179713. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 16-amino-prosztaglandin-származékok és savaddíciós sóik előállítására
5 179713 6 preparatív vékonyrétegkromatográfiás vagy oszlopkromatográfiás módszerrel választhatjuk el. Az elválasztást szilikagél rétegen, n-heptán—etilacetát 1: 1 eleggyel végezve, a kapott poláris terméket A izomernek, az apoláris terméket B izomernek neveztük el, minthogy a két diasztereomerben a 15-ös szénatom konfigurációja jelenleg nem tisztázott még. A 9a,11a-diaciloxi-15(£)-hidroxi-16(S)-p-nitrokarbobenzoxamido-5-cisz,13-transz-prosztadiénsav-alkilészter (A izomer) és a 9a,1 la-diaciloxi-15©-hidroxi-16(S)-p-nítrokarbobenzoxamido-5-cisz, 13-transz-prosztadiénsavalkilészter (B izomer) származékokat metanolos közegben p-toluolszulfonsavval szobahőmérsékleten hidrolizálva 9a,1 la-15(0-trihidroxi-16(S)-p-nitrokarbobenzoxamido-5-cisz,13-transz-prosztadiénsav-alkilészter (A izomer) és 9a,1 la,15(^)-trihidroxi-16(S)-p-nitrokarbobenzoxamido-5-cisz, 13-transz-prosztadiénsav-alkilészter (B izomer) származékokat kapunk. A fenti reakcióutat követve, majd a találmány szerinti eljárást alkalmazva R-nor!eucinból 9a,lla-15(^)-trihidroxi-16(R)-amino-5-cisz,13-transz-prosztadiénsavat (A izomer) és a 9a,1 la,15(^)-trihidroxi-16(R)-amino-5- -cisz,13-transzprosztadiénsavat (B) izomer), illetve a fenti vegyületek rövidszénláncú alkilészterét állítottuk elő. (Megjegyezzük, hogy a 15-ös szénatom konfigurációjában eltérő két izomer megkülönböztetésére a 16 S származékoknál alkalmazott A és B izomer megjelölést használjuk.) A találmány szerinti eljárással előállított vegyületek biológiai tulajdonságait több, a 9a,lla,15(S)-trihidroxi-5-cisz,13-transz-prosztadiénsav (PGF2,) hatásainak kimutatására alkalmazott teszten vizsgáltuk meg. A simaizmot tartalmazó szervek közül a tengerimalac hörgőt, vékonybelet, illetve a patkány méhszarvat használtuk a vizsgálatokhoz. A szerveket élettani tápsós közegben függesztettük fel és a hatást az izotóniás kontrakciók alapján regisztráltuk [Pharmacological Experiments on Isolated Prepatations, ed. W. L. M. Perry, E. S. Livingstone, Edinburgh and London, 1970]. Megmértük az emberi vérlemezkék 5x 10~6 mól/l adenozin-5'-foszfáttal kiváltott aggregációjára gyakorolt hatást CHRONO LOG Aggregométerben A. V. R. Born szerint [J. Phisiol. 162, 67 (1962)]. A fentieken túlmenően P. Tolnay és munkatársai szerint [Acta Biochim. Biophys. Acad. Sei. Hung. 14, 67 (1979)] megvizsgáltuk, hogy a találmány szerinti vegyületek szubsztrátjai-e a 15-hidroxi-prosztaglandin-dehidrogenáz enzimnek. A találmány szerint előállított 16-amino-prosztaglandin-származékok biológiai tulajdonságai jelentősen eltérnek a kontrollként alkalmazott PGF^-nak és metilészterének tulajdonságaitól, mint ezt az 1. táblázat mutatja. Azt tapasztaltuk, hogy a 16-amino-prosztaglandin-származékok a 15-hidroxi-prosztaglandin-dehidroger áz enzimnek nem szubsztrátjai, így az enzim nem hatástalanítja őket. Az amino-csoport 16-os szénatomra való beépítésével a vérlemezke aggregáció gátló tulajdonság számottevően nem változott, ugyanakkor csökkent a simaizom kontrakciót kiváltó hatás a PGF2l-hoz képest, meglepő módon azonban a különböző szerveken nem egyforma mértékben. A 16(S)-amino-prosztaglandin-származékok a PGF2l-nál szelektívebben hatnak a méhizomra. 5 10 15 20 25 30 1. táblázat 15-hídroxi pr osztaglandín-dehidrogenáz A vegyület koncentrációja 1X10"« raol/l Simaizom kontrakció Vegyület Hörgő*- 1 j2g/ml lleum1 MéhP Aggregáció gátlás 100 [xg/ral % relatív hat. PGF2a Sz + 1,00 1,00 82 PGF2a-metilészter 9a, 1 la, 15(c)-tríhidroxi-16(S)-amino-5-cisz, 13-transz-Sz + 0,78 1,25 56-prosztadiénsav (A izomer) 0 ± 0,11 0,83 75 9a, 1 la, 15(^)-trihidroxi- 16(R)-amino-5-cisz, 13-transz - -prosztadiénsav (A izomer) 9a, 1 la, 15(^)-trihidroxi-16(S)-amino-5-cisz, 13-transz-0 0 0,02 0,13-prosztadiénsav-metilészter (A izomer) 9 a, 1 la, 15(^)-trihidroxi-16(R)-amino-5-cisz, 13-transz-0 0 0,17 0,99 52-prosztadiénsav-metilészter (A izomer) 0 0 0,02 0,05 Sz: szubsztrát; 0: inaktív, illetve nem szubsztrát; t: tengerimalac; p: patkány A találmány tárgyát képező új vegyületekben rejlő előnyös biológiai tulajdonságok élesen megnyilvánulnak a terhesség megszakítást kiváltó hatásban. Fehéregereknek a terhesség 17. vagy 18. napján s.c. adtuk a vizsgálandó vegyületeket, majd megfigyeltük a 48 óra alatti szüléseket és az ezt követően kivett méh állapotát (hegek, embriómaradványok) [M. J. R. Harper és munkatársai: Adv. in Biosci. 9, 789 (1973)]. 5—5 állatból álló csoportoknál kimértük a dózishatás összefüggést a PCF2a, ennek metilésztere, valamint az új 16-amino-prosztaglandin-származékok esetén. 60 A találmány szerint előállított új vegyületek lényegesen hatékonyabbnak bizonyultak a PGF2l-nál. Leghatékonyabbnak a 9a, 11 a,15(I)-tnhidroxi-16(S)-amino-5- cisz,13-transz-prosztadiénsav-metilészter (A izomer) mutatkozott, melynek a kontrollokhoz viszonyított haté- 65 ko tyságát a 2. táblázatban mutatjuk be. A táblázatban 3
