179207. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új streptomyces-metabolit előállítására
179207 b/ A termék nujolban felvett infravörös abszorpciós spektruma az 1. ábrán bemutatottnak felel meg, és a spektrumban 3300, 1725» 1645, 1565 és 915 cm“l-nél észlelhetők jellemző sávok. c/ A termék deuterokloroformban felvett NMR spektruma a 2. ábrán bemutatottnak felel megd/ A termék etanolos oldatban felvett ultraibolya spektrumában 245 nm-nél /£ = 12 900/ és 272 nm-nél /£ = 10 800/ jelennek meg jellemző abszorpciós sávok. é/~A—Fëïmêk' 176-178“ 0 °-'öö "öl V f/ A termék optikai for gat óképes sége^cj - -82° /c = 0,2 %t metanolban/. Az M 139 603 jelű uj metabolitnak megfelelő szabad sav tapasztalati képlete C^cHc^Og. A szabad sav R^-értéke körülbelül 0,55 /Kieselgel 60F-254 tipusu, 0,25 mm vastagságú azilikagél-retegen /gyártja a Merck cég/ 95:4:1 térfogatarányu dietileter - metanol - hangyasav eleggyel futtatva/. A szabad sav e-^# tarrolb an- felvetlnrltralholya s pe-fctr uirráb an_'274-_nm=nál~/f= 13 900/ széles abszorpciós sáv jelenik meg. Az M 139 603 jelű uj metabolitot, a megfelelő szabadsavat, valamint a szabad sav egyéb alkálifémekkel képezett sóit a találmány értelmében úgy állítjuk elő, hogy egy M 139 603 metabolitot termelő Streptomyces longisporoflavus törzset vagy e törzs M 139 603 metabolitot termelő variánsát vagy mutánsát, amelyek M 139 603 metabolit-termelő képessége 10 mg-10g/l liter fermentlé, keverés vagy rázás közben, aerob körülmények között, 22 C° £°k£götti hőmérsékleten valamely asszimilálható pott fermentlevet vízzel nem elegyedő szerves oldószerrel extraháljuk, az oldószert lepároljuk, majd kívánt esetben a kapott M 139 603 jelű metabolitot a megfelelő szabad savvá, illetve a szabad savat egyéb alkálifémsóivá alakítjuk. M 139 603 metabolitot termelő Streptomyces longisporoflavus törzsként előnyösen a National Collection of Industrial Bacteria törzsgyűjteményben /Brit Mezőzgadasági, Halászatig és éle Imi szer ügyi Minisztérium, Tof.ry Research Station, 135 Abbey Roa4T-Aberdeen-AB9-8DGT-Nagy^BrjLtannia/.NCIfí-11426 számon ,le^_ tétbe helyezett törzset használjuk fel, amelynek mikrobiológiai jellemzői a következők /a vizsgálatokhoz felhasznált közegeket az International Streptomyces Project /ISP/ előiratai szerint" állítottuk elő /lásd Shirling, E.G. és Gottlieb, D.: International Journal of Systematic Bacteriology 16 HO , 313-340 [_1966]/ és a tenyésztést nappali fényben, körülbelül 25 C°-on végeztük/: ISP 1 táptalaj: /tripton-élesztő, a táptalajhoz agart is adtunk/ 5. nap: gyér, kissé nedves, bársonyos, halvány őzbarna növeke----dés—á&lnk elen-hátnldal LaB,— 13. nap: gyér, bársonyos, kissé szemcsés, halvány őzbarna növekedés színtelen hátoldallal. ISP2 táptalaj /élesztőkivonat/malátakivonat agar/: 5. nap: gyér, bársonyos, halványszürke növekedés igen halvány sárga-őzbarna hatoldallal, 13. nap: jó, kiemelkedő, redős, bársonyos, halványsárga/barna/ szürke növekedés őzbarna hátoldallal. 2
