178837. lajstromszámú szabadalom • Eljárás glükóz izemeráz enzim előállítására
178837 MAGYAR NÉPKÖZTARSASAG SZABADALMI LEÍRÁS országos találmányi HIVATAL Bejelentés napja: 1980. II. 14. (334/80) Olaszországi elsőbbsége: 1979. II. 15. (20212 A/79 sz.) Nemzetközi osztályozás: C 12 D 13/10, C 13 K 1/00 Közzététel napja: 1981. IX. 28. Megjelent: 1983. VII. 30. t I Feltalálók: Szabadalmas: Olivieri Roberto vegyész, Mentana/Róma, Fascetti Eugenio vegyész, Róma, E. N. I ENTE NAZIONALE Angelini Leonello vegyész, Monterotondó/Róma, Degen Ludwig vegyész Róma, • IDROCARBURI, Róma, Olaszország Olaszország Eljárás glükóz izorneráz enzim előállítására 1 A találmány glükóz izorneráz enzim előállítására alkalmas eljárásra vonatkozik. A glükóz izorneráz enzimet az Agrobacterium nemzetség mikroorganizmusainak felhasználásával állítjuk elő. 5 Ismeretes, hogy glükóznak fruktózzá történő enzimes izomer átalakításakor glükóz izomerázt (D-xilóz-ketol-izomeráz E. C. 5.3.1.5.) adnak glükóz-oldathoz, például gabona (kukorica) sűrítményhez és a reakciókörülményeket úgy szabályozzák, hogy a 10 glükóz egy része fruktózzá alakul. A fruktózzá alakult glükóz mennyisége az egyensúlyi állandó függvénye, amely 60 °C-on 1,08. Számos korábbi irodalmi helyen ismertetnek módszereket glükóznak olyan sűrítményekké való 15 alakítására, amelyek glükózt és fruktózt tartalmaznak. E módszerek a Pseudomonas, Lactobacillus, Escherichia, Aerobacter, Arthrobacter, Bacillus, Streptomyces és más nemzetségekhez tartozó mikroorganizmusok aktivitását hasznosítják (3 813 318. 20 3 813 320 és 3 879 261 számú Amerikai Egyesült Államok-beli szabadalmi leírások). Azt találtuk, hogy az Agrobacterium nemzetség mikroorganizmusai, amelyeket mindezídeig nem ír- 25 tak le, képesek olyan glükóz izorneráz enzim termelésére, amelyek a glükóz izomer átalakulását katalizálják, ha azt megfelelő táptalajon tenyésztjük. Ezek az NRRL B 11394 és NRRL B 11291 mikroorganizmusok - amelyeket termő talajból izolál- 30 tunk - a következő morfológiai és biokémiai jellemzőkkel rendelkeznek. Mikroszkópos morfológia Egyesével, néha párosával előforduló Gram-negatív 1,5-2,0 * 08 /un méretű pálcika alakú, tok és anélküli 4—6 peritrich ostorral mozgó mikroorganizmusok. Makroszkópos morfológia A telepek fejlődése agar-táptalajon (Difco): plátó-szerű, ép szélű, krémszínű, átlátszó 0,5-1 mm sima felületű és átmérőjű. Kiadós fejlődés, kalcium glicerin-foszfát-mannitol-nitrát táptalajon, barna színe eltűnik és halogének képződnek. Biokémiai tulajdonságok Fejlődés 4 °C-39 °C hőmérsékleten valamennyi egyszerű laboratóriumi táptalajon, tápértékét kiegészítő elemek és aminosavak nélkül, vagy NfQ-t N03-ot vagy aminosavakat használunk nitrogénforrásként. Oxidáz: pozitív (N. Kovács, 1956, Nature, London 178, 703) Kataláz: pozitív (M. Levine, D. Q. Anderson, 1932, J. Bact. 23, 337-347) Nitrátokból termelt nitritek (C. E. ZoBell, 1932, J. Bact. 24, 273) Nem hidrolizált Tween 80 (G. Sierra, 1957, Antonie van Leeuwenhoek 23, 15-22) 178837
