179497. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az inzulin-kiválasztást befolyásoló biológiailag hatásos anyag előállítására Bordetella-pertussis felhasználásával
29 179497 olyan adalékanyagok is, amelyek a találmány szerinti biológiailag aktív anyag hatását nem befolyásolják károsan. A találmány szerinti biológiailag hatásos anyag előállítását az 1. példában leírt módon, különböző patogén és nem-patogén Bordatella pertussis mikroorganizmus törzsekkel végeztük, és az elért kitermelést az 1. példa 3. pontjában alkalmazott Maeno-törzzsel kapott kitermeléshez viszonyítottuk. Az eredményeket a 19. táblázatban ismertetjük. Megállapítható, hogy a találmány szerinti biológiailag hatásos anyagot a patogén Bordatella pertussis mikroorganizmusok mindegyike termeli. 19. táblázat B. pertussis törzs jele Relatív kitermelés, % Patogén törzs Maeno 100 Tohama 126 3379B sz. 95 18-323 112 7341 sz. 91 Nem-patogén törzs Sakairi ~ 1 Miyazaki ~ 0 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás emlősöknél az inzulin-kiválasztást elősegítő, valamint a glükóz-toleranciát javító biológiailag hatásos anyag előállítására, amelynek tulajdonságai a következők: molekulasúly: 77 000 ± 6400, gélszűréssel meghatározva; kémiai összetétele: 5 proteintartalom 95 sűly% felett, a Lowry-féle eljárással meghatározva; glucidtartalom lényegében 1 súly%, fenollal és kénsavval végzett meghatározás szerint; lipoidtartalom a kimutatási határ alatt van; 10 a fehéijekomponens aminosav összetétele, átlagértékek íiM/100 juM-ban: aszparaginsav 7,5, treonin 7,3, szerin 6,4, glutaminsav 10,0, prolin 5,8, glicin 8,8, alanin 9,3, cisztin/2 2,5, 15 valin 6,5, metionin 2,8, izoleucin 4,0, leucin 7,8, tirozin 6,5, fenilalanin 3,7, lizin 3,3, hisztidin 1,5 és arginin 6,4:, izoelektromos pH-érték: 8,4 ± 0,5; a discelektroferogramm 7,5% poliakrilamid-koncent- 20 rációval és 4,3 pH-értékű 1 n kálium-hidroxid és jégecet pufferral végzett akrilamid-discelektroforézisnél a katódoldalon egyetlen éles sávot mutat; azzal jellemezve, hogy patogén Bordetella pertussis mikroorganizmust szénforrást, nitrogénforrást, ás- 25 ványi sókat és fejlődést serkentő adalékot tartalmazó táptalajon tenyésztünk, és a fent meghatározott tulajdonságokkal bíró anyagot a tenyészetből elkülönítjük. 30 2. Eljárás hatóanyagként az 1. igénypont tárgyi kőiében meghatározott biológiailag hatásos anyagot tartalmazó, az inzulin-kiválasztást elősegítő és a glükóz-toleranciát javító hatású, diabetes kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmények előállítására azzal 35 jellemezve, hogy az 1. igénypont szerinti eljárással előállított, biológiailag hatásos anyagot a gyógyszerkészítésben szokásos hordozó-, hígító-, töltő- és/vagy egyéb segédanyagokkal együtt megfelelő gyógyszerkészítménnyé kikészítjük. 40 30 4 rajz, 5 ábra A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jog; Könyvkiadó igazgatója 834144 - Zrínyi Nyomda, Budapest 15