178559. lajstromszámú szabadalom • Eljárás Polyporus Genus-hoz tartozó gombák micéliumának előállítására
5 178559 6 Ipari méretekben végzett tenyésztéshez oltóanyagot úgy készítünk, hogy először egy célszerűen 1 vagy 2 m3 űrtartalmú inokulátort még üresen kimosunk és sterilizálunk, majd össztérfogatának 80%-áig feltöltjük az előzőekben már ismertetett összetételű, 5 melasztartalmú táptalajjal. A táptalajt egyébként alkalmas keverőtartályban készítjük el forralás közben, majd sterilizáló oszlopokban sterilizáljuk és hűtőoszlopokban lehűtjük. A táptalajt már tartalmazó inokulátor oltását steril körülmények között a 10 fentiekben ismertetett Erlenmeyer-lombikok közül ötnek a tartalmával végezzük. Ezután tenyésztést végzünk 26 °C ± 1 °C hőmérsékleten, 6,5 ± 0,5 pH-értéken, 1 m3 táptalajra vonatkoztatva 1 percen belül 0,8 ± 0,2 m3 levegővel levegőztetve, rázatás 15 nélkül és a készülékben 0,5 ± 0,2 atm nyomást biztosítva. A micélium növekedési ideje így 48 óra. Következő I műveletként úgynevezett közbenső tenyésztést végzünk. Ehhez 15—20 m3 térfogatú fér- 20 mentort használunk, amelyet még üresen kimosunk és sterilizálunk. Ezután feltöltjük olyan, mdasztartalmú táptalajjal, amelyet előzetesen sterilizáltunk és lehűtöttünk. A berendezés hasznosítható térfogata 80% (ezt a táptalaj és az oltóanyag együttesen 25 töltheti ki). A fermentort az inokulátorból elvett, steril vezetéken át betáplált micéliummal oltjuk be. A fermentorban a micélium növekedési ideje 24 óra. 30 Ezután ipari méretű tenyésztést végzünk. Ehhez 50—100 m3 vagy még ennél is nagyobb űrméretű fermentort használunk, amelyet még üresen kimosunk és sterilizálunk, majd melasztartalmú táptalajjal feltöltjük. A táptalaj mennyiségét úgy választjuk 35 meg, hogy a fermentor űrtartalmának legfeljebb 80%-áig legyen feltöltve a táptalaj és a közbenső tenyésztéshez használt fermentorból vett oltóanyag által. A közbenső fermentorból előzetesen sterilizált vezetéken át tápláljuk be a micéliumot a nagy fér- 40 mentorba. Az utóbbiban az alábbi technológiai paramétereket tartjuk: 26 ± 1 °C, 6,5 ± 0,5 pH, 1 m3 táptalajra percenként 0,8 ± 0,2 m3 levegő rázatás nélkül, nyomás 0,5 ± 0,2 atm. A micélium növekedési ideje az alkalmazott oltóanyag mennyiségétől 45 függ. Ha aránya a táptalajra vonatkoztatva 1 : 10, akkor a növekedési idő 24 óra. Miután a micélium növekedése teljesen befejeződött, a fermentor tartalmának felét szűrésre továbbítjuk, míg a másik felét visszatartjuk oltóanyagként. A fermentort ezután 50 feltöltjük friss táptalajjal, így az oltóanyagnak a táptalajra vonatkoztatott mennyiségét 1 : 1 arányértékre állítjuk be. Ebben az esetben az előbb emített technológiai paramétereket tartva a micélium teljes növekedéséhez szükséges idő 6 ± 1 órára csökken. 55 Ezután megint a fermentor tartalmának felét elvezetjük szűréshez, a fermentorba friss táptalajt nyomatunk és tenyésztünk. Ezt a műveletsort 8 ± 2 napon át folytatjuk, amikor is elölről kezdjük a folyamatot az inokulátorban, majd a közbenső fér- 60 mentorban végzett tenyésztéssel. így 1 liter táptalajra vonatkoztatva 9 ± 1 g gombamicéliumot (szárazanyagtartalomra számítva), illetve 35 ± 5 g gombamicéliumot (28% szárazanyagtartalomra számítva) kapunk. 65 A folyékony fázisból a gombamicélium elkülönítését szűréssel végezzük, éspedig célszerűen szűrőprést, vákuum-dobszűrőt vagy pedig alternatív módon centrifugát használva. Az így elkülönített micéliumot ezután ugyanolyan mennyiségű csapvízzel mossuk, mint amilyen mennyiségű táptalajt így elválasztottunk. A micéliumot ezután szilárd és folyékony fázisra választhatjuk szét. A folyadékfázis a tenyésztési térfogat 70%-át teszi ki. Ez a folyadékfázis természetesen vizes bázisú, emellett számos, a gomba anyagcseréje eredményeképpen képződött vegyületet és ezen belül főleg növényi növekedésre serkentő hatású vegyületeket tartalmaz. A végtermék, azaz a szilárd gombamicélium kétféle formában használható, éspedig úgynevezett sajtolt-friss formában és szárított formában. A sajtolt micélium friss micéliumtömeg, amelynek szárazanyagtartalma 28 ± 1%. Színe szürkésfehér és halványsárga között változik. Jellegzetes illata van, amely illat hasonló a megsavanyodott tésztáéhoz. A micéliumból a sajtolás során rendszerint 5 kg súlyú hasábokat vagy paralelepipedonokat készítünk. Ezeket célszerűen politénfóliába csomagoljuk, majd mélyfagyasztva -18 °C és -23 °C közötti hőmérsékleten tároljuk. így a termék 6 hónapon át tárolható. Szárított micélium kapható például porlasztó szárítóban, hevített levegővel működtetett ventillátoros szárítóban vagy forralt réteges szárítóban 65 ± 5 °C hőmérsékleten végzett szárítás útján. A szárított micélium a szárítás módjától függően durva vagy finom szerkezetű lisztes anyag. Színe fehér és halványsárga között változik. Jellegzetes szaga a porított gombáéra emlékeztet. Rendszerint 25 kg-os, kettősfenekű papírzsákokban tároljuk száraz levegős tárolókban szobahőmérsékleten. Ilyen körülmények között 1 éven át tárolható. A PS 64—103 törzs által termelt gombamicélium biokémiai jellemzői az alábbiak: nyersfehérje 55,8% tiszta fehérje 45% szénhidrátok (cellulóz nélkül) 21% zsírok 3,6% cellulózszerű anyagok 6,4% ásványi tartalom 7,0% tiamin mg/g micélium 18,9 riboflavin mg/g micélium 7x3,0 niacin mg/g micélium 240 holin mg/g micélium 6,0 fehérje-asszimiláció 83% 100 g termék hőértéke 340,16 kalória A PS 64—103 törzs által termelt gombamicélium aminosav-összetételét marhahús, kazein, szójababliszt és a FAO (az ENSZ szakosított mezőgazdasági szerve) által szabványosított fehérje összetételével együtt az alábbi I. táblázatban adjuk meg. A megadott értékek az egyes aminosavak összmennyiségére vonatkozó százalékos értékek. 3
