179655. lajstromszámú szabadalom • Eljárás interferon termelés fokozására
11 179655 12 Koncentráció Butiráttal előkezelt sejtek Interferon koncentráció l°g,0 egység/ml Interferon-hozam megaegység/liter 7. poliribóz-sav poliribocitidil sav-komplex: DEAE-dextrán 100 ptg 0,92 0,008 8. poliribóz-sav poliribocitidil sav-komplex: DEAE-dextrán 100 [Ag + 1,66 0,05 Poliribóz-sav—poliribocitidil-sav-komplex: P—L Biochemicals Inc. gyártmánya Lot. No. 447121. * pfu=rétegképző egységek 10. példa Interferon hozam növelése vajsavas kezeléssel Namalva/WRL sejtekkel, amelyeket kevesebb vérsavót tartalmazó közegben tenyésztünk. Normál feltételek mellett 7% borjúvérsavót tartalmazó RPMI 1640 közegben tenyésztett Namalva/WRL sejteket csak 2 térfogat% borjúvérsavót tartalmazó közegben tenyésztés céljából adaptálunk. A tenyészetek sejtkoncentrációja rendszerint 1,5—2,0xl06 sejt/ml. Két tenyészetből mintát veszünk, (1,67 és 2,5 x1c6 sejt/ml koncentrációval) és felére hígítjuk friss tenyészközeggel. Mindegyik tenyészethez 1 mmól koncentrációban vajsavat adunk és a két tenyészetet 37 °C-on 48 óra hosszat keverjük. A vajsavas kezelést követően a sejteket interferon 15 termelésre gerjesztjük. Kontroll gerjesztéseket is végzünk két olyan sejtminta felhasználásával, amelyeket vajsavval nem kezelt tenyészetből veszünk. Ezeket természetesen korábban 2 napig normál tenyészközegben tenyésztettük. Mind a vajsavval kezelt, mind a kontroll 20 sejttenyészetet centrifugáljuk és 2,75 x 106 sejt/ml koncentráció mellett friss közegben újra szuszpendáljuk. 50 HAU/ml koncentrációban Sendai-vírust adunk hozzá és a tenyészeteket 35 °C-on egy éjjelen át inkubáljuk. 25 A tenyészetekből kinyerhető interferon hozam a következő: Kontroll (vajsavval nem kezelt): log103,45 és 3,46 ml 3 mega-egység/liter ; vajsavval kezelt sejtek: logt04,69 és 4,82 ml átlagosan 30 58 mega-egység/liter. A kiadásért felel: a Közgazdaság! és Jogi Könyvkiadó igazgatója 83.580.66-4 Alföldi Nyomda, Debrecen — Felelős vezető : Benkö István igazgató
