176627. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3aalfa-h-4alfa-(3'-propionsav)-7abéta-metilhexahidro-1,5-indandion előállítására szitoszterin mikrobiológiai átalakításával
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG SZABADALMI LEÍRÁS 176627 Bejelentés napja: 1977. XI. 25. (UO—140) Nemzetközi osztályozás : Elsőbbsége: Amerikai Egyesült Államok: 1976. XI. 26. (745 113) C 12 D 13/02 C 07 C 65/20 ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL Közzététel napja: 1980. VIII. 28. Megjelent: 1981. XI. 30. Feltalálók: Biggs Candice Brenda mikrobiológus, Kalamazoo, Pyke Thomas Richard mikrobiológus, Portage, Wovcha Merle Gene biokémikus, Kalamazoo, Michigan, Amerikai Egyesült Államok Szabadalmas : The Upjohn Company, Kalamazoo, Michigan, Amerikai Egyesült Államok Eljárás 3a«-H-4a-(3’-propionsay)-7aP-metilhexahidro-l,5-mdándion előállítására szitoszterin mikrobiológiai átalakításával 1 2 A találmány tárgya új mikrobiológiai eljárás szitoszterin szelektív átalakítására I képletű 3aa-H-4a-(3'-propionsav)-7a ß-metilhexahidro-1,5-indándionná, oly módon, hogy Árthrobacter, Bacillus, Brevibacterium, Corynebacterium, Nocardia, Protaminobacter, Serratia 5 és Streptomyces, Mycobacterium, előnyösen Mycobacterium fortuitum NRRL B—8129 mutáns mikroorganizmust, amely mutáns szelektíven bontja le a szitoszterint, vizes táptalajon 7—9 pH értéken aerob körülmények mellett szitoszterin jelenlétében tenyésztünk. A szteroidok mikroorganizmusokkal történő átalakítását széles körben tanulmányozták és sokan le is írták. A legkorábbi munka ebben a témában Mamoli és VerceUone 1937-es cikke: Bér. 70, 470 és Bér. 70, 2079. 17-ketoszteroidok redukcióját írták le 17 ß-hidroxi- 15 -szteroidokká fermentáló élesztő segítségével. Peterson és Murray nemrég írták le — progeszteron 1 la-hidroxilezését Rhizopus nigricans fungus-szal 1. 2 602 769 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás (1952). Kraychy és tsai a 3 684 657 sz, amerikai egyesült álla- 20 mokbeli szabadalmi leírásban (1972) 17-alkil-szteroidok szelektív mikrobiológiai lebontását írják le oly módon, hogy a 17-alkil oldalláncban legalább 8 szénatomot tartalmazó szteroidot Mycobacterium sp. NRRL—B— 36-83-mal fermentálják és így androszt-4-én-3,17-diont, 25 androszt-l,4-dién-3,17-diont, és 20-hidroxi-metil-preg«a-l,4-diont -k-agaiak. Még egy újabb eljárást írtaik le Mwsbeok és tsai a 3 759 791 (1973) sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban androszt-4-ée-3,17- -diaá szetókíív mikr®bÍQtógiai előállítására, oly módon, 30 hogy a 17-alkil-oldalláncban legalább 8 szénatomot tartalmazó kolesztán vagy sztigmasztán sorba tartozó szteroidot Mycobacterium sp. NRRL—B—3805-tel fermentálják. A találmány szerinti eljárással kapott vegyület az I képletű 3aa-H-4a-(3'-propionsav)-7a ß-metilhexahidro-1,5-indándion ismert vegyület, Sih és Wang írták le „Mechanisms of steroid oxidation by microorganisms II. Isolation and characterization of 3a«-H-4a-(3'-pro- 10 pionic-acid)-7aß-metilhexahydro-l,5-indanedione” J. Am. Chem. Soc, 85, 2135—2137 (1963) cikkükben. Sih és Wang úgy írták le az I képletű vegyületet mint az androszt-4-én-3,17-dion lebontásának közbenső termékét, ahol a bontást Nocardia restrictus-szal végzik. A technika állásához tartozik még Schubert, K., Bohme, K—H. és Horhold, C. „Formation of low molecular'degradation from progesterone by microorganisms”. Steroids 4, 581—586 (1964) cikke. Ezek a szerzők triciklusos intermedierek képződését írták le progeszteron Mycobacterium smegmatitis-sal történő lebontása során. A találmány szerinti eljárásban alkalmazott Mycobacterium fortuitum NRRL—B—8129 a 4039381 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban van leírva (Elsőbbsége 1975. november 17.). Az eljárás körülményei nem alkalmazhatók az I képletű vegyület találmány szerinti előállítására. A találmány tárgya tehát új mikrobiológiai átalakítási eljárás mutánsok felhasználásával, melyre jellemző, 176627
