179746. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új spiro-oxazolidinek előállítására
15 179746 16 A toluolból végzett átkristályositás 193—185 °C olvadáspontú 6,8-diklór-spiro(4H-2,3-dihidro-benzopirán)- 4,5'(oxazolidin)-2',4'-diont szolgáltat. 33. példa 6-kIór-8-metiI-spiro(4H-2,3-dihidro-benzopirán)4,5'(oxazolidin)-2 ',4 '-dión A 6-klór-8-metil-spiro(4H-2,3-dihidro-benzopirán)- 4,5'(oxazolidin)-2',4'-diont a 32. példában leírthoz hasonló módon állítjuk elő 6-klór-8-metil-4-hidroxi-4H-2,3-dihidro-benzopirán-4-karboxamidból 21,6%-os kitermeléssel. Toluolból végzett átkristályositás után az olvadáspont 185,5—187 °C. 34. példa 6-klór-spiro(4H-2,3-dihidro-benzotiopirán)4,5'(oxazolidin)-2',4'-dion A 6-klór-spiro(4H-2,3-dihidro-benzotiopirán)4,5 (oxazolidin)-2',4'-diont a 32. példában leírthoz hasonló módon állítjuk elő 38%-os kitermeléssel 6-klór-4-hidroxi-4H-2,3-benzotiopirán-4-karboxamidból, azzal a különbséggel, hogy a reakcióelegyet 54 órán át forraljuk visszafolyató hűtő alatt. Toluolból végzett átkristályosítás után az olvadáspont 213—216 °C. 35. példa (-)-6-klór-spiro(4H-2,3-dihidro-benzopirán)4,5'(oxazolidin)-2',4'-dion 32,0 g (0,126 mól) racém 6-klór-spiro(4H-2,3- -dihidro-benzopirán)4,5'(oxazolidin)-2',4'-diont 37,1 g (0,126 mól) cinkonidint melegítés közben 290 ml vízmentes etanolban oldunk. Lehűlés után a szilárd terméket, a (+)-oxazolidin-dion és a cinkonidin adduktját szűréssel gyűjtjük össze. 28,0 g (81%) terméket kapunk. A szűrletet vákuumban betöményítjük és a maradékot megosztjuk 500 ml etilacetát és 400 ml IN sósav között. A szerves réteget további 400 ml IN sósavval és 200 ml sóoldattal mossuk, magnéziumszulfát felett szárítjuk, szűrjük és 150 ml-re töményítjük be. Ehhez a szerves oldathoz 10,13 g (0,075 mól) cseppfolyós L-amfetamint adunk. A keletkező voluminózus csapadékot szűrjük, éterrel mossuk és vákuumban szárítjuk. 14,85 g (60%) (-)-oxazolidin-dion-L-amfetamin-adduktot kapunk ; (alfa)DEtOH= 136,29°; op. 171—174 °C. 14,80 g ilyen adduktot megosztunk 300 ml etilacetát és 200 ml 3N sósav között. A szerves réteget további 200 ml 3N sósavval és 100 ml sóoldattal mossuk, magnéziumszulfát felett szárítjuk, szűrjük és vákuumban bepároljuk. 9,45 g színtelen szilárd anyagot kapunk (kitermelés 97,8%); (alfa)DEtOH= 1—60,58°; op. 201—202,5 °C. A toluolból végzett átkristályositás 8,203 g (-)-6-klór-spiro(4H-2,3- -dihidro-benzopirán)4,5 '(oxazolidin)-2',4'-diont eredményez; op. 200—200,5 °C; (alfa)DEtOH=-61,59 °C. A 6-klór-spiro(4H-2,3-dihidro-benzopirán)4,5'(oxazolidin)-2',4'-dion rezolválása 1,00 g (3,95 mmól) 6-klór-spiro(4H-2,3-dihidro-öenzopirán)4,5'(oxazolidin)-2',4'-diont és 1,16 g (3,95 mmól) cinkonidint forró etanolban oldunk. Az adduktot kicsapódása után összegyűjtjük és etanolból átkristályosítjuk. 206—207 °C olvadáspontú terméket kapunk. A szilárd anyagot megosztjuk 50—50 ml etilacetát és IN sósav között. A savas fázist 50 ml etil— acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves rétegeket 50 ml sóoldattal mossuk, magnéziumszulfát felett szárítjuk, szűrjük és vákuumban bepároljuk. A maradékot loluolból átkristályosítva 288 mg (57%) 193—197 °C olvadáspontú terméket kapunk. E termék toluolból végzett átkristályosítása 200 mg (40%) 200—201,5 °C olvadáspontú (—)-6-kIór-spiro(4H-2,3-dihidro-benzopirán)4,5'(oxazolidin)-2’,4'-diont eredményez; (alfa)DEtOH=(+)60,55°. Az első etanolos anyalúgból, 1 éjjelen át való állás atán, kismennyiségű további (+) addukt kristályfrak;iót kapunk. Szűrés után ezt az anyalúgot megosztjuk 50—50 ml IN sósav és etilacetát között. A fenti módhoz hasonlóan kinyert oxazolidin-diont toluolból átkristályosítjuk. 143 mg (29%) 6-klór-spiro(4H-2,3- -dihidro-benzopirán)4,5 '(oxazolidin)-2',4'-diont kapunk; op. 199—200 °C, (alfa)DEtOH=(— )61,72°. 36. példa 37. példa A 6-klór-spiro(4H-2,3-dihidro-benzopirán)4,5 (oxazolidin)-2',4'-dion rezolválása 1,00 g (3,95 mmól) 6-klór-spiro(4H-2,3-dihidro-benzopirán)4,5'(oxazolidin)-2',4'-diont és 264 mg (2,00 mmól) L-amfetamint forró etilacetátban oldunk. Lehűlés után összegyűjtjük a 419 mg súlyú, 165— 168 °C olvadáspontú kristályokat és megszárítás után etilacetátból átkristályosítást végzünk. 221 mg 171— 173 °C olvadáspontú anyagot kapunk, (alfa)DEtOH= =32,7°. Az addukt elbontását és a (—)-oxazolidin-dion elkülönítését a 33. példában leírt módon hajtjuk végre. 53 mg 198—200 °C olvadáspontú terméket kapunk; (alfa)DEtOH=(-)60,83°. 38. példa Az előző példákban leírt módon előállított spiro-oxazolidin-dionok esetében megvizsgáltuk az aldóz-reduktáz enzim aktivitását csökkentő vagy gátló képességet. Ennek során a 3 821 383 sz. amerikai szabadalmi leírásban ismertetett eljárást alkalmaztuk, amely Hayman és társai módszerén alapul (J. Biol. Chem. 240, 877, 1965). Az alkalmazott szubsztrát borjú-szemlencséből kinyert, részlegesen tisztított aldóz-reduktáz enzim volt. Az egyes vegyületekkel 10-6 M koncentráció alkalmazása mellett kapott eredményeket, az enzimaktivitás százalékos gátlásaként kifejezve az alábbiakban tüntetjük fel. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
