178736. lajstromszámú szabadalom • Spermahígítószer gazdasági állatok, előnyösen sertés mesterséges termékenyítéséhez
5 178736 6 adunk. Még jobb hatás érhető el, ha a spermát hígítószerrel is hígítjuk, ugyanis így egy adott menynyiségű spermát felhasználva több termékenyítő dózist lehet előállítani. A hígítószer különböző puí fer-oldatokból állhat, ezenkívül olyan adalékanyago- 5 kát is tartalmazhat, amelyek a dózisok lehűtésénél illetve mélyhűtésénél fellépő hőmérsékleti sokk-hatást csökkentik. A hígítószer tartalmazhat továbbá antibiotikumokat, tápfolyadékot, stb. A hígítószer alapja például tojássárgája, lefölözött vagy liofilizált 1° tej, stb. lehet. Arra a felismerésre jutottunk, hogy a spermahígító szerhez például fehérvérsejt formájában lehet megfelelő antigént hozzáadni. Teljes vért azért nem lehet alkalmazni itt, mivel a vörösvértestek a spermiumok körül kicsapódnak és azokat inaktivál-15 ják. Alkalmazni lehet még lymphocitákat is. További felismerésünk, hogy az antigénként alkalmazott fehérvérsejteket vagy lymphocitákat előnyösen más fajtájú egyedektől illetve idegen sejtekből is 20 lehet venni, beleértve különböző mikroorganizmusokat és szövetkultúrákból vett sejteket. A találmány elé kitűzött feladatot a fentiek alapján tehát olyan, gazdasági állatok, főleg sertés mes-25 terséges termékenyítéséhez használható, pufferanyag, táptalaj, emulgeálószer és más, önmagában ismert hatásjavító szer alapú spermahígítószer létrehozásával oldottuk meg, amely celluláris antigéneket tartalmaz. 30 A celluláris antigének előnyös fehérvérsejtek vagy lymphociták. Az antigéneket a természetes vagy mesterséges termékenyítés előtt vagy után a hüvelybe és/vagy a méhbe is be lehet juttatni. 35 Az alábbiakban a találmány szerinti spermahígítószer alkalmazására mutatunk be példákat. 1. Példa 40 1. 73 norvég zsírsertés emse választási malacot vásároltunk, amelyek körülbelül 20 kg-os súlyúak voltak (178 tavaszán). 2. A 2. ivarzáskor az emse malacokat három 45 csoportra osztottuk: A) az emsék 1/3 részét a szokásos módon termékenyítettük (kontroll csoport). B) az emsék 1/3 részét olyan spermával terméke- 50 nyítettük, amelyhez celluláris antigéneket (fehérvérsejteket) adtunk, és a fehérvérsejteket ugyanattól a kantól vettük, amely a termékenyítéshez használt spermát szolgáltatta. C) az emsék 1/3 részét olyan spermával terméke- 55 nyítettük meg, amelyhez celluláris antigéneket (fehérvérsejteket) adtunk, amelyeket egy másik fajtájú kantól (yorkshire) vettünk. 3. 4-5 héttel a mesterséges termékenyítés után 60 az emséket levágtuk, és a következőket vizsgáltuk:- a sárgatestek számát, — a normális (élő) magzatok számát, — a halott magzatok számát és végül- a magzatok méretét. 65 4. A magzatokat konzerváltuk, hogy később a nemek arányát és az embrió állapotban bekövetkezett halál okait meghatározzuk. A kísérlet során kapott eredményeket az alábbiakban lehet összegezni:- Ha celluláris antigéneket adtunk a spermához, az egy ellésre született utódok száma (az alom nagysága) lényegesen nagyobb lett, mint azokban az esetekben, amikor a szokásos sperma-dózist használtuk.- Antigéneket adva a spermához az alom nagysága 12%-kal nőtt.- Annak valószínűsége, hogy a megfigyelt különbség oka a véletlenszerű variáció, kisebb volt 2,5%-nál. A vizsgálat eredményeit átlagolva az alábbi eredményeket kaptuk: Csoport Állatok száma Normális magzatok száma a sárgatestek számának %-ában Relatív számok A kontroll 26 72,57% 100 B 25 83,24% 114,7 C 21 81,88% 112,9 A normális magzatok számaránya a kontroll csoportban az általános tapasztalatoknak megfelelő volt, a B és C csoportokban viszont ez az arány a szokásosnál sokkal magasabb volt. A bíztató eredmények igazolására 68 emsét (1979 tavaszán) 3 csoportra osztottunk és termékenyítettünk: A) kontroll csoport, a szokásos módon termékenyítve, B) a termékenyítéshez használt spermát antigénekkel kevertük, és az antigéneket olyan formában állítottuk elő, hogy a yorkshire sertések fehérvérsejtjeit folyadék alakban egybegyűjtöttük. C) A termékenyítéshez használt sperma vegyítésére az antigéneket norvég vöröstarka szarvasmarhákból nyertük. A fogamzási arányt a fentiekben ismertetett módon határoztuk meg. Normális magzatok Csoport Állatok száma a Relatív száma sárgatestek számok számának %-ában A kontroll 25 68 B 22 79 C 22 77 Ezen vizsgálat eredményei igazolják a korábban kapott eredményeket. A két vizsgálat variancia-analízisével az alábbi eredményeket kapjuk: 100 116 113 3
