179145. lajstromszámú szabadalom • Eljárás sziszomicin előállítására mikrobiológiai úton, micromonospora danubiensis-szel
179.145 A tenyészetet sikrázógépen /220 fordulat/perc 7»5 cm kitérés/, 28 C -on 3 napig inkubáljuk. Az igy kapott tenyészettel steril körülmények között 6 liter, steril táptalajt oltunk be /10 literes üvegfermentorban/. A táptalaj összetétele azonos az előbbiekben ismertetett"inokulum-táptalaj" összetételével. Az üvegf* ermentorban a tenyésztést 28 C-on végezzük, 400 f*ordulat/pero kevertetés, és 1 térfogat levegő / 1 térfogat fermentlé peroenkénti levegőztetés mellett. Habzásgáti óként - szükség szerint-pálmaolajat használunk. A 40 óra alatt kifejlődött oltóanyagot használjuk fel a fermentációs táptalaj oltására. Az oltóanyag mennyisége 600 ml, a táptalaj mennyisége 6 liter, pH-ja 7,0-7,2, az üvegf ermentor térfogata lo liter. A táptalaj összetétele a következő: szójaliszt 50,0 g kukoricakeményitő 10,0 g szacharóz 30,0 g kalciumkarbonát 5*0 g kukoricalekvár 5 > 0 g kobaltklorid 4,5 mg osapviz 1000 ml-re. A tenyésztést 31 G°-on végezzük, 400 fordulat/perc kevertetés és 6 l/pero levegőztetés mellett. Habzásgátlóként pálmaolajat alkalmazunk. Az antibiotikum termelés a fermentáció 28-34. órájában indul meg, és a maximális értéket 110 óra fermentálás után éri el. Ekkor a fermentlé összes antibiotikum tartalma sziszomioin standardra vonatkoztatva 440 E/ml, Staphylococcus epidermidis tesztorganizmust használva, agardiffúziós módszerrel meghatározva, /J.S. Simpson: Analytical Microbiology, Aoad. Press, New York, 87-124. oldal, 1963/. 2. példa A Mioromonospora danubiensis JMS-3 /MNG 00171/ törzsnek az 1. példa szerint rázóasztalon előállított vegetativ tenyészetével beoltjuk a következő Összetételű táptalajt: szójaliszt 10,0 g keményítő 10,0 g szacharóz 10,0 g kaloiumkarbonát 4,0 g} csapviz 1000 ml. A táptalaj pH-ja sterilezés után 7»0-7,2 mennyisége 6 liter /10 literes üvegfermentorban/. A tenyésztést 31 C-on végezzük, 400 fordulat/perc kevertetés, és 6 l/pero levegőztetés mellett. Habzásgát lóként - szükség szerint - pálmaolajat használunk. A 36 óra alatt kifejlődött oltóanyag 600 ml-ét használjuk fel az alábbi összetételű fermentációs táptalaj oltásához: szójaliszt kukoricái!sz t kalo iumkarboná t kobaltklorid osapviz 30.0 g 25.0 g 5,0 g 10.0 mg 1000 ml-re. A táptalaj pH-ja sterilezés után 7,0-7,2. A tenyésztés hőfoka 33 C , a keverő fordulatszáma 600 fordulat/perc, a levegőztetés 6 liter/pero. A habzásgátlás pálmaolajjal történik. Az antibiotikum termelés a fermentáció 26-30.órája között indul meg, s a maximális értéket a fermentáció 100.órájára éri el. Ekkor a fermentló összes antibiotikum tartalma sziszomioin standardra vonatkoztatva 420 E/ml. 3. példa 6
