179146. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sziszomicin előállítására mikrobiológiai úton, micromonospóra rosea törzs fermentációjával
179.146 minor komponensek/ összes hatékonyságát Staphylooooous epidermidis tesztorganizmussál állapítjuk meg agardiffúziós módszerrel sziszomicin standard anyagra vonatkoztatva. IOO-130 órás fermentációs idő alatt a fermentlé összaktivitása mintegy 600-700 E/ml-t ér el /l E s 1 /ug/ral sziszomioin bázis hatékonyság/. Â ferment lében jelenlévő antibiotikumnak mintegy 85 %-át teszi ki a sziszomioin. À találmány szerinti eljárásban a Mioromonospora rosea törzs által termelt sziszomioin antibiotikum kinyerését ismert módszerekkel oldjuk meg. Â kapott sziszomioin bázisból kívánt esetben farmakológia!lag elfogadható sókat képzünk. À találmány szerinti eljárás jelentős előnyökkel rendelkezik az eddig ismert eljárásokkal szemben. Az eljárás legfőbb előnye, hogy az elért sziszomioin termelési szint laboratóriumi körülmények között meghaladja a 700-800/ug/ml-es szintet, félüzemi 1 m3-es fermentorokban pedig a 600-700 /ug/ml-t. Ez az antibiotikum-koncentráció több mint háromszorosa az eddig legelőnyösebbnek talált, a 3 832 286 sz. Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírásban leirt termelésnek. Ezen túlmenően eljárásunkkal kapott fermentlé a sziszomioin mellett mindössze 15 %-nyi vagy kevesebb kisérő antibiotikumot tartalmaz. A találmány szerinti eljárás foganatosítására az alábbi kivitelezési példákat ismertetjük: 1, példa A Mioromonospora rosea Sl/109 törzs /MNG 00182/ mélyhütve /-20 C°-on/ tárolt vegetativ micéliumának 1 ml-ével /élőosiraszám 10® - 107/ml/ steril körülmények között 3000 ml-es Erlenmeyer-lombikban levő 800 ml steril táptalajt oltunk be, melynek összetétele a következő: Tripton /Oxoid/ 5 g szójállszt lo g oldható keményítő 2o g glükóz 1 g kalciumkarbonát 2 g osapviz looo ml-re. Az elegy pH-ját a sterilezés előtt 7,0-ra állítjuk be. A tenyészetet sikrázógépen /26o fordulat/perc, 10 cm kitérés/ 28 C°-on 3 napig inkubáljuk. Az igy kapott tenyészettel steril körülmények között 100 liter steril táptalajt oltunk be, melynek összetétele a következő: szójaliszt lo g kazein-hidrolizátűm /száraz súly/ 5 g burgonya keményítő 22 g glükóz lo g kalciumkarbonát 2 g pálmaolaj 2 g osapviz looo ml-re, A kazein hidrolízisét pankreatinnal végezzük. A táptalaj pH-ját a sterilezés előtt 7,0-ra állítjuk be. A tenyésztést keverés és levegőztetés közben 3^-48 órán át folytatjuk. A tenyésztés hőfoka 30 C°, a keverés fordulatszáma 400/pero, a levegőztetés 1 térfogat levegő/ 1 térfogat fermentlé percenként. Habzásgátlóként pálmaolajat használunk. A beérett inokulum lo literjét használjuk fel a 100 literes termelőkultúra táptala5
