179148. lajstromszámú szabadalom • Eljárás primicin-bázis, ill ásványi savakkal alkotott sói előállítására
179178 mossuk, szán it.juk. A kapott tennék 6,7 g Primi cin-szulfát Op. 179-82; /biológiai aktivitás: 0,5/Ug/ml /. A 6,7 g terméket 210 ml 10 %-os hangyasavas metanolban melegen oldva 7 S Cellit-aktivszén /2:1/ keverékkel deritve, átkristályositjuk. Az I. generáció 4,7 g; Op. 180-85 °C;Íp(7 20 + 15,9°/ biológiai aktivitás: 0,1 /Ug/ml/. A bepárolt anyaíugot_acetog^ °G&I g 1 Az ösznal kicsapva: 1,4 g II. generációt kapunk; Op. 179-82 + 14,2°: majd ezt ólomacetáttal derítjük: 0,04 /Ug/ml. szes kitermelés: 6,1 g/85 %/. ' 5. példa 150 g zsírtalanított, száraz miceliumot /6,5 % Primicin/ 100 ml 20 % etilén-diamin bázis tartalmú metanollal elkeverve, 3OO ml metanollal 2,5 órán keresztül gőztérben extraháljuk. Az állás közben spontán kivált Primicin bázist szűrjük, 250 ml anyalugját vákuumban szirup sűrűségűre bepároljuk, majd vizben szuszpendálva /1:5/ 10 n kénsavval pH 3»0-ra közömbösítjük és Cellit-545 segédanyaggal szűrjük, 5 %-os metanolos-vizzel mossuk. Az extraktumból kivált bázist és anyalugjából leválasztott Primicin szulfátot 100Ö ml n-butanol-metanol-viz /60:15:25 v/v/ elegyében melegen /50 °C/ oldjuk, a pH 10 n kénsavval 4,0-re állítjuk, végül az oldatot aktivazén-Cellit-545 /2:1/ keverékkel deritjük. A színtelen oldatot 200 ml viz hozzáadásával telitve, az etilén-diaminszulfáttartalmu alsó fázist leválasztjuk.A felső fázist további 5x100 ml vízzel kirázva mossuk, amig salétromsavval savanyítva báriumkloriddal már nem ad szulfation reak- " ciót, végül vákuumban fele térfogatra besűrítjük. A kivált Primicin-szulfátot /3,4 g/ szűrjük ésnacetonnal szuszpendálva mossuk, szárítjuk. Op. 175-83 + 153° /biológiai aktivitás 0.05/Ug/ml/. Az anyalugból további: mennyiségű /0,6 g/ szulfát sót állíthatunk elő, aminek Op.-ja 143-150 ÖC. 4. példa 100 g kénsavval leválasztott száraz micelium tömeget a 2. példa szerint 150 ml 10 %-os hangyasavas metanollal 30 percig feltárunk, majd 2 órán keresztül 150 ml metanollal gőztérben extraháljuk. A maradék 86 g micelium 1 % alatti aktivitású. A kapott 150 ml extraktumból 5f0 ç I. generációs nyersanyag spontán válik ki, anyalugját 1/3-ara párolva acetonnal további 4,0 g II. generációs nyersanyagot izolálunk. Az összesített 9 g Primicin szulfátot 60 ml 5 %-os metanolos vízzel szuszpendálva, folyamatosan keverve mossuk, majd 300 ml butanol-metanol-viz oldószerben /60:15:25 v/v/ 60 °G hőmérsékleten oldjuk. A vörös-sárgás oldatot 45 ml nedves Dowex-lx-2 /OH" ciklus/ anioncserélővei 1/2 órát keverjük, amikor az oldat világos sárga szinüplesz és a minta salétromsavval savanyítva bárium-kloriddal S Of?“ reakciót nem ad. Ezt követően az oldatot 9 S Cellit-aktivszen /2:1/ keveréken átszűrjük és 300 ml 3 %-os konyhasóoldattal két fázisra bontjuk, a 210 ml felső fázist csökkentett nyomásnál 1/3-ára besűrítjük, és az 5»2 g Primicin bázist szűrjük: Op. 175-82 °C;/p£7 20 + 14,2 /és biológiai aktivitása 0,1/ug/ml, forró metanolból átkrlstályositva: 0,04 ^ug/rnl/. 5. példa 0,1 g, a 4. példa szerint előállított primicin-bázist 25 ml 1:1 arányú metanol-jégé cet el'egyben oldunk, majd poten-5
