177739. lajstromszámú szabadalom • Eljárás beágyazott - kémiai reakciók befolyásolására alkalmas - aktív anyagot, főleg enzimeket tartalmazó porózus szerkezetű szálak előállítására
7 177739 8 szór mossuk 50—50 ml metanollal. Ezután a szálasanyagot (1—2 °C-os) hideg vízzel mossuk és 100 ml 0,5 mólos vizes sósav-oldattal kezeljük jégfürdőben. Az elegyhez, keverés közben, 15 perc leforgása alatt fokozatosan hozzáadunk 1 g nátriumnitritet. A hozzáadás befejezése után az elegyet egy óra hosszat hidegen keverjük, utána a szálasanyagot 0,01 mólos hideg, vizes sósav-oldattal mossuk. Végül a szálakat 100 ml 0,4 mólos, 8,5 pH-jú foszfát-puíferben áztatjuk, amely 100 mg 30 BAEE egység/mg fajlagos aktivitású tripszint tartalmaz. Az elegyet éjszakán át 0 °C-on keverjük. A szálasanyagot vízzel mossuk mindaddig, ameddig már nem mutatható ki enzimaktivitás a mosóvízben, majd meghatározzuk a szálhoz kötött enzimaktivitást. Ebben az esetben ez 350 BAEE egység/g száraz termék. 7. példa Polivinilklorid alapú, porózus szerkezetű szálak használata hordozóként protein kémiai immobilizálására 3,39 g, a 3. példában leírt módon előállított szálat négyszer mosunk 50—50 ml vízzel, ötször pedig 50— 50 ml vízmentes metanollal, végül 100 ml vízmentes metanolt adunk hozzá, mely 1 ml tömény kénsavat tartalmaz, majd az elegyet 6 óra hosszat visszafolyatás közben melegítjük. Ezután az elegyet szűrjük, és a szűrőn maradt anyagot kétszer mossuk 50—50 ml metanollal, négyszer pedig 50—50 ml toluollal. A kapott szálasanyagot 5 g foszgén 100 ml toluollal készített oldatába bevisszük szobahőmérsékleten és ezen a hőmérsékleten éjszakán át keverjük. A felesleges foszgént (ötször 50 ml) toluollal mosva eltávolítjuk és a szálakat végül nitrogéngáz légkörben szobahőmérsékleten szárítjuk. A szálakat 100 ml 0,1 mólos, 7,5 pH-jú foszfát-puíferben 0 °C-os hőmérsékleten 100 mg tripszinnel érintkeztetjük, amelynek a fajlagos aktivitása 30 BAEE égység/mg. Az elegyet 20 óra hosszat hidegen keverjük, végül a reagálatlan enzimet eltávolítjuk úgy, hogy a szálakat addig mossuk vízzel, ameddig még aktív enzim mutatható ki a mosóvízben. Az így kapott szálasanyag enzimaktivitása 250 BAEE egység/mg száraz termék. 8. példa Cellulóztriacetát alapú, pórusos szerkezetű szálak használata molekulaszitaként 137 g, az 1. példában leírt módon előállított és 24,6 g polimert tartalmazó cellulóztriacetát szálat 0,3—0,6 cm hosszú darabokra vágunk, majd ezeket egy 2,5 cm átmérőjű és 34,7 cm magas oszlopba töltjük oly módon, hogy a teljes térfogat 170 ml ágyat alkot. Az ily módon betöltött szálakat légmentesítjük, úgy, hogy egyidejűleg körülbelül 5 liter, vákuumban gázmentesített vízzel mossuk. Az ily módon kapott oszlop egy molekulaszita tu- 5 lajdonságait mutatja. Valójában, ha gélszűrést végzünk és eluálásra KCl-oldatot (13,3 g/liter) használunk, a 2 000 000-s molekulasúlyú Blue Dextran 2000 termékre 73 ml eluáló térfogat adódik. Ez az érték állandó 5 ml/órától 50 ml/óráig terjedő áramlási intervallum- 10 ban. A 294-es molekulasúlyú káliumbikromát eluáló térfogata 128—7,5 ml/óra és 118—45 ml/óra között változhat. Ezek az adatok azt mutatják, hogy a szál molekulaszita-tulajdonságokkal rendelkezik és ugyanakkor módszert szolgáltat a térfogatsúly mérésére: 15 170 ml (össz-ágytérfogat)—73 ml (az oszlop ürestere)= =97 ml. így 24,6 g polimer 97 ml térfogatot foglalt el, tehát a térfogatsúly 24,6:97=0,253 g/ml. Az oszlop összes száltartalmát cellulózzá alakítjuk oly módon, hogy azt 0,5 mólos vizes nátriumhidroxid-oldattal ke- 20 zeljük szobahőmérsékleten nyolc óra hosszat, utána az előző oszlopba visszük és ismét gélszűréses mérésnek vetjük alá. Az eredmények a következők: Teljes ágytérfogat 100 ml. Blue-Dextran 2000 eluáló térfogata 38 ml. 25 Káliumkarbonát eluáló térfogata 92 ml. Ebben az esetben a káliumbikromát eluáló térfogata állandó ismét ugyanazon áramlási intervallumban. Végül a szál száraz súlyát 80 °C-on vákuumban való 30 szárítással határozzuk meg. A száraz súlyra 14,1 g-ot kapunk, tehát az ily módon kapott cellulóz szálasanyag térfogatsúlya 14,1 : (100—38)=0,227 g/ml. 35 Szabadalmi igénypont Eljárás beágyazott — kémiai reakciók befolyásolására alkalmas — aktív anyagot, főleg enzimet tartalmazó, porózus szerkezetű szálak előállítására, azzal jellemezve, 40 hogy a) valamely polimert — így cellulózt, cellulózésztereket, cellulózétereket, cellulóznitrátokat, poliamidokat, poliésztereket poliészteramidokat poliimideket, polipeptideket, akrilnitril, metakrilnitril, akrilsav- és metak-45 rilsavészter, vinilészter- és éter polimereket és kopolmK- reket, vinilklorid, vinilidénklorid, vinilbutirál vagy sztirol polimereket — feloldunk vagy megolvasztunk, b) a polimerben valamely vele nem elegyedő folyadékot vagy benne nem oldható finomeloszlású szilárd 50 anyagot homogénen diszpergálunk, c) a kapott elegyből nedves vagy száraz úton, vagy ömledékből szálakat képezünk, d) a diszperz-fázist eltávolítjuk a szálakból és az így kapott szálat valamely, kémiai reakciók befolyásolására 55 alkalmas anyaggal, főleg enzimmel reagáltatjuk. A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó igazgatója 83.6797.66-4 Alföldi Nyomda» Debrecen — Felelős vezető: Benkő István igazgató
