176505. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új n-(2'-karboxi-fenil)-4-klór-antranilsav-származékok előállítására
9. táblázat 11 176505 11. táblázat 12 Kezelés titer* Kezelés nélkül 1011 12 Kortizon 103 Kortizon+vizsgált vegyület (10 mg/kg) 1010 Kortizon+vizsgált vegyület (50 mg/kg) 106 * A vérben az antitest titert 50% hemolízís hígításfokéval jelöljük. 10. kísérlet A neutrociták baktériumölő képességét javító hatás (bakteriális fertőzés ellen védő hatás) Kísérleti állatokként JW/CSK törzsbeli, 3,0—3,9 kg testsúlyú fehér hím házinyulakat használtunk, és ezeket 5 állatból álló csoportokra osztottuk. Mindegyik házinyűlnak perorálisan 100 mg/kg adagmennyiségben adtuk be az N-(2'-karboxi-fenil)-4-klór-antranilsav-dinátriumsó vizsgálandó vegyületet és a beadás után 24 órával a perifériás vérerek vérében a neutrocitákat nitrokék-tetrazoniummal (NBT) reagáltattuk, majd a formazanpozitív sejtek arányát mikroszkóppal meghatároztuk. Kontrollként ugyanazzal az állattal pontosan 3 nappal a vizsgálandó vegyület beadása előtt kapott érték szolgált. Az eredményeket a 10. táblázat tartalmazza. Az eredmények azt mutatják, hogy a formazan-pozitív neutrocita sejtek aránya a vizsgált vegyülettel való kezelés következtében jelentékenyen nagyobb lett, és hogy a találmány szerinti vizsgált vegyület a neutrociták baktériumölő képességét javítja. 10. táblázat Kezelés Nitrokék-tetrazonium felék* (»/.) Vizsgált vegyülettel való kezelés előtt 11,4 ±1,8 Vizsgált vegyülettel való kezelés után 33,3 ±7,8* (P 0,05) * Nitrokék-tetrazonium értéket átlagos négyzetes eltérésként adjuk meg. 11. kísérlet Bacillus pyocyaneus okozta fertőzés ellen védő hatás Kísérleti állatként ddY törzsbeli, 5 hetes hím egereket 7 tagból álló csoportokra osztva alkalmaztunk. Mindegyik egeret intraperitoneálisan Bacillus pyocyaneusszal, Pseudomonas aeruginosa Pa-II-vel oltottuk be. A beoltás előtt 6, 5,4, illetve 1 nappal, naponta egyszer fejenként 2 mg N-(2'-karboxi-fenil)-4-klór-antranilsav-dinátriumsót adtunk be perorálisan, és a beoltás után 54 óra hosszat megfigyeltük mindegyik egér túlélésének időtartamát. Ha fejenként 2/105 baktériumot oltottunk be, úgy megfigyelhettük, hogy a vizsgált vegyület bakteriális fertőzés ellen védő hatást gyakorol. A vizsgált vegyület a bacillus-toxin csökkentésének irányában hat. Beoltott baktérium (szám/állat) Kontroll Vegyület túlélési idő (óra) elpusztult állat/öszszes állat túlélési idő (óra) elpusztult állat/öszszes állat 2/106 22, 24, 24, 24, 24, 26, 26 7/7 24, 24, 24, 24, 24, 29, 29 7/7 2/105 45, 45, 45, 45, 45, 52, S 6/7 46, S, S, S, S, S, S 1/7 2/104 52, S, S, S, s, s, s 1/7 S, S, S, S, S, S, S 0/7 LD50 (szám/állat) 104>8 105’7 S: a baktériummal való fertőzés után 54 órával túlélt állatok. 12. kísérlet Bacillus pyocyaneus okozta fertőzés ellen védő hatás Kísérleti állatként ddY törzsbeli, 5 hetes hím egereket 9 tagból álló csoportokra osztva alkalmaztunk. Mindegyik egeret intraperitoneálisan 106 Pseudomonas aeruginosa Pa-II bacilussal oltottuk be, majd a beoltás után 1,5 órával szubkután karbenicillin antibiotikumot adtunk be. A beoltás előtt egy, illetve két nappal naponta egyszer 2 mg mennyiségű N-(2'-karboxi-fenil)-4-klór-antranilsav-dinátriumsót perorálisan beadtunk. A vizsgált vegyület hatékonyságát úgy állapítottuk meg, hogy a kísérleti állatokat a beoltás után 54 óra hosszat megfigyeltük. Az eredményeket a 12. táblázat szemlélteti. A kísérleti eredmények azt mutatják, hogy ha az antibiotikumot a vizsgált vegyülettel együtt alkalmazzuk, úgy a baktériumölő hatékonyság javul. 12. táblázat Karbenicillin (mg/állat) adagja Túlélt állatok szám Vizsgált állatok száma Karbenicillin Karbenicillin+ Hh vizsgált vegyület 40 9/9 9/9 20 2/9 7/9 10 0/9 4/9 ED50 (mg/állat) 24,1 10,4 13. kísérlet Salmonella okozta fertőzés ellen védő hatás Kísérleti állatként ddY törzsbeli, 5 hetes hím egereket használtunk, és ezeket 7 egérből álló csoportokra osztottuk. Mindegyik egeret 103 Salmonella entritidis TO-1 baktériummal oltottunk be, és a beoltás után 3 órával 0,5 mg adag-mennyiségű sztreptomicint szubkután adtunk be. A vizsgálandó vegyületnek, az N-(2'-karboxi-fenil>4-klór-antranilsav-dmátriumsónak beadását úgy hajtottuk végre, hogy 5 különböző napon, még pedig a beoltás előtti harmadik és második napon, a beoltás 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
