179353. lajstromszámú szabadalom • Eljárás akuleacin-AÓ-Aš, -DÓ és-Dš antibiotikum előállítására
11 179353 12 sztirén, kifejlesztőszer: 0,01% trietilamint tartalmazó 85%-os vizes metanol, az oszlop hőmérséklete 55 °C), és a 7,4—8,4 perc retenciós idejű frakciókat összegyűjtjük. A műveletet megismételjük és a kapott frakciókat egyesítjük, vákuumban szárítjuk, 5 majd kevés metanolban feloldjuk. Az oldathoz hozzáadunk 1 : 1 arányú etilacetát-n-hexán elegyet, és a kivált csapadékot összegyűjtve 230 mg tiszta akuleacin-Aa-t kapunk. A 4. példa szerint a nagynyomású folyadékkromatografálással kapott, 11,4-13,4 perc retenciós idejű frakciókat gyűjtjük össze és a 4. példában leírt módon dolgozzuk fel. 50 mg tiszta akuleacin-Ay-t kapunk. 6. példa A 3. példában kapott 32-42. frakciókat egyesítjük és vákuumban be párolva 900 mg fehér port kapunk, amit kevés metanolban feloldunk. A méta- 2J nolos oldatot 2 g kovasavgáen felitatjuk, majd a metanolt csökkentett nyomáson elpárologtatjuk. Ezt az átitatott kovasavgélt 45 g kovasavgéllel (Tokyo Kaséi Co. készítménye) töltött, 25 mm belső átmérőjű oszlopra helyezzük és 10 : 1,5 arányú klóroform-metanol eleggyel eluáljuk. 5 g-os frakciókat gyűjtünk és a 76-141. frakciókat egyesítjük és megszárítva 370 mg, akuleacin-Da-t és -I>y-t tartalmazó keveréket kapunk. A keverékből metanolos oldatban 10jzl-nyi mennyiséget a 4. példában leírt módon nagynyomású folyadékkromatografálásnak vetünk alá és a 8,6—9,8 perc retenciós idejű frakciókat összegyűjtjük. A műveletet megismételjük és a kapott frakciókat egyesítjük, vákuumban szárítjuk, majd kevés metanolban feloldjuk. Az oldathoz 1 :1 arányú etilacetát-n-hexán elegyet adunk és a kivált terméket összegyűjtve 115 mg tiszta akuleacin-Da-t kapunk. 7. példa A 6. példa szerinti nagynyomású folyadékkromatografálással kapott, 14,4—16,4 perc retenciós idejű frakciókat gyűjtjük össze és a 6. példában leírt módon dolgozzuk fel. 15 mg tiszta akuleadn-Dy-t kapunk. Szabadalmi igénypont: Eljárás az akuleacin-Aa, akuleacin-A7, akuleacin-Da és akuleacin-Dy antibiotikum .és ezek keverékei előállítására azzal jellemezve, hogy az Aspergillus aculeatus M 4845 mikroorganizmust - típustörzsének letétbehelyezési száma NRRL 11270, illetve FERM—P 4023 - asszimilálható szén- és nitrogénforrást tartalmazó táptalajon tenyésztjük, a kapott akuleacin-keveréket elkülönítjük, és kívánt esetben komponenseire szétválasztjuk. 5 ábraoldal A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 83.4060 - Zrínyi Nyomda, Bidapest 6
