179778. lajstromszámú szabadalom • Reagens készítmények, eszköz és eljárás ketontestek kimutatására
11 179778 12 Az ily módon előállított eszközöket úgy vizsgáljuk, hogy egy pillanatig ismert ketontest-koncentrációjú vizelet-oldatokba merítjük. A szín alakulása, amely a várt barnássárga színárnyalattól (negatív) a vörös színárnyalatokig terjed, alapján olyan gyorsan megkülönböztethető 0, 1, 10, 20, 40 és 80 mg/dl acetecetsav jelenléte, mint az analitikai tisztaságú reagens esetén (például 5—10 másodperc). Az eredmények olyan nitroprusszid-stabilizációt és reakciókatalízist mutatnak, mint amilyeneket az analitikai tisztaságú MgS04-el kapunk. 3. példa Összehasonlításként, eszköz formában, kísérleteket végzünk, amelynek során a periódusos rendszer lia és a Illa csoportjába tartozó fémekkel katalizáljuk az Na2[(NO)Fe(CN)5] acetecetsavval való reakcióját 7,6-os pH-n. Az eszköz impregnálására használt oldatokat úgy készítjük, hogy olyan találmány szerinti készítményeket, amelyek 2,5 g Na2[(NO)Fe(CN)5]-ot tartalmaznak, a 3. táblázatban megadott vegyületekkel kombináljuk 50-50 ml vizes TRIS puffer-oldatban. 3. táblázat Vegyületek I, n. in. IV. V. MgS04.7H20 24,3 g _ _ _ _ CaCl2 — 11,1 g — — — AlClj — — 13,4 g — — BaS04 — — — 23,0 g — NaBF4 — — — — 11,0 g A III vegyület pH-ját nem állítjuk 7,6-ra az alumínium kicsapódása miatt és a IV vegyület oldhatatlan emulziót alkot. 2,5 cm x 10 cm méretű Whatman—3MM szűrőpapírcsíkokat a fenti oldatokkal impregnálunk telítődésig. A csíkokat 52 C°-on szárítjuk, 0,5 x 0,5 cm nagyságú darabokra vágjuk és így kialakítjuk a találmány szerinti eszközöket. Az ily módon készített eszközöket 0,5 cm x 8 cm méretű műanyag-hordozókra ragasztjuk kétoldalon ragadó szalag segítségével. Az eszközöket úgy vizsgáljuk, hogy keton-törzsoldatba, valamint 0, 20, 40 és 80 mg/dl acetecetsavkoncentrációjú vizeletbe mártjuk egy pillanatra. A kapott eredményeket a 4. és 5. táblázatokban adjuk meg. 4. táblázat Keton-törzsoldat Kontroll fém nélkül I. ii. in. IV. V. gyenge rózsaszín (5 perc) pillanat pillanat pH-beállítás nem lehetséges nincs (emulzió) gyenge rózsaszín (lassú) 5. táblázat Vegyület 0—80 mg/dl megkülönböztetés i nagyon jó (10—15 másodperc) ibolyaszín n nagyon jó (30 másodperc) téglavörös szín A 4. táblázatból látható, hogy az I—V vegyületek közül csupán az I (MgS04) és a II (CaCf*) vegyületek adnak hatásos teszt-eszközt. Az 5. táblázat azt mutatja, hogy az I és II vegyületekkel készített eszközök azonnal megkülönböztetik a klinikailag fontos keton-szinteket. 4. péída Találmány szerinti reagenskészítményeket és eszközöket készítünk és összehasonlítjuk a 3,880.590 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás 1. példájában megnevezett „nehéz” fémsókkal készített kompozíciókkal. Mivel a leírás nem teljesen világos, két lehetséges változatot készítünk (A és B változat, míg a találmány szerinti a C változat). (A) E változat elkészítésénél 30 ml 0,3 mólos TRIS-t, amely 5 g/l NiCl2.6H20-t tartalmaz, összekeverünk 9 ml, alábbi alkotókból álló oldattal: dimetilformamid 5 g Na2[(NO)Fe(CN)5J. 2 H20 40 g (például 95 g vizes nitroprusszidnátrium) desztillált víz 100 ml-re szükséges menynyiség Az összekeverés eredményeként szürkéskék emulziót kapunk, amely ha a 2, példában leírt módon készítendő eszközök előállításánál kerül felhasználásra, rosszul átitatható eszközt ad, amely vizsgálatnál nehezen reagál. (B) E változat elkészítésénél 30 ml TRIS-t, amely 5 g/l NiCl2.6 H20-t tartalmaz, 9 ml alábbi alkotókból álló oldattal keverünk össze: dimetilformamid 95 g Na2[(NO)Fe(CN)5]. 2 H20 5 g desztillált víz 100 ml-re Ez az összetétel egy mentazöld átlátszó oldatot ad, amelyet az eszközök készítésére használunk. Az eszközöket a 4(A) példában megadott módon készítjük azzal az eltéréssel, hogy a papírt szobahőmérsékleten sötétben szárítjuk. (C) A találmány szerinti teszt-eszközöket pontosan a 2. példában megadott módon készítjük azzal az eltéréssel, hogy analitikai tisztaságú MgS04.7-H20-t használunk gyógyszerészeti tisztaságú magnéziumsó helyett. Tárgyilagos összehasonlítás céljából a két lehetséges (A) és (B) összetétel közül a (B) összetétellel készített eszközökkel kapott eredményeket hasonlítjuk össze a találmány szerinti összetétellel készített eszközök eredményeivel. Mindegyik ily módon készített teszteszközt egy pillanatra olyan vizeletmintákba merítjük, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
