraperitoneálisan injektáltuk. Minden vegyületet 10—10 állatnak adtunk be, és kontrollként 10 intakt (nem előkezelt) patkányt a megfelelő mennyiségű 10%-os etanollal kezeltünk. A kezelés után 1 órával a patkányokat lenyakaztuk, és szérumjuk 150 ul-nyi részleteiben meghatároztuk a prolaktin mennyiségét. Az eredmények statisztikai kiértékelésére Siud.’nt „t-tesztjét” használtuk, így határoztuk meg a prolaktin szint változásainak „p” szignifikancióját. A prolaktin kiválasztásnak a II általános képletű vegyületek hatásának tulajdonítható százalékos gátlását úgy kapjuk meg, hogy a kezelt és a kontroll állatok prolaktin-szintjének különbségét elosztjuk a kontroll patkányok prolaktin szintjével. Ezeket a százalékos gátlásértékeket az alábbi 2. táblázatban adjuk meg. A táblázatba n az első oszlopban a vizsgált vegyületek neve szerepel, a másodikban az egyes állatcsoportok prolaktinszintje, a harmadikban a százalékos prolaktin gátlás, és a negyedikben a változás szignifikanciaszintje. A közölt adatokat három párhuzamos kísérletben nyertük, mindegyikhez külön kontrollcsoportot használtunk. 2. táblázat Vegyület neve Szérum prolaktinszint Szérum prolaktin százalékos gátlása Szignifikanciaszint, „p” 1. Kísérlet Kontroll 30,4+3,4 — — D-6-n-propil-8 ß-metilmerkapto-metil-ergolin-mezilät 1,6 ±0,4 95% <0,001 D-6-metiI-8ß-metiImerkapto-metil-ergoIin-mezilät* 12,8 ± 58% <0,01 2. Kísérlet Kontroll 55,2+4,1 — — D-6-n-propil-8ß-metilmerkapto-metiI-ergolin-mezilät 2,4 ±0,2 96% <0,001 3. Kísérlet Kontroll 42,3 ±7,3 — — D-6-etil-8 ß-metilmerkapto-metil-ergolin-mezilat 3,9 ±0,4 91% <0,001 D-6-n-propil-8ß-metilmerkapto-metil-9-ergol0n 8,1 ±1,2 81% <0,001 D-6-n-propil-8-metiImerkapto-metil-8-ergolén-maleát 3,9 ±0,2 91% <0,001 D-6-etil-8ß-metilmerkapto-metiI-ergolin-mezilät 3,9 ±0,4 91% <0,001 D-6-n-propil-8ß-metiImerkapto-metil-9-ergol6n 8,1 ±1,2 81% <0,001 D-6-n-propil-8-metilmerkapto-metíl-8-ergolén-maleát 3,9 ±0,2 91% <0,001 4. Kísérlet Kontroll 42,3 ±7,3 — — D-2-br0m-6-n-propil-8ß-metilmerkapto-metiI-ergoIin-mezilát 4,6 ±0,4 89% <0,001 D-6-n-propil-8 ß-metilszulfinil-metil-ergolin-mezilät 3,3 ±0,1 92% <0,001 * lásd a 3 901 894 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírást. A dózis-hatás görbékből kiderül, hogy a D-6-n-propil-8 ß-metilmerkapto-metil-ergolin-mezilät körülbelül 100-szor hatékonyabban gátolja a prolaktint, mint a megfelelő D-6-metil-származék, és a 6-hidroxi-dopaminnal károsított patkányokon, a forgási tesztben körülbelül 30-szor hatásosabb, mint a megfelelő D-6-metil-származék. Ezenkívül a II általános képletű vegyületek és különösen a D-6-n-propiI-8ß-metilmerkapto-metil-ergolin, valamint ennek A8- és A9-analógjai rendkívül erősen gátolják a triciált dopaminnak a szarvasmarha agyvelő atrialális szinaptoszómáinak (a corpus atriatumban levő idegsejt-kapcsolódásoknak) a membránjában jelenlevő dopamin receptorhoz való kötődését [lásd Bymaster és Wong, Fed. Proc., 36, 1006 (1977)], és ezért valószínűleg a Parkin onizmus kezelésére használhatjuk őket. Az alábbi 3. táblázatban néhány, a jelen találmány szerinti, továbbá korábban leírt ergolin-, 8-ergolén- és 9-ergólén-származék ilyen gátló hatását mutatjuk be. A tábláz at első oszlopában a vizsgált vegyületek neve szerepel, a másodikban pedig az az inhibitor (gátló) koncentráció (K; nanomól egységekben), amely az eredeti reakciósebességet a felére képes csökkenteni. 55 60 65 14
