178140. lajstromszámú szabadalom • Eljárás L- izoleucin előállítására
178140 MAGTAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1978. VI. 29. (VE—872) Nemzetközi osztályozás: C 12 D 13/06 Szovjetunió-beli elsőbbsége: 1977. VI. 29. (2501219) ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1981. VII. 28. Megjelent: 1983. I. 31. Feltalálók: Szabadalmas: Zsdanova Nelli Iszakovna biológus, Leonova Tatyana Viktorovna biológus, Vszeszojuznij Naucsno- K.0zsírévá Ludmila Fedorovna mikrobiológus, Moszkva, Szovjetunió Iszledovatyelszkij Instyitut Genetiki i Szelek cii Promislennih Mikroorganizmov (VNIIGENET1KA), Moszkva, Szovjetunió Eljárás L-izoleucin előállítására 1 A találmány tárgya új eljárás aminosavak, így l-izoleucin, előállítására, mikroorganizmusok segítségével. Az l-izoleucin széles kőiben felhasználásra kerülő esszenciális aminosav. Orvosi meghatározások- 5 nál különböző tápkeverékek alkotórészeként, az emberi táplálékban és állati takarmányban adalékként, a gyógyszer- és kémiai iparban reagensként alkalmazzák Az I-izoleucin előállítására ismeretesek olyan jq eljárások, amelyek azon alapulnak, hogy a mikroorganizmusok képesek az L-izoleucin szintézisének előanyagait, így az a-amino-vajsavat, a-oxi-vajsavat, treonint stb. átalakítani. Ezekben az esetekben a mikroorganizmusokat olyan közegben tenyésztik, u amely egy előanyagot, valamint szén-forrást, nitrogén-forrást és más anyagokat tartalmaz. Az előanyag alkalmazása a táptalajban megdrágítja az L-izoleucin előállításának költségeit és megnehezíti annak elkülönítését. 20 Az L-izoleucin előállítására ismeretesek olyan eljárások is, amelyeknek alapja az L-izoleucin közvetlen szintézise Serratia marcescens, Brevibao terium flavum, Corynebacterium aceto acidophilum, Arthrobacter citreus, Corynebacterium glut- 25 amicum és más fajták mutáns törzsei által. Ezeknek az eljárásoknak a során a mikroorganizmusokat olyan táptalajon tenyésztik, amelyek szén-forrást, nitrogén-forrást, ásványi sókat, növekedési faktorokat és vitaminokat tartalmaznak. A tenyésztéshez 30 2 nem szükséges az l-izoleucin előanyaga. A mutáns törzseket mutagén behatással vad törzsekből állítják elő, és aminosav-analógok segítségévei szelektálják. Az igen nagy mennyiségű L-izoleucin termelésére képes mutánsok genetikailag jellemző t újdonsága, hogy vagy a-aminő-/3-hidroxi-valenánsavval (a treonin és izoleucin analógjával) szemben ellenállóak, vagy a treonin, izoleucin, valin, lizin, métionin és leucin nevű aminosavak két, sőt három analógjával szembeni ellenállóképesség tulajdonságát egyesítik. Az ilyen mutáns törzsek 6,7--14,7 g/!iter mennyiségben termelnek L-izoleucint. Ezeknél az eljárásoknál azonban az alkalmazott táptalaj igen bonyolult, fő szén-forrásként szénhidrátot (glükózt, szacharózt, melaszt) tartalmaz, további összetevői pedig ásványi nitrogén, vitaminok, szójababból eredő fehérje-hidrolizátum és bizonyos esetekben aminosavak Az L-izoleucin előállítására alkalmas, ismert eljárásokhoz tehát egy előanyag vagy az L-izoleucin közvetlen szintézise esetén, ahol a végtermékre nézve a kitermelés nem elég nagy, bonyolult összetételű táptalaj szükséges. Továbbá az ismert mutáns törzsek szelekciójához nagy számú aminosav-analóg is szükséges. Jelen találmány célja eljárás kidolgozása L-izoleucin előállítására olyan törzs közvetlen fermentációjával, amely egyszerű táptalaj esetén is nagy mennyiségű l-izoleucint termel. 178140
