176356. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 3',4'-didezoxi-kanamicin B származékok előállítására
176356 10 melegítve az elegyet, beindítjuk a reakciót. Ezután vékonyrétegkromatográfiás úton (szilikagél, futtatóelegy: etil-acetát és benzol 3 :1 arányú elegye) vizsgáljuk az elegyet. Amikor a 0,04-es Rf-értéknél észlelhető folt eltűnik, és 0,3 8-as és 0,56-os Rf-ér- 5 tékeknél 2 :1 arányban megjelenik a várt termék és a diciklohexilidén-származék két foltja, akkor hozzáadjuk a reakcióelegyhez 0,01 ml víz dimetil-formamidos oldatát, majd éjszakán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk az elegyet. 10 Másnap erélyes keverés mellett egyszerre hozzáadjuk az elegyhez 125 mg nátrium-hidrogén-karbonát telített vizes oldatát, utána csökkentett nyomáson betöményítjük az elegyet, majd vízre öntjük a sűrítményt. Kiszűrjük a kivált szilárd halmazálla- 15 potú anyagot, vízzel kimossuk, és megszárítjuk, ily módon 180 mg terméket nyerünk, op.: 175-176 °C (bomlik), [a]p5 =13° (c = 1, dimetil-formamid). Analízis: C59H75N5O20S5 képletre 20 számított : talált: C =53,10%, N = 5,25%, C =52,73%, N = 4,83%, H = 5,66%, S =12,01%, H = 5,51%, S =11,68%. 3. 3’,4’-di-0-Benzil-szulfonil-penta-N-tozil-4”,6”-0-ciklohexilidén-kanamicin B és 3’,4’,2”-tri-0-benzil-szulfonil- -penta-N-tozil-4”,6”-0-ciklohexilidén- 3®-kanamicin B (XII általános képlet, ahol a Q. hidrogénatom vagy a XIII képletű, Bs jelű csoport) 36 ml piridinben feloldunk 1,76 g penta-N-tozil- 35 -4”,6”-0-ciklohexilidén-kanamicin B-t, majd hozzáadunk az oldathoz 505 mg (molárisán kétszeres mennyiségű) benzil-szulfonil-kloridot, és 2,5 órán át —3 °C és —5 °C közötti hőmérsékleten tartjuk a reakcióelegyet. Ezután további 253 mg benzü-szulfonil-kloridot adunk az elegyhez, majd éjszakán át kb. 3 °C hőmérsékleten hagyjuk állni. Másnap hozzáadunk 0,4 ml vizet, betöményítjük az oldatot, és 120 ml kloroformban feloldjuk a maradékként nyert sötétpiros színű szirupot. 10%-os kálium-hid- 45 rogén-szulfát-oldattal, utána 5%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal majd vízzel mossuk a kloroformos oldatot, végül magnézium-szulfáton megszárítjuk. Ledesztilláljuk a kloroformot, és desztillációs maradékként 2,16 g barna szilárd halmazálla- 50 potú anyagot nyerünk, amely lényegében a várt vegyületek keveréke. Ezen keverék oszlop-kromatográfiás tisztítása (szilikagél: 140 g Wacogel C—200, eluens: benzil és etil-acetát 3 :2 arányú elegye) útján 1,31 g (61%) 55 3’,4’-di-0-benzil-szulfonil-penta-N-tozil-4”,6”-0-ciklohexilidén-kanamicin B-t [op.: 169-170 °C (bomlik), [a]pS =0° (c = 1, kloroform] és 473 mg (20%) 3 ’ ,4 ’2 ’ ’-t ri-0-benzil-szulfonil-penta-N-tozil-4”,6”-0- -cildohexilidén- kanamicin B-t [op.: 163—164 °C 60 (bomlik), [a]o5=20° (c = 1, kloroform)] nyerünk. Az ezt követő reakciólépésben a két terméket együtt, szétválasztás nélkül felhasználhatjuk, az eredményt az összetevők szétválasztása nem befolyásolja. . 65 4. Penta-N-tozil-4”,6”-0-ciklohexilidén-3’,4’-didezoxi-3’-én-kanamicin B (XIV képlet, ahol a Ts tozilcsoport) 4 ml dimetil-formamidban feloldunk a 3. pontban leírt módon nyert 199 mg 3’,4’-di-0-benzil-szulfonil-penta-N-tozil-4”,6”-0-ciklohexilidén-kanamicin B-t, az oldathoz hozzáadunk 2,03 g száraz nátrium-jodidot, és fél órán át 100 C hőmérsékleten kevertetjük az elegyet. A reakcióelegy színe a felszabaduló jódtól 2 percen belül homogénné válik, és fokozatosan vörösesbarna, majd sötétbarna lesz. Kloroformot adunk a még meleg oldathoz, és kiszűrjük a kivált csapadékot. Kloroformmal alaposan kimossuk a csapadékot, majd csökkentett nyomáson ledesztilláljuk a kloroformot és a dimetü-formamidot az egyesített szűrletről és mosófolyadékról. Kloroformban feloldjuk a desztillációs maradékot, és a jód eltávolítása céljából 5%-os vizes nátrium-hipoklorid-oldattal, majd vízzel mossuk a kloroformos oldatot. Utána vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk az oldatot, és ledesztilláljuk az oldószert. Dy módon 137 mg (87%) terméket nyerünk. Analízis Cssl^NsO]8S5 képletre számított : C = 54,49%, N = 5,39%, talált: C = 54,32%, N = 5,16%, H = 5,66%, S =12,33%, H = 5,51%, S =11,97%. 5. 2”-0-Benzil-szulfonil-penta-N-tozil-4”,6”-0-ciklohexilidén-3’,4’-didezoxi-3’-én-kanamicin B (XV képlet, ahol a Ts tozilcsoport és a Bs a XIII képletű csoport) 4,6 ml dimetil-formamidban feloldunk 232 mg 3’,4’,2”-tri-0-benzü-szulfonil- penta-N-tozil-4”,6”-0- ciklohexilidén-kanamicin B-f, hozzáadunk 2,44 g nátrium-jodidot, és 1 órán át 100 °C hőmérsékleten kevertetjük az elegyet. Ezután az elegyhez hozzáadunk 20 ml kloroformot és 5%-os vizes nátrium-hipoklorit-oldatot, és alaposan összerázzuk. Elválasztjuk a kloroformos fázist, vízzel kimossuk, magnézium-szulfáton megszárítjuk, majd ledesztilláljuk róla az oldószereket, mégpedig a dimetil-formamidot toluolos azeotrop desztilláció útján. Ily módon 197 mg világos barna színű, szüárd halmazállapotú anyagot nyerünk. Szilikagél oszlopon kromatografálva (10 g Wacogel C—200, eluens: benzol és etil-acetát 2:1 arányú elegye) 164 mg (87%) színtelen terméket nyerünk, op.: 156-157 °C (bomlik), [a]p3 = —15° (c = 1, kloroform). Analízis C66H79N502oS6 képletre számított: C =54,49%, H = N = 4,81%, S = talált: C =54,17%, H = N = 4,50%, S = 5,47%, 13,22%, 5,49%, 12,95%. 5
