179013. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az A-35512 antibiotikum-keverék előállítására
17 179013 18 No. PPM Magasság (%) 1 187,8 37,2 2 172,0 40,9 3 170,7 45,2 4 170,1 46,9 5 169,6 47,7 6 168,4 57,6 7 166,7 52,5 8 157,4 49,9 9 156,6 45,5 10 155,7 55,8 11 155,6 71,5 12 155,4 56,7 13 154,5 50,5 14 149,3 43,0 15 138,8 38,8 16 136,9 54,3 17 136,3 40,2 18 135,2 31,7 19 134,7 28,4 20 133,8 40,9 21 128,2 102,9 22 126,2 77,2 23 123,0 57,5 24 121,3 38,1 25 117,7 44,4 26 117,0 31,5 27 108,6 31,0 28 106,7 47,9 29 105,7 81,2 30 103,2 26,5 31 93,6 33,4 32 74,9 39,8 33 71,8 33,9 34 68,9 40,2 35 63,2 43,1 36 60,4 33,6 37 57,1 57,8 38 55,2 33,1 39 53,2 30,1 40 51,8 36,0 41 40,7 43,4+ 42 39,9 60,9+ 43 39,1 43,9* 44 23,8 55,7 45 17,1 47,8 46 0,0 43,7 +Dimetil-szulfoxid-d6 AC13 mágneses magrezonancia spektrum szerint az A-35 512 B ágiikon változatlanul tartalmazza a 3 - a m ino-2,3,6-tridezoxi-3-C-metil-L-xilo-hexopiranóz csoportot (az A—35 512 B komponensben jelenlevő egyik cukor). Az A-35 512 B ágiikon hidrogénklorid só savas hidrolízissel végzett aminosav-analízise szerint a vegyidet glicint és legalább három komplex aminosavat tartalmaz. Ezen aminosavak egyikének szerkezetét a II képletben adjuk meg. Az A—35 512 B ágiikon hidrogénklorid sójában legalább egy észterképzésre képes hidroxilcsoport van jelen. Az A—35 512 B ágiikon hidrogénklorid sója vízben és metanolban oldódik, de oldhatatlan kevésbé poláros szerves oldószerekben, mint például benzolban, kloroformban, acetonban, dietil-éterben, etilacetátban, toluolban, hexánban, acetonitrilben és dioxánban. Az A-35 512 B ágiikon hidrogénklorid sójának Rf-értéke cellulóz vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatkor, a futtatást 1-butanol : piridin : ecetsav : víz 15 :10 :3 : 12 arányú elegyében végezve: 0,80. A kimutatást előnyösen bioautográfiával, Sarcina lutea tesztorganizmussal végezzük. Az A—33 512 B ágiikon hidrogénklorid sójának Rf-értéke szilikagél vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatkor, a futtatást metanol : kloroform : koncentrált NH4OH 3:2:1 arányú elegyével végezve 0,26. Az A-35 512 B ágiikon szabad bázis alakban fehér színű, amorf anyag, amelynek közelítő százalékos elemösszetétele (átlagos) a következő: szén:52,65%, hidrogén: 4,57%, nitrogén: 6,91%, klór: 2,94%, oxigén: 27,04%, (hamu: 4,70%). Az A—35 512 B ágiikon szabad bázis alakjának KBr tablettában vizsgált infravörös abszorpciós spektrumában a következő frekvenciákon (cm'f) találunk jelentős elnyelési maximumokat: 3 360 (erős), 3 260 (vállas), 2 940 (vállas), 1 735 (vállas), 1 660 (erős), 1 598 (közepes), 1 510 (erős), 1 440 (közepes), 1 295 (gyenge), 1 215 (közepes), 1 165 (közepes), 1 122 (gyenge), 1 070 (gyenge), 1 018 (erős), 940 (gyenge), 920 gyenge). Az A—35 512 B aglikonjának (szabad bázis) 66%-os vizes dimetil-formamidban végzett elektrometrikus bírálása szerint a vegyületben öt, 6,2, 8,2, 10,1, 11,4 és 12,4 pKa-értékekkel jellemezhető bírálható csoport van jelen, ezen felül lehetséges egy vagy két további, 12,5-nél nagyobb pKa-értékű csoport jelenléte is. Az A—35 512 B ágiikon (szabad bázis) a következő fajlagos forgatással rendelkezik: [a]pS: —64,5° (konc.: 3, dimetilszulfoxid). Az A—35 512 B ágiikon (szabad bázis) ultraibolya abszorpciós spektrumában, a vizsgálatot semleges és savas metanolban végezve, a 282 nm hullámhosszán 43,65) és a vizsgálatot bázikus metanolban végezve 301 nm hullámhosszon (E}^m: 67,46) találunk abszorpciós maximumot. Az A—35 512 B ágiikon (szabad bázis) Rf-értékei azonosak az A—35 512 B ágiikon hidrogénklorid sójának értékeivel. Az egyes A—35 512 komponensek és az A-35 512 B ágiikon szabad bázis és hidrogénkloridos alakján kívül a találmány szerinti eljárással más, gyógyászati szempontból elfogadható savaddiciós sókat is előállíthatunk az A-35 512 antibiotikum-keverék A, B, C, E, H komponenseiből és a B komponens aglikonjából. Gyógyászati szempontból elfogadható sók alatt olyan sókat értünk, amelyek toxicitása a melegvérű állatokkal szemben nem nagyobb, mint a szabad bázis alaké. Az A-35 512 A, 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
