176799. lajstromszámú szabadalom • Eljárás inzulin és pankreatin egyidejű kinyerésére sertéspankreászból
MAGYAR SZABADALMI 176799 NÉPKÖZTÁRSASÁG LEÍRÁS Nemzetközi osztályozás: Bejelentés napja : 1975. XII. 17. (HO—1863) A 61 K 37/26 A 61 K 37/48 C 07 G 7/026 Elsőbbsége: Német Szövetségi Köztársaság: 1974. XII. 20. (P 24 60 334.7) C 07 C 103/52 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1980. XI. 28. Megjelent: 1981. XI. 30. Feltalálók : dr. Hafner Leonhard gyógyszerész, Königstein/Taunus, dr. Schramm Wilhelm vegyész, Kelkheim/Taunus, Kargl Hans laboráns, Schwalbach/Taunus, Kieser Friedrich laboráns, Eppstein/Taunus, Német Szövetségi Köztársaság Szabadalmas : Hoechst AG., Frankfurt/Main, Német Szövetségi Köztársaság Eljárás inzulin és pankreatin egyidejű kinyerésére sertéspankreászból 1 A találmány tárgya új eljárás az inzulin valamint proteolitikus enzimek, amiláz és lipáz keverékét tartalmazó pankreatin gazdaságos előállítására. A vágóállatok hasnyálmirigye gyógyászati nyersanyag szempontjából kétféleképpen értékesíthető. Egyrészt kiindulóanyag inzulin kinyerésére, másrészt a gyógyászatban használható értékes enzimek kinyerésére. A szarvasmarha-hasnyálmirigy az inzulinén kívül a tripszin és kimotripszin, míg a sertés-hasnyálmirigy a gyógyászati szempontból értékes lipolitikus, aminolitikus és proteolitikus hatással rendelkező pankreatin enzimkeverék kinyerése szempontjából hasznos. A kétfajta hasznos tulajdonság miatt a hasnyálmirigy jellegű nyersanyagokat a gyógyászatban, gyógyszerkészítmények előállításánál és az iparban sokoldalúan használják és emiatt számos kísérletet végeztek közös kiindulóanyagból mindkét hatóanyagtípus kinyerésére. A kétfajta hatóanyag kinyerés azonban azzal a nehézséggel jár, hogy az inzulin kinyerésére olyan extrakciós feltételek betartása szükséges, amelyeknél az enzimek nagyobb részben irreverzíbilis módon hatástalanná válnak. így az inzulin teljes extrakciójánál a savas körülményeket főként a 4 alatti pH-értéket szerves oldószer, többnyire 50—80 térfogat%-os etanol jelenlétében alkalmazzák. A hasnyálmirigy amiláz és lipáz hatóanyagai azonban ezek mellett a feltételek mellett instabilisak, s így nagymértékben denaturálódnak. Nagyobb stabilitást mutat a tripszin-kimotripszin proteolitikus rendszer. Az inzulin-gyártás extrakciós maradékaiból a kristályos tripszin, illetve tripszin-kimotripszin-keverék járulékos kinyerését ismertetik a 613 030 számú nagy-britanniai, 875 640 számú német szövetségi köztársaságbeli, 999 346 számú francia, 2 686 148 és 2 751 330 amerikai egyesült államokbeli vagy az 1 013 834 számú német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírásban. Az inzulin és pankreatin egyidejű kinyerése azonban ezzel szemben nagyobb problémát jelent. Iparilag hasznosítható eljárást a fent vázolt nehézségek miatt czidáig nem sikerült kidolgozni. A 745 824 számú német szövetségi köztársaságbcli szabadalmi leírásban olyan eljárást ismertetnek, amelynél az enzimek nagymértékű védelmére az inzulin extrakcióját lúgos pH-érték mellett végzik. A 874 062 és 875 856 számú német szövetségi köztársaságbcli szabadalmi leírásból fermentkímélő savas inzulin extrakciós eljárás vált ismeretessé. Az enzimek azonban a fentemlített eljárásokkal olyan mértékben károsodnak, hogy a modern követelményeket kielégítő terméket gazdaságos feltételek mellett nem sikerült előállítani. Az 1 054 523 számú nagy-britanniai szabadalmi leírás az inzulin előállítására olyan eljárást közöl, melynél az acetonos extrakciót 3,5 pH-érték alatt végzik. Az eljárás komoly hátránya, hogy az említett alacsony pH- tartomány kedvezőtlen hatással van a pankreász inzulinkomponense mellett jelenlevő emésztőenzimek aktivitására, illetve azok kívánt összetételben történő izolálására. Az abszolút pH-értéken kívül—amelyeknél az extrakciót kivitelezik — nyilvánvalóan a nagymértékű enzim 5 10 15 20 25 30 176799
