179463. lajstromszámú szabadalom • Eljárás dexozi-narazin antibiotikum-komplex előállítására
5 179463 6 2. táblása' Oldószerelegy Rf-érték dezoxi- epi-dezoxinarazjn A—28 086 D -narazin -narazin Víz-metanol-aceton 12 : 3 :1 arányú elegye, amelynek pH-ját ammóniumhidroxiddal 10,5-re, majd foszforsawal 7,5-re állítottuk be Víz-metanol-aceton 12 : 3 : 1 arányú elegye, amelynek pH-ját ammóniumhidroxiddal 10,5-re majd hidrogénkioriddal 7,5-re állítottuk be 1% metil-izobutil-ketont és 0,5% ammóniumhidroxidot tartalmazó víz Vízzel telített benzol Víz-metil-izobutil-keton-etilacetát 98 :1 :1 arányú elegye-17-narazin Rf-értékeit különböző papírkromatográfiás rendszerekben végezve a futtatást és az előhívást Bacillus subtilis ATCC 6633 mikroorganizmussal végezve az alábbi 2. táblázatban adjuk meg. Az előbbi antibiotikumok Rf-ériékeit szilikagél vékonyrétegkromatográfiával is meghatároztuk, a futtatóelegyeket és az eredményeket a 3. táblázatban ismertetjük. 3.táblázat Rf-érték Oldószerelegy epinarazin 086 D dezoxi- -dezoxi- A—28 -narazin -narazin etilacetát 0,29 0,35 0,42 0,74 A találmány szerint előállított dezoxi-narazin antibiotikumok (a 20-dezoxi-narazin és a 20-dezoxi-epi-17-narazin) különböző szerves oldószerekben, például metanolban, etanolban, dimetil-formamidban, dimetil-szulfoxidban, etilacetátban, kloroformban, acetonban és benzolban oldódnak. Nem poláros szerves oldószerekben, például hexánban nagyon gyengén, vízben egyáltalán nem oldódnak. Meg kell jegyeznünk azonban, hogy a 20-dezoxi-narazin szabad savként alkoholokban nem állandó, 20-dezoxi-epi-17-narazin szabad savvá alakul át. így például ha 435,1 mg 20-dezoxi-narazint 40 ml metanolban oldunk, és az oldatot 4 órán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni, majd csökkentett nyomáson desztilláljuk, a desztillációs maradékot dioxánban oldjuk, majd fagyasztva szárítjuk, 417,8 mg 20-dezoxi-epi-17-narazint (sav) kapunk. A 4 038 384 számú Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásban ismertetnek egy A-28 086 I jelű vegyületet, amely a kromatográfiás vizsgálat szerint megtalálható a dezoxi-narazin komplexben is. Bár ez az anyag kezdetben együtt vált ki a dezoxi-narazin antibiotikumokkal, ez szilikagél kromatográfiával 0,20 0,11 0,08 0,21 0,42 0,25 0,21 0,44 0,56 0,38 0,33 0,66 0,51 0,51 0,74 0,55 0,77 0,61 0,51 0,68 könnyen elválasztható. Szilikagél vékonyrétegkromatografiakor ez a vegyület kevésbé polárisán viselkedik, jnint a 20-dezoxi-narazb vagy a 20-dezoxi-epi-17-na- 25 razin, ha a futtatást etilacetáttal végezzük. A kromatográfiás foltok meghatározását vanillin reagenst tartalmazó permettel végezzük (3% vanillin metanolban + 0,5 ml tömény kénsav 100 ml oldatként). A vanillinnel való permetezést követően melegítjük a kro- 30 jnatográfiás lemezeket, amikor ez a vegyület, hasonlóan az A-28 0861-vel kék színű foltként jelentkezik, míg a dezoxi-narazin antibiotikumok később megsötétedő világossárga foltként láthatók. A 20-dezoxi-narazin és a 20-dezoxi-epi-17-narazin 35 sókat alkot. A 20-dezoxi-narazinnak és a 20-dezoxi-epi-17-narazinnak a gyógyszerészeti szempontból elfogadható alkálifém-, alkáli-földfém- és aminsói a találmány oltalmi köréhez tartoznak. Gyógyszerészeti szempontból elfogadható sóknak azokat a sókat ne- 40 vezzük, amelyeknek melegvérű állatokkal szembeni toxicitása a szabad vegyület toxicitásához képest nem növekedett. A találmány előnyös kivitelezési változatai szerint a 20-dezoxi-narazinnak és a 20-dezoxi-epi-17-narazinnak a következő alkálifém- és alkáli- 45 -földfém sóit állítjuk elő: nátrium-, kálium-, lítium-, cézium-, rubidium-, bárium-, kalcium- és magnéziumsó-. Aminsóként előnyösen a 20-dezoxi-narazin és a 20-dezoxi-epi-17-narazin ammonium- és primer, szekunder vagy tercier 1—4 szénatomos al- 50 kil-ammónium- és hidroxi-(2—4 szénatomos)-alkil-ammónium-sóit állítjuk elő. Ebben az esetben a 20-dezoxi-narazint és a 20-dezoxi-epi-17-narazint például ammóniumhidroxiddal, metil-aminnal, szekunder-butil-aminnal, izopropil-aminnal, dietil-amin- 55 na!, diizopropil-aminnal, etanol-aminnal, trietil-aminnal, 3-amino-l-propanollal vagy hasonló vegyületekke! reagáltatjuk. A 20-dezoxi-narazin és a 20-dezoxi-epi-17-narazin alkálifém- és alkáli-földfémsóit a kationos sók előállí- 60 tásakor széleskörűen használt módszer szerint állítjuk elő- így például az antibiotikum szabad sav alakját megfelelő oldószerben, például acetonban, vagy dioxán és víz elegy ében oldjuk, a sztöchiometrikus mennyiségű szervetlen bázist ezután hozzáadjuk az ol- 65 dathoz. Az így kapott sót ismert módszerekkel, 3
