179054. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-dezoxisztreptamin- aminoglikozidok előállítására
11 179054 12 1 -N-(2,3 ,-dihidroxi-2-hidroximetilpropil) kanamicin B A 11. példában leírt módon dolgozunk, de kiindulási anyagként DL-2-hidroximetil-2,3,-0- izopropilidén-gliceraldehidet alkalmazunk. Rf = 0,55 3 mólos nátriumklorid-oldatban (kanamicin B Rf értéke 0,42). m/e (deszorpció terén) M+l talált 588. C22H45N5O13 M + L számított = 588. 16. példa 17. példa l-N-[(R)2,3-dihidroxipropil]kanamicin B A 11. példában leírt módon járunk el, de kiindulási anyagként L-gliceraldehidet használunk. Vékonyrétegkromatográfiásan vizsgálva, a termék megegyezik a 11. példa szerinti vegyülettel. 18. példa 1 -N-[ 1,3-dihidroxi-2-propil]kanamicin A 200 mg (0,36 mmól) 3,3”,6’-tri-N-formil-kanamidn A vegyületet, 95 mg (1,05 mmól) dihidroxiacetont és 88 mg (1,40 mmól) nátriumrianobórhidridet feloldunk 20 ml metanol és 4 ml víz elegyében, majd az oldat pH-ját 5 n hidrogénklorid-oldattal 6,6-ra állítjuk be. Az oldatot ezután 22 óra hosszat visszafolyatás közben melegítjük, majd további 95 mg dihidroxiacetont és 88 mg nátriumdanobórhidridet adunk hozzá és az elegy pH-ját 5,5-re állítjuk. Az elegyet ezután 24 óra hosszat visszafolyatás közben melegítjük és az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. A maradékot 20 ml 6,0 pH-jú 10%-os hidrazinhidráttal kezeljük ecetsavas közegben és újabb 6 óra hosszat melegítjük visszafolyató hűtő alatt. Az elegyet ezt követően csökkentett nyomáson betöményítjük és a maradékot Amberlite CG-50 ioncserélő gyantával (NH^ forma) töltött oszlopon kromatografáljuk, az eluálást 0-tól 0,1 n-ig terjedő koncentrációjú ammóniumhidroxid-oldattal végezzük. A terméket tartalmazó frakciókat (vékonyrétegkromatográfiásan kimutatva) egyesítjük, bepároljuk és a terméket ismét kromatografáljuk Sephadex CM25) ammóniumion forma) gyantával töltött oszlopon. Az eluálást az előbbiekben megadott módon végezzük és így 0,11 g (57%) l-N-[l,3-dihidroxi-2-propil]kanamicin A vegyületet kapunk. Rf = 0,40 metanol : 0880 ammóniumhidroxid 2 : 1 arányú elegyében (kanamicin A Rf értéke 0,30). Analízis C21H42N4O13 •2H2CO3 képletre számított: C =40,5%, H =6,8%, N = 8,2%, talált: C =40,6%, H =6,5%, N = 8,4%. l-N-[l,3-dihidroxi-2-propil]kanamicin B 88 mg (1,40 mmól) nátriumdanobórhidridet hozzáadunk 200 mg 2’,3,3”,6’-tetra- N-formil-kanamicin B (0,33 mmól) és 95 mg (1,05 mmól) 12 ml metanol és 3 ml víz elegyével készített oldatához. Az oldat pH-ját 2 n nátriumhidrogénkloriddal 4,5-re állítjuk be és utána az oldatot visszafolyatás közben 20 óra hosszat melegítjük. Az oldószert csökkentett nyomáson betöményítjük és a maradékot 10 ml vízben felvesszük. Az oldathoz 2 ml (60%) hidrazinhidrátot adunk, az oldat pH-ját 2 ml jégecettel 6-ra állítjuk és utána az elegyet 6 óra hosszat visszafolyatás közben melegítjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott gumi-szerű terméket 8 ml vízben oldjuk, az oldat pH-ját 0,2 n hidrogénklorid-oldattal 5,5-re állítjuk be és utána Amberlite CG-50 ioncserélő gyantával (ammónium-ion forma) töltött oszlopon kromatografáljuk. Az eluálást először vízzel, utána pedig 0,25 n koncentrációig növekvő ammóniumhidroxid-oldattal végezzük. A terméket tartalmazó frakciókat (vékonyrétegkromatográfiásan kimutatva) egyesítjük, bepároljuk és Sephadex CM25 (ammónium-ion forma) gyantával töltött oszlopon ismét kromatografáljuk. Az eluálást az előbbiekben megadott módon végezzük és így 59 mg (32%) l-N-[l,3-dihidroxi-2- propiljkanamicin B vegyületet kapunk. Rf = 0,55 metanol : 0,880 ammóniumhidroxid 1 :1 arányú elegyében (kanamicin B Rf értéke 0,47), Rf = 0,37 2 mólos nátriumkloridoldatkan (kanamicin B Rf értéke 0,26). Analízis C21H43NsOj2 *3H2C03 -í^C) számított: C =37,8%, H =6,8%, N = 9,2%, talált: C =37,6%, H=6,3%, N = 9,2%. 19. példa 20. példa l-N-{l-hidroxi-2-propil]kanamicin B 200 mg (0,36 mmól) 2’,3,3”,6’-tetra-N-formil-kanamicin B, 78 mg (1,05 mmól) hidroxiaceton és 88 mg (1,40 mmól) nátriumcianobórhidrid vegyületeket feloldunk 20 ml metanol és 4 ml víz elegyében, majd az oldat pH-ját 5 n hidrogénklorid-oldattal 6,0-ra állítjuk be. Az oldatot ezután 22 óra hoszszat visszafolyatás közben melegítjük. Ezután további 23 mg hidroxiacetont és 30 mg nátriumcianobórhidridet adunk az oldathoz és a visszafolyatás közbeni melegítést további 24 óráig folytatjuk. Az oldószert ezután csökkentett nyomáson eltávolítjuk és a maradékot 20 ml 10%-os vizes hidrazinhidráttal kezeljük, a hidrazinhidrát pH-ját jégecettel 6-ra állítjuk be. Az elegyet csökkentett nyomáson betöményítjük és a maradékot Amberlite CG—50 ioncserélő gyantával (NH4 forma) töltött oszlopon kromatografáljuk, az eluálást növekvő koncentrációjú, 0—0,1 n töménységű, ammóniumhidroxid-oldattal 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
