179147. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sziszomicin előállítására fermentléből
179147 Báj: a fenti eljárás nem alkalmaz szerves oldószereket igénylő kromatográfiát, a sziszomioin előállítása szempontjából hátrányos, hogy az izolálás során a mikroorganizmus sejtjeit savas körülmények között szűrik le. Ez az antibiotikum-komplexben jelenlevő sziszomioin egy számottevő részének elvesztéséhez vezet, a sziszomioin erős sejthez való kötődése folytán. Előnytelen továbbá, hogy a nyerstermékből kationcserélő oszlopon való egyszeri krómatografálássál nem nyerhető ki egységesen a sziszomicin, hanem még egy dextrángêl-osz1opon végzett kromatográfia is szükséges a tiszta sziszomioin bázis előállításához. A találmány oélja olyan eljárás kidolgozása, amely lehetővé teszi, hogy a s z'■ szomicint egyszerűen kivitelezhető módon, veszteség nélkül, gyógyászati felhasználásra alkalmas tisztaságban nyerjük ki a fermentléből. A találmány azon a felismerésen alapul, hogy a sziszomioin más aminoglükozid antibiotikumoknál /gentamicin, tobramicin/ erősebben kötődik a termelő mikroorganizmus sejtjeihez és csak kis részben kerül a sejtekről a tápoldatba. Jelentős mérvű a szí szomicin kötődése a mikroorganizmus sejtjeihez a megsavanyitott fermentlében is. Meglepő módon azt tapasztaltuk, hogy ha alkálifém- vagy ammónium-sókat és/vagy bázisokat adagolunk a fermentléhez, a sziszomicin a mikroorganizmus sejtjeiről a tápoldatba kerül, igy a fermentlé leszűrésével a mikroorganizmus sejtjei, jelentős szi— szomicin veszteség nélkül, eltávolithatók. Megfigyelésünket az alábbi táblázat adataival szemléltetjük: Vizsgált oldat: Biológiai aktivitás2 sziszomicin bázis standardra vonatkoztatva //Ug/ml/ Micromonospora Micromonospora danubiens is rosea MEG—171 MNG—182 Eredeti fermentlé pH 2-re állított fermentlé szürlete pH 7-re állított fermentlé szürlete 5% nátrium-kloriddal kiegészített, pH 2-re állított fermentlé szürlete 10% nátrium-kloriddal kiegészített, pH 2-re állított fermentle szürlete 5% kálium-kloriddal kiegészített, pH 2-re állitott fermentlé szürlete 5% kálium-kloriddal kiegészített, pH 2-re állitott fermentlé szürlete 5% nátrium-szulfáttal kiegészített, pH 2-re állitott fermentle szürlete 3% nátrium-szulfáttal kiegészített, pH 2-re állitott fermentlé szürlete $% ammónium-szulfáttal kiegészített, pH 2-re állitott fermentlé szürlete 5% ammónium-szulfáttál kiegészített, pH 2-re állitott fermentlé szürlete 5% ammónium-szulfáttal kiegészített, pH 7-re állitott fermentlé szürlete 420 600 240 348 GO 120 27O 390 29O 420 32O 516 360 550 310 510 380 545 370 520 400 575 390 582 XA fermentlé biológiai aktivitását agar-diffuziós módszerrel Staphylococcus epidermidis mikroorganizmussal mértük*
