176983. lajstromszámú szabadalom • Eljárás specifikus chromogén új tetrapeptid-származék enzim-szubsztrátumok előállítására

176983

—2 —

közvetlenül felelős a protrombin trombinná való átalakulásáért, Ha a protrombin az Xa faktor hatására trombinná alakul át, akkor molekulájában két enzimkötés felhasad,

E két hasitási helyet pontosan ugyanaz az aminosav-sorozat, éspedig az -Ile—Glu—Gly—Arg- sorozat előzi meg.

Az Xa koagulációé faktor meghatározására egy egyszerű módszer rendkivüli diagnosztikai jelentőséggel bir. Az Xa faktor meghatározására eddig ismertté

vált legjobb reagensek olyan kromogén peptid-szubsztrátumok, amelyekben -Ile-Glu«Gly-Arg- aminosav-sorozat, tehát a természetes protombrinban lévő hasitási helyeket megelőző aminosav-sorozattal azonos szekvenciáju aminosav-sorozat van.

Az ebbe a sorozatba tartozó legjobb szubsztrátunmak, a benzoil-Ile-Glu-Gly-Arg-p-nitro-anilidloklrid sójának továbbiakban az egyszerűség kedvéért az S-2222 kódszám alatt fogjuk emliteni/ aminosav-szekvenciája pontosan megegyezik a természetes szubsztrát tárgyalt részének szekvenciájával. Az S-2222 szubsztrátumot már a klinikai gyakorlatban alkalmazzák például X a koagulációé faktor és heparin kimutatására freien, A.B., Lie, U. és Abilgaard,

U.í Thrombosis Research, 8, 413 /1976/ J. E kimutatási módszerek az alábbi reakción alapulnak: Bz-Ile-GlUs-Gly-Arg-pNA -~——} Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-OH + pNA

A felszabaduló p-nitro-anilid /pHA/ fényabszorpciójának maximuma eltérő a szubsztrátumétől, és igy az enzimatikus reakció könnyen követhető a 405 nanométernél