178166. lajstromszámú szabadalom • Eljárás immunológiailag aktív poliribozil-ribotol-foszfát és az ezt tartalmazó oltóanyag előállítására
MAGVAK NgnOZTAMASAG SZABADALMI 178166 LEÍRÁS IÊÜ Bejelentés napja: 1978. X. 27. (AE-546) Nemzetközi osztályozás: C 12 K 5/00 W Amerikai Egyesült Államok-beli elsőbbsége: 1977. X. 28. (846 466), 1977. XII. 22. (846 488) OKSZAGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1981. VIII. 28. Megjelent: 1983. II. 28. Feltaláló: Szabadalmas: Kuo Joseph S.C. vegyész, Qrangebuig, New York, American Cyanamid Company, Wayne, Amerikai Egyesült Államok New Jersey, Amerikai Egyesült Államok Eljárás immunológiailag aktív poliribozil-ribitol-foszfát és az ezt tartalmazó oltóanyag előállítására 1 A találmány tárgya eljárás immunológiailag aktív poliribozil-ribitol-foszfát és az ezt tartalmazó oltóanyag előállítására. Az oltóanyag a b-típusú Haemophilus influenzae fertőzés, mint például meningitis ellen immunizál. 5 A találmány tárgya eljárás (1), amelynek során a b-típusú Haemophilus influenzae tenyészetéből az antigén természetű poliribozil-ribitol-foszfát poliszacharidot (PRP) elkülönítjük, és (2) majd az elkülönített PRP-ből és B. pertussis antigénből io kombinált oltóanyagot készítünk. A találmány szerint elkülönített PRP hatásosnak mutatkozott más, nem-patogén baktériumokkal is, így például E. coli, B. subtilis, S. aureus, B. punilus és L. plantarum esetében, az oltóanyag alkalmas arra, hogy meleg- 15 vérű állatokban ellenanyag termelést váltson ki. A b-típusú Haemophilus influenzáéból előállított, tisztított poliribitol-foszfátot (a továbbiakban: PRP) védőhatással rendelkező immunogén anyagként kísérletekben alkalmazták. Azonban fiatal álla- 20 tokban és csecsemőkben nem sikerült aktív antigén választ előidézni Tisztítás céljára eddig etanolt és Cetavlont (hexadeciltrimetil-ammónium-bromid) alkalmaztak. Szennyező anyagként jelenlevő endotoxinokat, pirogén anyagokat hideg fenol vagy kló- 25 roform és terc-initanollal végzett kezeléssel távolították eL A tisztítás során azonban az antigén tulajdonságú poliszacharid is károsodást szenvedett. Az ismert megoldásokkal foglalkoznak a következő irodalmi helyek: Anderson és társai: „Anti- 30 2 body to polyribophosphate of Haemophilus influenzae type b in infants and children” J. Infeci. Dis., 136: 557-562. H. influenzae type b., — Rodrigues és társai: „Immunity to Haemophilus influenzae type b. Isolation and some physiochemical, serologic and biologic properties of the capsular polysaccharide of Haemophilus influenzae type b,” Chem. Abst., Vol. 75 No. 20. page 107, abs. No. 116,864n (1971). Immunológiailag hatásos PRP tisztítására és elkülönítésére új eljárást dolgoztunk ki. A találmány szerinti eljárásnak az írod alomba.: ismert megoldásokhoz képest számos előnye van, így például a hidroxi-apatittal végzett tisztítással az összes szennyező anyag (nukleinsavak, fehérjék, endotoxinok) eltávolítható, továbbá a találmány szerinti eljárással magasabb molekulasúlyú poliszacharidot állíthatunk elő, mint az ismert megoldásokkal. További előnyt jelent az, hogy a találmány szerinti eljárással előállított PRP melegvérű állatok esetében intenzív immunogén hatással rendelkezik, és ez a hatás kedvezőbb, mint az eddig ismert eljárással előállított PRP hatása. A PRP poliszacharidból a jelenlevő szennyező anyagokat (fehérjék, nukleinsavak, endotoxinok) oly módon távoli tjük el, hogy a részben tisztított poliszacharidot valamely foszfát-tartalmú adszorbenssel kezeljük, amely adszorbens azonban a poliszáéit aridokat nem adszorbeálja. 178166
