176480. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és berendezés biológiai festéshez használatos festékkel vagy festékkeverékkel előre bevont diagnosztikai célt szolgáló mikroszkópiai tárgylemezek ipari előállítására
7 176480 g zásával [vő. a szerzők egyidejűleg benyújtott p. 25 15 9664SZ. NSZK-beli szabadalmi bejelentésével]. metilénkék N-hidroklorid 130 mg krezilibolya-acetát 270 mg metanol 100 ml Ezt az oldatot 0,5 mm-es szélessugaras fúvókából (a Spraying Systems cég SS 60 67228-45 jelű fúvókája) kb. 25°-os szórási szög alatt, 20 cm távolságból egy maszkon keresztül 3 cm szélességben a tárgylemezre szórjuk, amelyeket 1,5 m/perc sebességgel továbbítunk a fúvóka alatt. Utólagos szárítás nem szükséges. Kiszórási nyomás: 1,2 att., a fúvóka folyadékátbocsátása lOml/perc. 20 u közepes cseppméret mellett a felvitt festék mennyisége kb. 3pg/cm2. Egy ily módon előállított festékréteggel előre bevont tárgylemezre egy kb. 8-10 pliteres vércseppet cseppentünk, majd fedőlemezzel lefedjük. Kb. 3—5 perc múlva a megfestődés a mikroszkóp alatt 800-szoros nagyításban, olajimmerziós objektív alkalmazásával meghatározható. A vér egyes alkotóira a következő elszíneződések jellemzőek: retikulociták: bíbor-színű hálózat az alig neutrofilek: színeződött eritrocitában, bíbor-színű mag egy finoman eozinofílek: granulált, csaknem színtelen plazmában, bíbor-színű mag egy durván bazofiiek: granulált sárga plazmában, sötétbíbor-színű mag, egy limfociták: közepes nagyságú tömören granulált narancsvörös-színű plazmában, bíbor-színű mag, világos monocüák: bíbor-színű plazmában, mim a limfociták, de tromboeiták: nagvobbak és több a plazmájuk, kis. bíbor-színű részecskék. 3. példa Brillant-krezilkék 1/f-os etanolos oldatát szórjuk fel a tárgylemezekre, a 2. példáéval azonos körülmények között. Az így elért festékfelvitel kb. 6 pgíenr Az igy előállított, előre megfestett tárgylemezre 8 iOjulireres véreseppet cseppentünk, majd fedőlemezzel letéíijúk. Kb. 5 pen.' múlva a megfestődés mikroszkóp .•Jatt 800-‘ -'c-ros nagyításban értékelhető. Ebben az .séfben a vfíkulociták sötétkék hálózatú eritrocitakent jelennek meg. Ha briilant-krezilkék helyett ugyanolyan mennyiségű nil uskék-szulfátot alkalmazunk, a retikulociták mellett még az erotriciták ún. Heinz-féle záradéktestjei is kékre festődnek. 4. példa Ultrahangos besugárzás mellett a következő összetételű oldatot készítjük el: toluidinkék O 1000 mg polioxietilén-szorbiter-monopalmitát 30 mg desztillált víz 100 ml Ezt az oldatot a 2. példában leírt körülmények Jcözött a tárgylemezekre felszórjuk. Festékfelvitel kb. 6pg/cm2. Az így előállított előre megfestett tárgylemezre egy kb. 5-10 juliteres vércseppet viszünk fel, majd fedőlemezzel letakarjuk. Kb. 10 perc után a megfestődés mikroszkóp alatt olajimmerziós objektív alkalmazásával 800-szoros nagyításban értékelhető. A vérrészecskék festődési tulajdonságai megfelelnek a 2 424 955 sz. NSZK-beli közrebocsátási iratban leírtaknak. 5. példa Kristályibolya és alciánkék kereskedelmi forgalomban kapható vizes oldatát a 2. példában leírt módon tárgylemezre szórjuk fel. A tárgylemezre egy csepp felkevert vizeletüledéket cseppentünk és 400-szoros nagyítás mellett mikroszkópon át vizsgáljuk. Az egyes vizelet-alkotórészek jellemző formájukban a következő színekben ismerhetők fel: eritrociták: halványrózsaszíntől, ibolyaszínűig. leukociták, laphámsejtek: rózsaszínűek, a magok az ibolyától a kék színig festődnek, vesehámsejtek: ibolyaszínűek, az ibolyától a kékig festődő magokkal, nyálka: világoskéktől petróleumkékig, hyalin cylinder: világoskéktől petróleumkékig, viasz cylinder: ibolyától bíbor-vörösig, sejtes cylinder: világoskéktől petróleumkékig festődő alap, jellegzetesen festődött sejtes zárványokkal (pl. leukociták stb.). Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás biológiai festéshez használatos festék(ek)-kel vagy festékkeverék(ek)kel előre bevont, diagnosztikai célt szolgáló mikroszkópiái tárgylemezek ipari előállítására, azzal jellemezve, hogy a tárgylemez felületére elkülönülten vagy egymást részben átfedve elhelyezkedő mikrofinom festékcseppecskéket viszünk fel oly módon, hogy a festékek) oldatát szórófúvókává juttatjuk fel a tárgylemezre, majd a cseppecskéket közvetlenül a tárgylemezre való lecsapódás után megszárítjuk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 4
