176756. lajstromszámú szabadalom • Gyorsdiagnosztikum húgysav meghatározására testfolyadékokban
5 176756 6 A tesztfilmek készítéséhez műanyagdiszperziókként például az 1,598. 153. sz. német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírásban leírtak alkalmazhatók, előnyös a polivinil-propionát, -acetát és ezek vegyes polimerizátumai. A tesztpapírokat, illetve tesztfilmeket a szokásos módon készítjük, kis (például 6x6 mm-es) négyzetekre vágjuk, és csíkalakú hordozókra, előnyösen fóliákra felragasztva, felhegesztve vagy más módon rögzítjük. A csak egy tesztfelülettel rendelkező tesztcsíkok előnyösen egyszerű reflexiós fotométerekben való mérésre vagy összehasonlító színekkel való vizuális összehasonlításra alkalmasak. Különösen előnyös azonban egy tesztcsíkra több, növekvő gyökkoncentrációjú tesztfelületet felvinni. Ilyenkor a vizsgálandó folyadék felvitele után egy sor egészen, részben és egyáltalán nem elszíntelenedett tesztfelületet kapunk, amelyekben az ekvivalenciapont, azaz az éppenhogy végbement elszíntelenedés pontja összehasonlító színskála nélkül is egyértelműen megállapítható. A következő példákban a találmányt részletesebben megmagyarázzuk. A leírás során az alábbi rövidítéseket használjuk: A gyök=az azino-bisz-N-etil-benztiazolon-diszulfonsav-diammóniumsó gyöke ; B gyök=az azino-bisz-N-etil-benztiazolon-diszulfonsav-dilítiumsó gyöke; C gyök=az azino-bisz-N-metil-benztiazolon-diszulfonsav-dilítiumsó gyöke. 1. példa Összetétel ; Polivinil-acetát-propionát diszperzió 45 g Nátrium-alginát, 1,85%-os oldat 0,5 mólos, 5,6 pH-jú nátrium-foszfát pufferben 35 g A gyök (33,8%-os) í x g Azino-bisz-N-etil-benztiazolon- V22 ml -diszulfonsav-diammóniumsóJ vízben y g Dioktil-nátrium-szulfoszukcinát 8 ml metanolban 0,75 g Receptúra a b c d e f g x 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09 0,1 g y 0,25 0,30 0,35 0,40 0,45 0,50 0,60 g Az alkotórészeket alaposan összekeverjük, és a légbuborékok eltávolítása céljából 5 percig 1500 ford/percnél centrifugáljuk. Utána polikarbonát fóliára 0,38 mm vastag filmet kenünk fel, és 30 percig szárítjuk 50 °C-on. A megkent anyagot 6 mm széles csíkokra vágjuk, és egymástól 1 mm távolságra egymás mellé rakva felhegesztjük egy poliészterfóliára. Ezt 6 mm széles csíkokra vágjuk, így olyan tesztcsíkokat kapunk, amelyek a hét tesztfelületet a-tól g-ig egymás mellett tartalmazzák. A tesztcsíkokat szérumokkal becseppentjük, amelyek 100 ml-enként 2, 4, 6, 8 és 10 mg húgysavat tartalmaznak, és 5 perc elteltével letöröljük. A következő eredményt kapjuk: Szérum mg/100 ml 2 egy tesztfelület sem színtelenedhet el teljesen, 4 az a és b (2) tesztfelület elszíntelenedett, 6 az a—d (4) tesztfelület elszíntelenedett, 8 az a—f (6) tesztfelület elszíntelenedett, 10 az összes (7) tesztfelület elszíntelenedett. A szérum húgysavtartalma tehát a fentiek alapján a következő módon könnyen értékelhető: mg húgysav/100 ml=az elszíntelenedett tesztfelületek száma +2. 2. példa Összetétel : Polivinil-acetát-propionát diszperzió 45 g Nátrium-alginát, 1,85%-os oldat 0,5 mólos, 5 pH-jú lítium-citrát pufferben 35 g B gyök (35,1%-os) 0,2 g Azino-bisz-N-etil-benztiazolon-diszulfonsav-dilítiumsó 0,2 g Fluorozott nem-ionogén nedvesítőszer (Forafac 1110) 0,2 g Desztillált víz 20 ml. Az anyagot az 1. táblázatban leírtakhoz hasonlóan összekeverjük, centrifugáljuk, kikenjük és megszárítjuk. A felvágás után az 1. példához hasonlóan olyan tesztcsíkokat készítünk, amelyek csak egy tesztfelülettel rendelkeznek. A tesztfelületet húgysavtartalmú vérrel lecseppentjük, 1 perc elteltével leöblítjük, és valamilyen kereskedelmi forgalomban levő reflexiósfotométeren (Reflomat®) mérjük. Az eredményt az 1. táblázatban összesítjük : mg% húgysav skálarész 0 45 2 42 3 38,5 4 35 5 32 6 28 7 23,5 8 21,5 9 19 10 16 11 13,5 12 9 3. példa Szűrőpapírt (Schleicher és Schüll 2316) a következő összetételű oldattal impregnálunk, és 50 °C-on megszárítjuk: 6 pH-jú, 0,5 mólos lítium-citrát puffer 50 ml C gyök (32,5%-os) 0,175 g Azino-bisz-N-metil-benztiazolon-diszulfonsav-dilítiumsó 0,2 g Lauril-polioxi-etilén-éter 0,1 g Desztillált víz feltölteni 100 ml-re. A papírt 6 mm széles csíkokra vágjuk, és transzferragasztó segítségével egy polisztirol fóliára ragasztjuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
