179332. lajstromszámú szabadalom • Eljárás takarmányfehérje előállítására
J 3 170332 14 fermentorba öntünk, és az alábbi anyagokat adjuk hozzá 5 g ammónium-klorid 3,6 g dinátrium-hidrogén-foszfát 2,4 g kálium-dihidrogén-foszfát 1,2 g magnézium (Il)-szulfát-víz (1/7) 1,8 g karbamid 0,5 g száraz élesztő, vízzel előzőleg felfőzve 6 ml „A” oldat, az 1. példában megadott módon készítve, 12 ml metanol Az oldat pH értékét 6,5-re állítjuk tömény ammónia, illetve hígított sósavval. A fermentlén átmenő levegő áramlását 0,3 térf./térf./percben, a keverést pedig 380 ford/perc sebességben szabjuk meg. A fermentor hőmérsékletét 29 °C-on tartjuk termosztálással. Az esetleges habzásnál szilikonolajos habzásgátlót alkalmazunk. A fermentorból naponként mintát veszünk, pH értékét korrigáljuk, a szükséges méréseket és vizsgálatokat elvégezzük, és napi 12 ml metanolt adunk csupán hozzá. (A fermentlé vezetőképességi értéke 5000/rSiemens körül állandósul). A hatodik napon a kivett minta térfogatát úgy szabjuk meg, hogy a fermentorban levő oldat legfeljebb 4,8 liter maradjon. Ezután a fermentléhez öntünk 1,2 liter, az oxidációs árok tisztított vizével készült tápoldatot, melyhez a kiindulási teljes térfogathoz felhasznált anyagok részarányos mennyiségét hozzáadtuk. Az oldattal egyidejűleg 12 ml metanolt is adunk a fermen tiéhez. A továbbiakban azt a tápanyagcserét naponként folyamatosan végezzük. 10 nap múlva a metanol adagot 18 ml-re, majd újabb 10 nap múlva 24 ml-re emeljük fel. Ennek megfelelően az első 10 nap végén literenként 1,3 gramm, a következő 10. napon 2,1 gramm, és a 30. napon 3,0 gramm száraz biomasszát kapunk ismert módon kinyerve. Ezek fehérje tartalma N-alapon mérve 75%, és mikrobiológiailag értékelve 2 ± 0,5 mikrogramm B)2-vitamin aktivitást mutatnak. 8. példa A 3. példában részletezett technológia alapján járunk el, azzal a különbséggel, hogy metanol helyett ipari célra felhasználható etanolt, „B” oldatként pedig 2%-os vizes 5-aminolevulinsav oldatát alkalmazzuk. A kiindulás 6. napjától kezdve — ismert módon kinyerve - literenként 20 g száraz biomasszát kapunk, melynek N-alapon mért fehérje tartalma 52%, és grammonként 5 ± 1 mikrogramm B12-vitamin aktivitást tartalmaz mikrobiológiailag értékelve. 9. példa 10 literes üvegfermentorba 5,5 liter csapvizet öntünk, és az alábbi anyagokat tesszük hozzá: 50 g 85%-os foszforsav 100 ml tömény ammónia oldat, majd ezzel a két anyaggal beállítjuk az oldat pH értékét 6,5-re, továbbá szükséges hozzá: 5 g magnézium (II)-szulfát-víz(l/7) 20 g karbamid 25 g kukoricalekvár 6 g száraz élesztő, vízzel előzőleg felfőzve 5 ml „A” oldat és 5 ml „B” oldat (mindkettő az 1. példa szerint készítve) 120 ml metanol. Ezután szennyvízderítő berendezés kirothasztott iszapjából 0,5 litert a tápoldattal gondosan elkeverünk. A szükséges vizsgálatokhoz mintát veszünk az oldatból, majd a készüléket lezárva 29 °C-os vízfürdőbe helyezzük. Állandó keverés (380 ford//perc), levegő beáramlás (0,7 térf/térf. fermentlé/Iperc) mellett végezzük a tenyészet fenntartását. A fermentorból naponként mintát veszünk, pH értékét korrigáljuk, a szükséges méréseket és vizsgálatokat elvégezzük, és naponként 120 ml metanolt öntünk hozzá. A 6. napon a kivett mintával a fermentlé térfogatát úgy szabjuk meg, hogy a fermentorban levő oldat 4,8 liter maradjon. Ezután 1,2 liter csapvízzel készült tápoldatot öntünk hozzá, melyet a kiindulási teljes térfogathoz felhasznált anyagok részarányos mennyiségeiből készítettünk. A tápoldathoz 120 ml metanolt is adunk. A továbbiakban napi 1,2 liter tápanyagcserével folytatjuk a fermentációt, mintegy 3 héten keresztül, amíg a literenkénti biomassza tartalom egyenletesen 25 g feletti értéket nem mutat. Ezután 600 ml tápoldat és 30 ml metanollal 3 óránként folytatjuk a tápanyagcserét, és a leengedett 600 ml fermentlevet 10 literes üvegfermentorba öntjük, 29 °C-on keverjük, és hasonlóan levegőztetjük. A naponként meggyűjtött 4,8 liter fermentlevet, a napi utolsó leengedéstől számított 6 óráig még tovább fermentáljuk, majd az 1. példában megadott módon az egészet lecsapjuk, a felülúszót ledekantáljuk, és a csapadékot ismert módon kinyerjük. 128 g száraz biomasszát kapunk, melynek grammonkénti B]2-vitamin aktivitása 2±0,5 mikrogramm, mikrobiológiailag értékelve. A 3 óránkénti tápanyagcserét mindaddig folytatjuk, amíg a főfermentor literenkénti biomassza tartalma 15 g alá nem esik. Ekkor naponkénti 1,2 literes cserékre térünk vissza, és ha a biomassza tartalom ismét eléri a 25 grammot, a levett csere térfogatát a továbbiakban már számítással vagy empirikus módon szabjuk meg. 10. példa Mindenben a 9. példában leírtak szerint járunk el, azzal a különbséggel, hogy a literenkénti biomassza tartalom állandósulása után a fermentlé leengedését és a metanolos tápoldat egyidejű hozzáadását folyamatosan 3,5 ml/perc áramlási sebességgel végezzük. A biomassza tartalom csökkenése esetén a folyamatos csere mértékét számítással vagy empirikus 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
