179147. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sziszomicin előállítására fermentléből
179147 7. példa A Micromonospora danubiens is /MEG 171/ törzzsel előállított 10 liter térfogatú, 4-10 /Ug/ml biológiai aktivitású fermentlevet a 2. példában leirt'módon feldolgozzuk. A kalcium-mentesitett szürletet V/of at it CP-500 kationcserélő gyantaoszlopon folyatjuk át, majd a gyantáról leoldott sziszomicint Amberlite CG-50-I kationcserélő gyantaoszlopon tisztítjuk. A tisztítás eredményeként kapott, sziszomicint tartalmazó frakciókat egyesitjük, majd a sziszomicin oldathoz kevertetés közben 15,5 S szilárd pamoinsavat adunk. Miután a pamoinsav feloldódott, az oldat pH-ját 5 n kénsav oldattal 5,5-6-os értékre állítjuk be. A továbbiakban 6. példában leírtak szerint járunk el, s igy 2,89 g sziszomicin-szulfátot kapunk. 8. példa Micromonospora rosea /MEG 182/ törzzsel előállított 10 liter térfogatú, 400 /Ug/ml biológiai aktivitású fermentléhez 500 g nátrium-szulfátot adagolunk keverés közben. Miután a só feloldódott, a fermentlé pH-ját lOn kénsav-oldattál keverés közben 2-re állítjuk be. A savas fermentlét 50 percig keverjük, majd leszűrjük. A továbbiakban az 1. példában leirtak szerint végezzük a feldolgozást, s igy 2,05 g sziszomicin bázist kapunk. 9. példa Micromonospora danubiens is /MEG 171/ törzzsel előállított 10 liter térfogatú, 410 ug/ml biológiai aktivitású fermentlé pH-ját 5b nátrium-hidroxid oldattal keverés közben 9»5-re állítjuk be. A lúgos fermentlét 50 percig keverjük, majd leszűrjük. A továbbiakban a 4. példában leirtak szerint végezzük a feldolgozást, s igy 2,15 g sziszomicin bázist kapunk. Szabadalmi igénypontok 1. Eljárás gyógyászati tisztaságú sziszomicin bázis és farmakológiailag elfogadható szervetlen savakkal képezett sói előállítására sziszomicint termelő Micromonospora fajok, előnyösen a Micromonospora danubiens is /MEG 171/ vagy a Micromonoa— pora rosea /MEG 182/. törzseivel előállított fermentlevekből a micéliumot tartalmazó fermentlé szűrésével, a szürletből kívánt esetben a kalcium-ionok leválasztásával, majd az antibiotikum kationcserélő oszlopon való megkötésével és azt követő elucióval és az igy kapott nyers termék krómatografálásával és kívánt esetben azt követő sóképzéssel, azzal jellemezve, hogy a fermentléhez a szűrés előtt egy vagy több alkálifém- vagy ammóniumsót és/vagy bázist adunk és a kationGserélő oszlopról kapott sziszomicin bázis tartalmú eluátumot vagy kívánt esetben a kipreparált és feloldott sziszomicin bázist ismét kationcserélő gyantára visszük, majd a gyantáiról a kisérő antibiotikumokat 0,05-0,12 n, előnyösen 0,1 n koncentrációjú ammónium-hidroxid oldattal leoldjuk, azután 0,18-0,25 n. előnyösen 0,2 n koncentrációjú ammóniumhidroxid oldattal elualjuk a sziszomicin bázisé, a kapott eluátumból kivámt esetben a vizet eltávolítjuk, ki— vánt esetben á sziszomicin bázist pamoinsavval^vagy alkálifémvagy ammóaiap—pamoáttal való reagáltatás után önmagában ismert 9
