179662. lajstromszámú szabadalom • Eljárás anyarozs-alkaloidák izolálására
5 179662 6 5. példa Az ergozint termelő Claviceps purpurea IMET PA 134 törzsből készült 30 liter kultúraszuszpenziót természetes pH-n (5—6) 30 percen keresztül 1,2 kg bentonittál keverünk, egy kalcium-szulfát-dihidrát lemezen leszűrünk és a szűrletet eldobjuk. A nedvesmicélium-berttonit elegy 1. példa szerinti szárítása 2,8 kg tárolható szárazmicélium-bentonit elegyet ad, amely a kultúraszuszpenzióban analitikailag meghatározott alkaloidákat (ergozin, ergozinin, nyomokban kanoklavin) gyakorlatilag 100%-os mennyiségben tartalmazza. A 10—12-szeres mennyiségű etilacetátta! végzett keverősextrakció kitermelése átlagosan 90% a szárazmicélium-bentonit elegyre vonatkoztatva. 6. példa Az 5. példában leírt törzsből készült 20 liter kultúraszuszpenziót adszorpciószer adagolása nélkül egy 20 mm-es kalcium-szulfát-dihidrát lemezen szűrünk; a szűrletet, amely csak nyomnyi ergozint és a kísérőalkaloidák egy részét tartalmazza, eldobjuk. Az izolált nedvesmicéliumot rögtön fluidizációs szárítóban megszárítjuk 90 °C hőmérsékleten, míg a kilépő-levegő hőmérséklete a 60 °C-ot eléri (szárítási idő 40 perc). Ily módon 0,8—1,0 kg tárolható szárazmicélíumot kapunk, amely a kultúraszuszpenzióban meghatározott ergozin 96—100%-át és nyomnyi kísérőalkaloidát tartalmaz. Az alkaloida kinyerése érdekében a szárazmicélíumot 150 ml 10%-os vizes ammónia oldattal végzett duzzasztás után 8 liter kloroformmal két részletben extraháljuk és a vizes-savas fázisba történő átvitel, reextrakció és bepárlás után a kapott koncentrátumból bórsavval kicsapjuk a nyerstartarátot. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás anyarozs-alkaloidák elválasztására kultúraszuszpenzióból, azzal jellemezve, hogy a levett kultúraszuszpenziót természetes állapotban vagy — vízoldható alkaloidák jelenlété esetén — duzzadóképes agyaggal elkeverve mechanikusan, például szűréssel elválasztjuk, a lejövő nedvesmicéliumot, illetve nedvesmicélium-adszorbens elegyet fluidizációs eljárással megszárítjuk, szükség 5 esetén szerves, aprotikus oldószerrel extraháljuk, a kapott extraktumot adott esetben hígított vizes savval extraháljuk, a vizes extraktumot lúgosítás után vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel reextraháljuk és az így előtisztított extraktumból a tiszta alkaloidát az is-10 mert módon előállítjuk. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy duzzadóképes agyagként 4—5 súly% derítőföldet, fullerföldet, kallóföldet vagy bentonitot használunk és a kultúraszuszpenziót a mechanikus elválasztás előtt 15 30 percen keresztül kevertetjük az adszorbenssel. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a nedvesmicélium, illetve a nedvesmicélium-adszorbens elegy fluidizációs szárítását 80—90 °C hőmérsékleten, 20—40 perc szárítási idővel végezzük, míg a kilépő-20 levegő hőmérséklete az 50—70 °C-ot és a maradék nedvesség a 15/ó-ot eléri. 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a szilárd-folyadék extrakciót rövidszénláncú alkil-25 karbonsavészterrel, előnyösen etilacetáttal, acetonnal vagy halogénezett szénhidrogénnel, előnyösen kloroformmal vagy metilénkloriddal végezzük és a szárazmicéliumot, illetve a szárazmicélium-adszorbens elegyet az extrakció előtt 10—20 súly%-os vizes lúg, előnyösen 30 ammónia oldattal duzzasztjuk. 5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kapott nyersextraktumot a nem bázikus ballasztanyagok eltávolítása érdekében 2 : 2—1 : 1 arányú vizes 35 savval, előnyösen 3—5%-os foszfor- vagy bórsavval extraháljuk. 6. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a kapott vizes-savas fázist 8,0—9,5 pH-érték be-40 állítása után 1 ; 1—3 : 1 arányú rövidszénláncú alkilkarbonsavészterrel, előnyösen etilacetáttal vagy halogénezett szénhidrogénnel, előnyösen kloroformmal vagy metilénkloriddal reextraháljuk. A kiadásért felel; a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 84.581.66-4 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető; Benkő István igazgató
