179735. lajstromszámú szabadalom • Javított eljárás alfa-L-aszparagil-lfenil-alanin metilészterek előállítására
5 179735 6 1. példa Megfelelő lombikba bemérünk 140 ml metanolt és 420 ml 9 n sósavat, és jégfürdőben lehűtjük. A keletkező oldathoz hozzáadunk 113,8 g (0,4 mól) 98,5% tisztaságú a-L-aszparagil-L-fenilalanint. A kiválás rövidesen megkezdődik, A keletkező elegyet eltávolítjuk a jégfürdőből, és 30 percen át keverjük, hogy a hőmérséklete 20 °C-ra emelkedjen. A keletkező elegyet ezután jégfürdővel újra lehűtjük, 1,5 órán át keverjük, majd éjszakán át hűtőszekrényben tartjuk. Másnap a reakcióelegyet 1 órán át jégfürdőben keverjük, és a csapadékot ezután szűrésser elválasztjuk (130,5 g nedves szűrőpogácsa). A szűrőpogácsát 40 °C hőmérsékleten 750 ml ionmentes vízben feloldjuk, és pH-ját 1,5 óra alatt 4,2-re állítjuk 36,7 g 50%-os vizes nátriumhidroxid-oldattal. Ezután az elegyet körülbelül 5 °C hőmérsékletre hűtjük és 4 órán át ezen a hőmérsékleten tartjuk. A képződött csapadékot szűréssel elválasztjuk, 5x30 ml 5 °C hőmérsékletű ionmentes vízzel mossuk és szárítjuk. A keletkező 51,8 g a-APM 44%-os kitermelésnek felel meg a-L-aszparagil-L-fenilalaninra számítva. A vékonyrétegkromatográfiás és nátriumkloridos elemzés azt igazolja, hogy az a-APM termék tisztasága 95% feletti. 2. példa 34,2 ml (0,41 mól) 37%-os sósav-oldat, 60 ml víz és 40 ml metanol oldatához keverés közben 20 perc alatt hozzáadunk 110 g (0,357 mól) N-formil-a-L-aszparagil-L-fenilalanint, eközben a hőmérséklet 40 °C-ról 58 °C- ra emelkedik. A reakcióelegyet 3 órán át keverjük 58— 60 °C hőmérsékleten, ily módon a formilcsoportot hidrolízissel eltávolítjuk. A reakcióelegyet 25 °C hőmérsékletre hűtjük, és 10 perc alatt hozzáadunk 65,8 ml (0,79 mól) 37%-os sósavoldatot. Rövid időn belül megindul a kiválás. Az elegyet keverés közben 45 órán át szobahőmérsékleten és 1,5 órán át 5 °C hőmérsékleten tartjuk, hogy további csapadékmennyiség váljon ki. A szilárd csapadékot centrifugálással elválasztjuk, a szilárd anyagot 100 ml, 5 °C hőmérsékletű ionmentes vízzel mossuk. A nedves anyagot (110,2 g) 410 ml, 45 °C hőmérsékletű ionmentes vízben feloldjuk. Az oldat pH-ját 10 perc alatt 2,5-re állítjuk 80,1 g 4,8%-os vizes nátriumhidroxid-oldattal, és 1 órán át 40 °C hőmérsékleten keverjük. A hőmérsékletet 40— 42 °C értéken tartva 3 óra alatt 151,9 g 4,8%-os vizes nátriumhidroxid-oldatot adunk az elegyhez, hogy a pH-t 4,2-re emeljük. Az elegyet 1 órán át 0—5 °C hőmérsékleten keverjük, a keletkező pelyhes kristályokat centrifugálással elválasztjuk. A nedves anyagot 200 ml 5 °C hőmérsékletű ionmentes vízzel mossuk, és éjszakán át 55—60 C hőmérsékleten szárítjuk vákuumszárítószekrényben. így 58,3 g a-APM-et kapunk (N-formil-a-L-aszparagil-L-fenilalaninra számítva a kitermelés 55,5%); [a]o= -16,2° (c=4, 15 n hangyasavban); a termék tisztasága vékonyrétegkromatográfiás elemzés szerint 98% feletti. 3. példa A 2. példa szerinti módon járunk el, azonban a formilcsoport hidrolízissel történő eltávolítását követően 32,5 ml 37%-os sósav-oldatot és 33,3 ml vizet adunk a reakcióelegyhez, majd 25 C hőmérsékletre hűtjük. így 33,0%-os kitermeléssel kapjuk az a-APM-et N-formil-a-L-aszparagil-L-fenilalaninra számítva. [a]“= + 15,3° (c=4,15 n hangyasavban). 4. példa A 2. példa szerinti módon járunk el, azonban a formilcsoport hidrolízissel történő eltávolítását egy órára korlátozzuk. így 46,2%-os kitermeléssel kapjuk az a-APM- et N-formil-a-L-aszparagil-L-fenilalaninra számítva. [a]o= + !5,50 (c=4,15 n hangyasavban). 5. példa A 2. példa szerinti módon járunk el, azonban a reakció kezdetekor 34,2 ml 37%-os sósav helyett 38,7 ml 37%-os sósavat alkalmazunk és a hidrolízis után hozzáadott sav mennyiségét 61,3 ml 37%-os sósavra csökkentjük. így 53,2%-os kitermeléssel kapjuk az a-APM- et N-formil-a-L-aszparagil-L-fenilalaninra számítva. t«B= +15,4° (c=4,15 n hangyasavban). 6. példa A 2. példa szerinti módon járunk el, azonban a szilárd csapadék kiválása céljából az elegyet 4 napon át hagyjuk állni, így 59,2% kitermeléssel kapjuk az a-APM-ct N-formil-a-L-aszparagil-L-fenilalaninra számítva. [a]n=+15,2° (c=4, 15 n hangyasavban). 7. példa A 2. példa szerinti módon járunk el, azonban a szilárd csapadék kiválása céljából az elegyet csak egy napon át hagyjuk állni. így 36,3%-os kitermeléssel kapjuk az a-APM-et L-formil-a-L-aszparagil-L-fenilalaninra számítva. [a]2«= -15,5° (=4, 15 n hangyasavban). Az 1—7. példákat az alábbi I. táblázatban foglaljuk össze az előzetesen leírt paramétereket használva. I. táblázat Példa száma Metanol (mól/100 g reakcióközeg) HCI (mól/100 g reakcióközeg) Mól/mól a-L-fenil alanin-Metanol HCI 1. 0,75 0,65 9,45 10,95 2. 0,48 0,56 3,28 2,8 3. 0,49 0,45 2,58 2,8 4. 0,48 0,56 3,28 2,8 5. 0,48 0,56 3,28 2,8 6. 0,48 0,56 3,28 2,8 7. 0,48 0,56 3,28 2,8 A találmányt részletesen a fenti példákkal szemléltettük, belátható azonban, hogy az eljárásnak számos egyéb változata lehet, ezeket a szakember könnyen megvalósíthatja anélkül, hogy a találmány szellemétől és oltalmi körétől eltérne. Ezért nem korlátozzuk igény5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
