177174. lajstromszámú szabadalom • Oxidációs indikátorokat tartalmazó stabilizált gyorsdiagnosztikumok
7 177174 8 sav, gentizinsav, nordihidroguajaretsav, N-fenil-l-naftil-amin, trifenil-foszfin, benzimidazol, 2,2-bisz(4-hidroxi-fenil)-propán. Az így készült papírokat összehasonlítottuk olyan papírokkal, amelyek a 2. példa szerint készültek, és megvizsgáltuk felhasználhatóságukat székletben lévő kóros menynyiségű vér kimutatására. Eredmény: Valamennyi antioxidáns oly módon hatott, hogy meggátolta kóros mennyiségű vér kimutatását székletben. Ha a receptúrában az antioxidánsok koncentrációját annyira lecsökkentjük, hogy ismét elérjük a teszt kielégítő érzékenységét, úgy ezek az anyagok elvesztik stabilizáló hatásukat. 4. példa. Vér kimutatása székletben. Szűrőpapírt (Whatman No. 1) egymásután a következő oldatokkal impregnálunk, és megszárítjuk. 1. oldat: 0,34 mólos K-EDTA puffer, pH 5,0 10 ml, Dioktil-nátrium-szulfo-szukcinát 500 mg, Metanol 20 mi, Desztillált víz 80 ml. 2. oldat: 3,3’,5,5’-Tetrametil-benzidin 400 mg, 1-Fenil-szemikarbazid 100 mg, Aceton 100 ml. Egy így készített tesztpapir teljesen megfelel azoknak a követelményeknek, amelyeket egy székletben kóros menynyiségfi vér kimutatására szolgáló teszttel szemben támasztanak : A tesztpapírra felvitt székletminta alkoholos hidrogénperoxiddal végzett „előhívása” után jelentkezik a kóros mennyiségű vér. A vért a minta körül keletkező zöld elszíneződés mutatja. A tesztpapír fénnyel és a levegő oxidációs hatásával szemben kielégítően stabil. 4 Olyan tesztpapír, amely a fenti receptúra szerint, de a találmány szerinti 1-aríl-szemikarbazid nélkül készült, ezzel szemben fényen és levegőn rövid időn belül kékeszöldre színeződik. Ez diagnosztikai célokra többé nem használható. 5. példa. Vér kimutatása székletben. Szűrőpapírt (Schleicher & Schüll 597 NF-Ind.) egymásután a következő oldatokkal impregnálunk, és megszárítjuk. 1. oldat: megfelel a 4. példában szereplő 1. oldatnak. 2. oldat: l-(3-Etil-2-benztiazol)-2-(4-etil-!-fenil-3-metil-2-oxo-1.2.4-triazol)-azin 100 mg, I -Fehil-szemikarbazid 70 mg, Aceton 100 ml. Ilyen papír azonos tulajdonságokkal rendelkezik, mint a 3. példa szerinti papír; a keletkező reakciószín kék. Olyan papírok, amelyek a találmány szerinti 1-aril-szemikarbazidok hozzáadása nélkül készülnek, már a kimutatási reakció alatt elszíneződnek, ami egészséges személyek széklete esetén is helytelen, pozitív reakciót eredményezhet. 6. példa. Tesztpapír vér kimutatására vizeletben vagy liquorban. Szűrőpapírt (Schleicher & Schüll 23 SL) egymásután a következő oldatokkal impregnálunk, és megszárítjuk. 1. oldat: 1,2 mólos nátrium-citrát puffer, pH 5,25 35 ml, Etilén-diamin-tetraecetsav-dinátriumsó 0,1 g, Dioktil-nátrium-szulfoszukcinát 0,5 g, 2,5-Dimetil-hexán-2,5-dihidroperoxid (kb. 70%-os) 1,6 g, Foszforsav-trimorfolid 12,7 g, Etanol 30,0 ml. Desztillált víz feltöltve 100 ml-re 2. oldat: 3.3\5,5’-Tetrametil-benzidin 0,3 g, Fenantridin 0.2 g, 1-Fenil-szemikarbazid 0,05 g. Metanol/toluol (40:60) feltöltve 100 ml-re Ilyenfajta tesztpapírokat fény és levegő gyakorlatilag nem befolyásol. A találmány szerinti 1-aril-szemikarbazid nélküli tesztpapírok 5—10 perces megvilágítás után zöldre színeződnek. Hasonló kedvezőtlen tulajdonságúak az olyan papírok, amelyeknél a találmány szerinti 1-aril-szemikarbazid helyett az impregnálóoldatba ekvimoláris mennyiségű amino-guanidint vagy szemikarbazidot teszünk. 1-Fenil-szemikarbazid helyett használható ekvimoláris mennyiségű l-(p-klór.fenil)-szemikarbazid, 1 -(p-tolil)-szemikarbazid, l-(p-metoxi-fenil)-szemikarbazid anélkül, hogy a papírok tulajdonságai változnának. A példa szerint készült papírokkal kielégítő érzékenységgel mutatható ki vér vizeletben vagy liquorban. 7. példa. Tesztpapírok glükóz kimutatására vizeletben. Szűrőpapírt (Schleicher & Schüll 2312) egymásután a következő oldatokkal impregnálunk, és megszárítjuk. 1. oldat : Glükózoxidáz (55 U/mg) 500 mg. Peroxidáz (75 U/mg) 200 mg. Tartrazin 100 mg, Desztillált víz 100 ml. 2. oldat: 3,3 ’, 5,5 ’ -Tetrametil-benzidin 600 mg. 1 -Fenil-szemikarbazid 50 mg. Nátrium-lauril-szarkozinát 100 mg. Desztillált víz 100 ml. Az így készült papír fény, levegő és levegőnedvesség behatásaival szemben stabil, és vizeletben 30—2000 mg/dl glükózkoncentráció esetén intenzíven növekvő zöld indikátorreakciót mutat. Ha a készítés során a találmány szerinti 1 -aril-szemikarbazidot kihagyjuk, úgy az ilyen papírok fényre, levegőre és légnedvességre érzékenyek lesznek. Rövid idő alatt úgy elszíneződnek, hogy vizeletben történő glükózkimutatás során téves pozitív reakciók léphetnek fel. 8. példa. Tesztpapírok glükóz kimutatására vizeletben. Szűrőpapirt (Schleicher & Schüll 2316) a következő öszszetételű oldattal impregnáljuk, és megszárítjuk: 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
