179600. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a C-15003 P-3-antibiotikum előállítására
13 179600 14 6. táblázat C—15003 P-3 antibiotikum C32H43C N2O9 = 635,169 molekulasúly Olvadáspont (°C) 190-192 Fajlagos forgatóképesség [al2n-136° ± 10° (c = 0,375; CHC3) Elemzési eredmények talált értékek C =60,06%, H = 7,04% N = 4,33% C = 5,37% Elemzési eredmények talált értékek C =60,51% H = 6,82% N = 4,41% C = 5,58% Ibolyántúli abszorpciós spektrum mm-ben (e) (metanolban felvéve) 233 (30250) 240 (váll 28450)252(27640) 280(5750)288 (5700) Infravörös abszorpciós spektrum (cm'1 ) KBr-ban felvéve 1740, 1730,' 1670, 1580, 1445, 1385, 1340, 1255, 1180, 1150,1100,1080, 1038 Magmágneses rezonancia spektrum (ppm) 100 MHz; Cd Cl 3 1.27 (d)(3H) 1.28 (d) (3H) Tömegspektrum (m/e) 573,485,470, 450 Oldékonyság Petroléterben, hexánban és vízben oldhatatlan; kloroformban, etil-acetátban, acetonban, etanolban, metanolban, piridinben, tetrahidrofuránban vagy dimetil-szulfoxidban oldódik, benzolban és dietil-éterben rosszul oldódik Színreakciók Dragendorff: pozitív Beilstein: pozitív cularia oryzae, Cochlioborus miyabeanus, Sclerotinia screrotiorum, Pellicularia sasakii, Trichophyton rubrum, Rhodotorula rubra és Cryptococcus neoformans. B) Tumorgátló hatás Az intraperitoneálisan 9 egymást követő napon át beadott P—3 antibiotikum terápiái hatását egereken a P388 leukémiával szemben (a leukémia intraperitoneüisan 1 ■ 106 sejt/állat arányban lett transzplantálva) vizsgálva megállapítható, hogy a P—3 antibiotikum 0,00625 mg/kg/nap dózisban igen magas, azaz 163%-os túlélést növelő arányt mutat. C) Toxicitás Kísérleti állatként egereket alkalmazva durva akut to;;icitási vizsgálatban a P—3 antibiotikumot intraperitoneális injekciók formájában beadva LD50 értéke 0,313 mg/kg-nál nagyobb. Miként korábban említettük, a P—3 antibiotikum erős gátló hatást fejt ki gombák és protozoák növekedésére, így felhasználható megfelelő gyógyászati készítmények hatóanyagaként. Tekintettel arra, hogy ugyanakkor tumorban szenvedő emlősök, például az egér túlélési idejét növeli, remélhető, hogy tumorgátló gyógyászati készítményekben is használható lesz. A P—3 antibiotikum mint gombák és protozoák növekedését gátló vegyület előnyösen használható például talaj, aktivált iszap vagy állati testnedv bakteriális ökológiájának vizsgálatában. így például ha talajmintából értékes baktériumokat kívánunk izolálni vagy a baktériumok hatását a gombák és a protozoák hatásától függetlenül kívánjuk kiértékelni szennyvíztisztításra használt aktivált iszaprendszer működtetése és elemzése kapcsán, akkor a P—3 antibiotikum felhasználható a mintát szennyező gombák és protozoák növekedésének szelektív gátlására a bakteriális flóra za vartalan növekedése mellett. Egy ilyen vizsgálat során tipikus módon úgy járunk el, hogy a vizsgálandó mintát hozzáadjuk egy folyékony vagy szilárd tápta'ajhoz, a kapott keverékhez P—3 antibiotikum 1% metanolt tartalmazó vizes eleggyel készült, lC-100pg/ml koncentrációjú oldatából 0,1 ml-t adunk a táptalaj 1 ml-jére vonatkoztatva és végül az így kapott rendszert inkubáljuk. A P—3 antibiotikum felhasználható továbbá a korádban felsorolt mikroorganizmusok által okozott növényi megbetegedések kezelésére. Ilyenkor jellegzetes módon a P—3 antibiotikum 1% metanolt tarta mazó vizes eleggyel készült, 0,5-5 pg/ml koncentráriójú oldatát hasznosítjuk. A P—3 antibiotikum felhasználható például rizs esetében üszög, Helminthospc rium levélfoltosság és hüvelyragya (sheath blight) kezelésére. A találmányt közelebbről az alábbi kiviteli példákkal kívánjuk megvilágítani. A példákban megadott százalékos értékek vegyes%-os értékek, ha csak misképpen nem jelezzük. 1. példa 200 térfogatrész befogadására alkalmas Erlenmeyer-lombikba bemérünk oltóanyag készítésére alkalmas, 7,0 pH-jú táptalajból (1,0% glükózt, 2% Bacto-triptont és 1,2% Bacto-élesztőkivonatot tartalmaz) 40 térfogatrészt, majd sterilizálás után a táptalajt beoltjuk a Nocardia sp. No. C-15003 törzzsel (IFO-13726, ATCC—31281, FERM-P No. 3992). A tenyészetet ezután 28 °C-on 200 fordulat/perc fordulatszámmal forgó rázógépen inkubáljuk oltótenyészetet kapva. A tenyészetből a sejteket háromszor sterilizált desztillált vízzel mossuk, majd a mosott sejteket az 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
