179665. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új ACTH-fragmensek és az azokat tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
19 179665 20 H-Met(-»02)-Ala-Ala-Ala-D-Lys-Phe-G!y-D-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys—NH2 Rf: 0,16 Dezamino-Met(-»02)-Ala-Ala-Phe-D-Lys-Phe-Gly-D-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys—NH2 Rf: 0,12 H-Met(^02)-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-Gly-D-Lys-Pro-Val-Giy-Lys-Lys—NH2 Rf: 0,14 H-Met(-»-02)-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-OMe Rf: 0,22 Dezamino-Met(—0,)-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-G!y-D-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys—NH2 Rf: 0,17 Az Rf értékeket (Woelm) szilikagél vékonyréteg lemezeken kapjuk Bu : Py : Ac : Wa 38 : 24 : 8 : 30 arányú elegyében. 8. példa Az 5. példában leírt módon előállított következő peptideket a 3. példában leírt körülmények között szulfoxidokká oxidáljuk és a peptideket acetátok formájában kapjuk : H-Met(-*-0)-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-G!y-Lys-Pro-Val-GIy-Lys-Lys—NH2 Rf: 0,19 H-Met(—0)-Glu-His-Phe-D-Lys-Phe-Gly-D-Lys-Pro-Val-GIy-Lys-Lys—NH2 Rf: 0,21 Dezamino-Met(— 0)-Ala-Ala-Phe-D-Lys-Phe-Gly-D-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys—NH2 Rf: 0,10 Az Rf értékeket Woelm-en mértük Bu : Py : Ac : Wa 38 : 24 : 8 : 30 arányú eluálószerben. 9. példa H-Met-Ala-Ala-Phe-D-Lys-Phe-Gly-Lys-Pro-Val--Gly-Lys-Lys—OH előállítása 3,3 g Boc-Met-Ala-Ala-Phe-D-Lys-(Boc)-Phe-Giy— —OH (302) és 571,0 mg HOOBt elegyét 20 ml DMF-ben oldjuk, majd az oldatot 0 °C-on hűtjük. 760 mg DCCI-t adunk az oldathoz. Az elegyet 1 óráig keverjük 0 °C-on és mintegy 16 óráig szobahőmérsékleten. A DCHU csapadékot leszűrjük és a szűrletet bepároljuk. 3,8 g maradékot kapunk, amely a fenti kiindulási pepiid benztriazin-észtere és 4,06 g 206. szerinti H-Lys(Boc)-Pro-Va!-Gly-Lys(Boc)-Lys(Boc)— —OH-t 50 ml DMF-ben oldunk fel. Az elegyet 16 óráig keverjük és szárazra pároljuk. A maradékot 200 ml szek-butanol és kloroform 2 : 3 arányú elegyében oldjuk és vízzel, 0,01 sósavval és ismét vízzel mossuk. Az oldatot nátrium-szulfáttal szárítjuk, majd leszűrjük és szárazra pároljuk. Termelés: 6,7 g. Az 1. b) példában leírt módon kapott peptid védőcsoportját eltávolítjuk. Termelés: 4,0 g. Rf: Bu : Py : Ac : Wa 38 : 24 : 8 : 30 arányú elegyében 0,35 (Woelm) szilikagél vékonyréteg lemezeken. 10 10. példa Cink komplex 50 mg cink/ml tartalmú 1,5 ml cinkklorid oldatot 31,5 mg dinátrium-hidrogénfoszfát-dihidrát 30 ml desztillált vízzel készített oldatához adjuk. A keletkezett cinkfoszfát csapadékot ismét feloldjuk 4n sósav hozzáadásával. 175 mg nátrium-klorid és 0,5 ml benzilalkoholt adunk az elegyhez. Ezután 1,5 mg H-Met-Ala-Ala-Phe-D-Lys-Phe-Gly-D-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys—NH2 pepiidet feloldunk ebben az elegyben és annyi In nátrium-hidroxidot adunk hozzá, amennyi elegendő a pH 8,5 -re állításához. Utána a térfogatot desztillált vízzel 50 ml-re töltjük fel. 1 ml szuszpenzió: 30 [jig pepiidet 1.5 mg cinket 0,53 mg dinátrium-hidrogénfoszfát-dihidrátot 3.5 mg nátriumkloridot 10 mg benzilalkoholt tartalmaz. Az 1 ml szuszpenziót liofilizáljuk és ampullában tároljuk. 1 ml sterilizált vizet adunk az ampullába és az injekció kész a felhasználásra. 11. példa Tabletta 2,5 mg karboximetilcellulózból, 20 mg keményítőből és 68,5 mg laktózból álló granulátumot készítünk. Ezt a granulátumot gondosan összekeverjük egy 7,5 mg 1. példából származó peptid, 1 mg talkum és 0,05 mg magnéziumsztearát elegyével és 100 mg-os tablettává préseljük. 12. példa Injekciós készítmény 1. példából származó peptid 5,0 jjtg nátrium-klorid 9,0 mg metiloxibenzoát 1,2 mg desztillált pirogénmentes víz 1,0 ml 13. példa Kapszula Keményzselatin kapszula 1. példa szerinti peptid 0,5 mg magnézium-sztearát 1,45 mg povidon 5,5 mg mannitol 137,0 mg Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás az A-L-B-D-Lys-L-Phe-Gly-(L vagy D)Lys-L-Pro-L--Val-Gly-L-Lys-L-Lys-X (I) I általános képletü peptidek — ahol A jelentése hidrogénatom, H-Met-Ala-Ala, H-Met-Glu-His, H-Aia-Ala-Ala, H-Val-Ala-Ala, H-Met-Gly-Ala, H-Met-Glu-Ala, H-Ala-Ala, H-Ala, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
