178782. lajstromszámú szabadalom • Eljárás imino-diecetsav- származék radioaktív fémmel képzett komplexét tartalmazó szcintigráfiás jelzőanyagok előállítására
3 178782 4 szénatomos alkilcsoporttal, előnyösen egy-egy metilcsoporttal. Ezeket a 2,4-diszubsztituált imino-diecetsav származékot tartalmazó szcintigráfiás anyagokat a találmányunk szerinti eljárással úgy állíthatjuk elő, hogy egy diszubsztituált anilinszármazékot egy halogénezőszerrel reagáltatunk, a kapott co-halogén-diszubsztituált anilinszármazékot az imino-diecetsav valamely fémsójával reagáltatjuk, a kapott imino-diecetsav-származékot ismert módon tisztítjuk, sterilizáljuk és felhasználás előtt egy radioaktív fémizotóp steril oldatát adjuk hozzá. Az eljárás egyik előnyös foganatosítási módja a következő. Valamely 2- és 4-helyzetben 1—4 szénatomos alkilcsoporttal szubsztituált - a szubsztituensek előnyösen metilcsoportok — anilinszármazékokat ecetsavban oldunk szobahőmérsékleten, majd intenzív keverés közben klóracetil-kloridot adunk az oldathoz, és néhány óra hosszat 4 °C hőmérsékleten tartjuk. A reakcióelegyet ezután jeges vízbe öntjük, a csapadékot alkoholból kristályosítjuk, majd az utólag kristályosodó bázisokat vízben oldjuk, így összesen 80—82% anyagot nyerünk. A kapott to-klór-acetanilidet híg alkoholban oldjuk és imino-diecetsav-nátriumsót adunk az oldathoz. Az elegyet néhány óra hosszat visszafolyó hűtő alatt melegítjük, majd az oldószert lepároljuk, a szárazanyagot vízben oldjuk, a nem-reagált kiindulási anyagokat elválasztjuk és a visszamaradt vizes oldat pH-ját 2,5 körüli értékre állítjuk be. A kivált csapadékot abszolút etanolban oldjuk, a nem-reagált kiindulási anyagokat elválasztjuk, és az oldószer lepárlása után az imino-diecetsav-származékot körülbelül 2,5 pH-jú vizes oldatból kristályosítjuk. A kitermelés 25—35%. Az így előállított imino-diecetsav-származékot feloldjuk vízben, adott esetben sósavas ón(II)-klorid oldatot adva hozzá és az oldat pH-ját az alkalmazott kelátképző radioaktív fém minőségétől függően 4 és 6 közé állítjuk be. Ezután az oldatot steril szűrőn szűrjük, fagyasztva szárítjuk és nitrogénatmoszférában vagy vákuumban lezárt ampullákban tárol juk. Az intravénás beadás előtt legalább egy fél órával steril pertechnetát ("Te) oldatot vagy más radioaktív fémizotóp oldatát adjuk az imino-diecetsav-származékhoz. Az így előállított szcintigráfiás anyag 24 óráig hatékony. összefoglalva a találmány szerinti eljárással előállított szcintigráfiás jelzőanyag előnyei az ismert szcintigráfiás jelzőanyagokkal összehasonlítva a következők:- az ismert jelzőanyagok 6 órás hatékonyságával szemben a találmányunk szerinti eljárással előállított jelzőanyag 24 óra hosszat hatásos,- a találmányunk szerinti eljárással előállított jelzőanyag szcintigráfiás tulajdonságai sokkal jobbak az ismert jelzőanyagokénál, diagnosztikai alkalmazása során a beteg szerveiről nyert kép élessége többszöröse az ismert szcintigráfiás anyagok alkalmazása esetén kapotténak, és ezért a kép sokkal jobban értékelhető, diagnosztikai értéke sokkal nagyobb. A találmány szerinti megoldást a következő példákkal kívánjuk szemléltetni az oltalmi kör korlátozásának szándéka nélkül. 1. példa 0,12 mól 2,4-dimetil-anilint ecetsavban oldunk és az oldathoz szobahőmérsékleten hozzáadunk 0,13 mól klóracetil-kloridot, majd az elegyet 5-10 percig intenzíven keveijük. A reakcióelegyet 3-4 óra hosszat 4°C hőmérsékleten tartjuk, majd jeges vízbe öntjük. A csapadékot vízzel extraháljuk és etanolból kristályosítjuk. További csapadékot nyerünk úgy, hogy az utólag kristályosodó bázisokat vízben oldjuk, összesen 19,5 g (82%) anyagot kapunk. 40 mól, a fent leírt módon előállított co-klór-2,4-dimetil-acetanilidet és 40 mól imino-diecetsav-nátriumsót feloldunk 250 ml hígított etanolban. A víz : etanol térfogatarány 1 :1,2. Az elegyet vízfürdőn melegítjük 6 óra hosszat visszafolyó hűtő alatt. Az oldószer lepárlása után a száraz maradékot vízben oldjuk, a nem-reagált kiindulási anyagokat elválasztjuk és a vizes oldat pH-ját sósavval 2,5 körüli értékre állítjuk. A leülepedett csapadékot abszolút etanolban oldjuk és az oldószer eltávolítása után az imino-diecetsav-származékot vízből kristályosítjuk. A kitermelés körülbelül 30%. Ezután 1 mg, a leírt módon kapott N-(2,4-dimetil-fenil-karbamoil-metil)-imino-diecetsavat feloldunk 1 ml 0,1 n nátrium-hi droxidban, az oldat pH-értékét 5,5-re állítjuk, majd az oldathoz 0,02 mg ón(II)-klorid 1 n sósavval készített oldatát adjuk. Az így kapott oldat pH-ját 0,1 n nátrium-hidroxiddal körülbelül 4-re állítjuk be. Keverés és 15 percig tartó inkubálás után 0,5 ml 1 mCi aktivitású pertechnátot adunk az oldathoz. Azt, hogy a kapott kelát mennyi ideig hatásos, nagynyomású papírelektroforézissel állapítjuk meg, az értékelést Packard radiokromatográfiás detektálással végezve. Biológiai és szcintigráfiás vizsgálatok céljára 10—10 mg N-(2,4-dimetil-fenil-karbamoil-metil)-imino-diecetsavat tartalmazó mintákat állítunk elő, és mindegyikhez 0,2 mg ón(II)-klorid 1 n sósavval készített oldatát adjuk, az oldatokat steril szűrőn szűrjük, fagyasztva szárítjuk és 4 C hőmérsékleten, nitrogénatmoszférában lezárt steril ampullában tároljuk. 2. példa 40 millimól 2,4-dietil-anilint jégecetben oldunk és az oldathoz 44 millimól klór-acetil-kloridot adunk szobahőmérsékleten, intenzív keverés közben, körülbelül 20 perc alatt. A reakcióelegyet 4°C hőmérsékleten tartjuk 3 óra hosszat, majd jeges vízbe öntjük. A csapadékot elkülönítjük és etanolból kristályosítjuk. További csapadékot nyerünk úgy, hogy az utólag kristályosodó bázisokat vízben oldjuk, összesen 78% kitermeléssel kapjuk az cu-klór-2,4-dietil-acetanilidet. 2,3 g co-klór-2,4-dietil-acetanilidet és 1,8 g imino-diecetsav-nátriumsót feloldunk etanol és víz 2 :1 arányú elegyében, és az oldatot vissza£olyatás köz5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
